分类目录归档：日本同仁化学试剂盒

日本同仁化学グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　

发表于由

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グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　GSSG/GSH Quantification Kit

02 酸化ストレス関連試薬

GSSG/GSH Quantification Kit

グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　

  • 酸化ストレス関連試薬
  • 食品機能評価

グルタチオン定量キット

  • 製品コード
    G257　 GSSG/GSH Quantification Kit
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
200 tests ￥56,600 342-09011
キット内容
200 tests ・ Enzyme Solution
・ Coenzyme
・ Buffer Solution
・ Substrate (DTNB)
・ Standard GSH
・ Standard GSSG
・ Masking Reagent		 50 μl x1
x2
60 ml x1
x4
x1
x1
20 μl x1

  • グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　 日本語
    グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　
  • 取扱説明書 グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　 English
    グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　
  • プロトコル グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　 グルタチオン（還元型、酸化型）を分別定量したい
    グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　

技術情報

特長

1)酸化型グルタチオン(GSSG)、還元型グルタチオン(GSH)の分別定量が可能である。
2)短時間で簡便に多検体の測定が可能である。

参考文献

参考文献を表示する

1) M. E. Anderson, "Determination of Glutathione and Glutathione Disulfide in Biological Samples", Methods in Enzymol., 1985, 113, 548.
2) M. A. Baker, G. J. Cerniglia and A. Zaman, "Microtiter Plate Assay for the Measurement of Glutathione and Glutathione Disulfide in Large Numbers of Biological Samples", Anal. Biochem., 1990, 190, 360.
3) C. Vandeputte, I. Guizon, I. Genestie-Denis, B. Vannier and G. Lorenzon, "A Micrototer Plate Assay for Total Glutathione and Glutathione Disulfide Contents in Cultured/isolated Cells: Performance Study of a New Miniaturized Protocol", Cell Biol. Toxicol., 1994, 10, 415.
4) S. A. McGrath-Morrow and J. Stahl, "Inhibition of Glutamine Synthetase in A549 Cells During Hyperoxia", Am. J. Respir. Cell Mol. Biol., 2002, 27, 99.
5) T. Sato, K. Seyama, Y. Sato, H. Mori, S. Souma, T. Akiyoshi, Y. Kodama, T. Mori, S. Goto, K. Takahashi, Y. Fukuchi, N. Maruyama and A. Ishigami, "Senescence Marker Protein-30 Protects Mice Lungs from Oxidative Stress, Aging, and Smoking", Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2006, 174, 530.
6) M. L. Mulhern, C. J. Madson, A. Danford, K. Ikesugi, P. F. Kador and T. Shinohara, "The Unfolded Protein Response in Lens Epithelial Cells from Galactosemic Rat Lenses", Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 2006, 47(9), 3951.
7) N. Miura, Y. Yanagiba, K. Ohtani, M. Mita, and M. Togawa, "Diurnal Variation of Cadmium-induced Mortality in Mice", J. Toxicol. Sci., 2012, 37(1), 191.
8) K. Okabayashi, T. Narita, Y. Takahashi and H. Sugiya, "Effrct of Oxidative Stress on Secretory Function in Salivary Gland Cells", Oxidative Stress-Environmental Induction and Dietary Antioxidants, V. Lushchak, InTech, 2012, 189.
9) G. Tian, J. Sawashita, H. Kubo, S. Nishio, S. Hashimoto, N. Suzuki, H. Yoshimura, M. Tsuruoka, Y. Wang, Y. Liu, H. Luo, Z. Xu, M. Mori, M. Kitano, K. Hosoe, T. Takeda, S. Usami and K. Higuchi, "Ubiquinol-10 Supplementation Activates Mitochondria Functions to Decelerate Senescence in Senescence-Accelerated Mice", Antioxid. Redox Signal., 2014, 20(16), 2606.
10) H. Nakagawa, A. Umemura, K. Taniguchi, J. Font-Burgada, D. Dhar, H. Ogata, Z. Zhong, M. A. Valasek, E. Seki, J. Hidalgo, K. Koike, R. J. Kaufman and M. Karin, "ER Stress Cooperates with Hypernutrition to Trigger TNF-Dependent Spontaneous HCC Development", Cancer cell, 2014, 26(3), 331.
11) M. Sueyoshi, M. Fukunaga, M. Mei, A. Nakajima, G. Tanaka, T. Murase, Y. Narita, S. Hirata, and D. Kadowaki, "Effects of lactulose on renal function and gut microbiota in adenine-induced chronic kidney disease rats", Clinical and Experimental Nephrology., 2019,doi: 10.1007/s10157-019-01727-4.
12) S. Shiromizu, T. Yamauchi, N. Kusunose, N. Matsunaga, S. Koyanagi and S. Ohdo, Dosing Time-Dependent Changes in the Anti-tumor Effect of xCT Inhibitor Erastin in Human Breast Cancer Xenograft Mice', Biol. Pharm. Bull.., 2019, 42, (11), 1921-1925.
13) K. Ogawa, A. Noda, J. Ueda, T. Ogata, R. Matsuyama, Y. Nishizawa, S. Qiao, S. Iwata, M. Ito, Y. Fujihara, M. Ichihara, K. Adachi, Y. Takaoka and T. Iwamoto, "Forced expression of miR-143 and -145 in cardiomyocytes induces cardiomyopathy with a reductive redox shift", Cell. Mol. Biol. Lett., 2020, doi:10.1186/s11658-020-00232-x.

よくある質問

Q

GSH濃度はどうやって求めるのですか？

A

検量線を基に求めた総グルタチオン（GSH＋GSSG)濃度とGSSG濃度より、

下式を用いてGSH濃度を算出します。

　GSH濃度＝総グルタチオン濃度－[GSSG濃度]×2

　※GSSG（酸化型グルタチオン）はGSH（還元型グルタチオン）２分子に相当します。

　　 そのため、GSSG濃度を２倍にすることでGSH濃度に換算しています。

Q

Masking reagentを入れることで、GSSG由来のGSHまでマスキングされてしまわないのでしょうか？

A

酵素・補酵素添加後に、GSSGから生じたGSHは、マスキング剤と反応するより先にDTNBと反応してGSSGに戻るため、
GSSGから生じたGSHまでマスキングされることはありません。

Q

Total Glutathione Quantification Kit (同仁品コード：T419) と何が違うのでしょうか？

A

今回のGSSG/GSH Quantification Kit（G257）はTotal Glutathione Quantification Kit(T419)では出来なかったGSSGとGSHの測り分けができます。
酸化ストレスの指標として、GSHとGSSGの比率は注目されています。

Q

発色が弱い場合は、どうすればいいですか？

A

以下のような原因が考えられます。
【原因１】本キットでの測定範囲は 0.5μmol/l 以上です。測定試料に含まれるグルタチオン量が、それよりも少ない可能性があります。

＜対応１＞

測定範囲外の測定試料は、本キットでは測定できませんので、HPLC法など他の方法をご検討下さい。

可能であれば、前処理の希釈倍率を下げる、サンプル量を増やすなど、測定試料の濃度を測定範囲以上にして下さい。

※発色を強める為に、発色の時間を長くすると検量線の直線性が得られなくなりますので、ご注意下さい。

【原因２】発色を阻害する物質が含まれている可能性があります。例えば、SH基と反応する化合物（マレイミド類）などは測定に影響を及ぼします。

＜対応２＞

これらの化合物は前処理等で除くことができませんので、測定試料中に混在させない系で再度測定して下さい。

【原因３】反応時のpHが低く、発色阻害が起こっている可能性があります。

＜対応３＞

①測定時にSSA濃度が1%以下になってるか、ご確認下さい。SSA濃度が1%以上の場合、発色阻害が起こります。

②他の酸を用いた場合にはトリエタノールアミン等でpH7程度に中和するか、酸濃度が1％程度以下になるように希釈してから測定して下さい。

Q

酸化ストレスの指標としてグルタチオン濃度・GSH/GSSG比はよく測定されますが、 グルタチオンの他に酸化ストレスマーカーとなるものはありますか？

A

酸化ストレスマーカーについてまとめた資料を作成しております。
カスタマーサポートの視点から、各酸化ストレスマーカーの特徴・測定サンプルの前処理方法などを記載しておりますので、ご参照ください。

下記URLよりダウンロード可能です。

「はじめての酸化ストレスマーカー測定プロトコル～カスタマーサポートの視点から～」

Q

このKitで何サンプル測定できますか？

A

本キットは200testsです（96wellプレート2枚分）。

n=3とした場合、18サンプルの測り分けが可能です〈サンプルに着色がない場合）。

測り分けない場合（総グルタチオン量のみを測定する場合）は、50サンプル測定できます。

※サンプルに着色がある場合は、サンプルブランクの測定が必要です。

　 サンプルブランクの測定方法は、FAQ 「サンプルに着色がある場合の測定方法」をご参照下さい。

※サンプルのレイアウト例：レーン1～6はGSSG濃度測定、レーン7～12は総グルタチオン濃度測定

グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　

Q

サンプルに着色がある場合の測定方法

A

 サンプルに着色がある場合、以下の2つの方法のどちらかでサンプルブランクを差し引くことが可能です。
①Kinetic methodで測定を行う。

　　※検量線の傾きで検量線を作成する為、サンプルブランクの影響を受けない。

②グルタチオン濃度算出の際、O.D.blankを引く代わりに、別途、測定したO.D. sample blankを引く。

　　グルタチオン（GSH, GSGG) = (O.D. sample – O.D. sample blank) / 検量線の傾き

　　＜O.D. sample blankの測定方法＞

　　　　　取扱説明書　「4. 測定」に従い、吸光度を測定する。

　　　　　その際、Coenzyme working solution, Enzyme working solutionを添加せず、

　　　　　Buffer solutionと純水を添加する。

グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　

Q

サンプル中のglutathione量が多いのですが、 サンプルを薄める時はどのようにすればよいのでしょうか？

A

0.5％スルホサリチル酸（SSA)水溶液で希釈してください。
測定時のサンプル中SSA濃度は.0.5～1%にする必要があります。

SSA濃度が高いと反応時のpHが低くなり、吸光度に影響することが懸念されます。

Q

マスキングの時間（37℃、1時間）が長くなってしまっても問題ありませんか？
※マスキングの時間とは、Technical Manual 「測定方法」４．測定 3)にある 「37℃で1時間インキュベートする。」の操作を指します。

A

多少長くなっても構いません。2時間まで測定実績がございます。

Q

本キットを用いて総グルタチオン量のみを測定する場合、マスキングの時間（37℃、1時間）は省略してよいですか？
※マスキングの時間とは、Technical Manual 「測定方法」４．測定 3)にある 「37℃で1時間インキュベートする。」の操作を指します。

A

省略可能です。
尚、本キットはGSSGとGSHの測り分けが可能な設計となっております。

測り分けが必要ない場合は、Total Glutathione Quantification Kit (同仁品コード：T419) も

ご利用いただけます。

Q

GSSGとGSHの比率を測定することで、何が分かるのですか？

A

グルタチオンは通常、生体内で還元型（GSH）として存在していますが、
酸化ストレスなどの刺激によって酸化型（GSSG）に変換される為、

GSHとGSSGの比率が酸化ストレスの指標となります。

Q

推奨する5-スルホサリチル酸のメーカーやグレードはありますか？

A

特にメーカーの推奨はしておりませんが、試薬グレードの製品をご利用ください。

グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　 グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　

取扱条件

取扱条件
1.危険物第4類　第2石油類　危険等級Ⅲ, 2.安衛法,化審法, 3.火気厳禁 4.保存方法：冷蔵
危険・有害
シンボルマーク 		グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　グルタチオン定量キット GSSG/GSH Quantification Kit　
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日本同仁化学生化学用緩衝剤0.89 mol/l Tris-borate, pH 8.3(±0.1, 25℃), 20 mmol/l EDTA 10x TBE　

发表于由

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生化学用緩衝剤0.89 mol/l Tris-borate, pH 8.3(±0.1, 25℃), 20 mmol/l EDTA 10x TBE　10x TBE

03 分子生物学関連試薬

10x TBE

  • 分子生物学関連試薬

生化学用緩衝剤

0.89 mol/l Tris-borate, pH 8.3(±0.1, 25℃), 20 mmol/l EDTA

  • 製品コード
    MB04　 10x TBE
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 L ￥13,600 344-07511
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マニュアル

  • プロトコル 生化学用緩衝剤0.89 mol/l Tris-borate, pH 8.3(±0.1, 25℃), 20 mmol/l EDTA 10x TBE　 核酸を検出したい
    生化学用緩衝剤0.89 mol/l Tris-borate, pH 8.3(±0.1, 25℃), 20 mmol/l EDTA 10x TBE　

参考文献

参考文献を表示する

1) J. Sambrook, E. F. Fritsch and T. Maniatis, "Molecular Cloning:A Laboratory Manual", 2nd ed ., Cold Spring Harbor Laboratory, New York, 1989.

よくある質問

Q

結晶が析出しているのですが、使用できますか？

A

稀に結晶の析出がみられますが、ご使用上の性能に影響はありません。
その場合は、40℃で30分程度、加温溶解した後にフィルターで濾過をしてご使用下さい。

生化学用緩衝剤0.89 mol/l Tris-borate, pH 8.3(±0.1, 25℃), 20 mmol/l EDTA 10x TBE　 生化学用緩衝剤0.89 mol/l Tris-borate, pH 8.3(±0.1, 25℃), 20 mmol/l EDTA 10x TBE　

取扱条件

規格
性状： 本品は、無色液体である。
pH(25℃)： 8.2～8.4
RNase： 不検出
DNase： 不検出
取扱条件
PRTR法 第１種指定化学物質
危険・有害
シンボルマーク 		生化学用緩衝剤0.89 mol/l Tris-borate, pH 8.3(±0.1, 25℃), 20 mmol/l EDTA 10x TBE　
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生化学用緩衝剤0.89 mol/l Tris-borate, pH 8.3(±0.1, 25℃), 20 mmol/l EDTA 10x TBE　

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日本同仁化学DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit – γH2AX　- Green　

发表于由

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DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Green　DNA Damage Detection Kit – γH2AX　- Green

02 酸化ストレス関連試薬

DNA Damage Detection Kit – γH2AX　- Green

DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Green　

  • 酸化ストレス関連試薬
  • 細胞機能解析
  • 細胞老化

DNAダメージ検出抗体

  • 製品コード
    G265　 DNA Damage Detection Kit – γH2AX　- Green
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 set ￥35,200 343-09421
キット内容
1 set ・Anti γH2AX antibody
・Secondary antibody – Green
・Blocking Solution 		×1
×1
22 ml×1

  • DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Green　
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マニュアル

  • 取扱説明書 DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Green　 日本語
    DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Green　
  • 取扱説明書 DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Green　 English
    DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Green　

技術情報

DNAダメージの検出原理

DNA ダメージにより二重鎖切断が生じると、ヒストンタンパク質の一種であるH2AX が速やか、かつ広範囲にわたってリン酸化されます。リン酸化H2AX(γH2AX) は、DNA ダメージの鋭敏なマーカーであることから、化学物質や活性酸素、紫外線や放射線などの遺伝毒性及び発がん性評価への応用が期待されています。また、γH2AX の検出は近年では細胞老化を評価する指標としても知られています。
本製品はモノクローナル抗体研究所製の抗γH2AX 抗体を使用しています。DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Green　

よくある質問

Q

Anti γH2AX antibody staining solution及びSecondary antibody staining solutionは保存できますか？

A

保存はできません。その日のうちにご使用ください。

Q

抗体をキット付属のBlocking Solution以外の溶液で希釈してもいいですか？

A

キット付属のBlocking Solutionでの希釈をお勧めします。
他の溶液で希釈をするとバックグラウンドが上昇する可能性があります。

Q

多重染色時の注意点はありますか？

A

本キットではマウス由来の一次抗体を使用しているため、他抗原を同時染色する場合にはマウス由来以外の一次抗体を選択ください。

Q

組織染色時の注意点はありますか？

A

組織染色の際、マウス組織は使用できませんのでご注意ください。
マウス組織を染色すると、抗マウス抗体(蛍光標識二次抗体)がマウス組織中のIgGへ非特異吸着を起こし、バックグラウンドが上昇します。

 

＜キットに含まれる抗体情報＞　　　　　　 　　　　　　　

  由来 交差性
一次抗体 マウス ヒト、マウス
蛍光標識二次抗体 ヤギ マウスIgG

DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Green　 DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Green　

取扱条件

取扱条件
1.保存方法：冷蔵, 2.吸湿注意
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DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Green　

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日本同仁化学生化学用緩衝剤 HEPES　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

生化学用緩衝剤 HEPES　HEPES

13 生化学用緩衝剤

HEPES

生化学用緩衝剤 HEPES　

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB10　 HEPES
  • CAS番号
    7365-45-9
  • 化学名
    2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C8H18N2O4S=238.31
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
25 g ￥3,000 348-01372
100 g ￥7,200 346-01373
250 g ￥15,400 340-01371
500 g ￥25,200 342-01375
1 kg ￥48,600 340-01376
  • 生化学用緩衝剤 HEPES　
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技術情報

溶解例

11.92 g/50 ml（水）

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は何ですか？

A

-Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 HEPES　

Q

温度によりpHは変化しますか？

A

 変化します。温度が上がるほどpHは下がります。

下記にデータを示しますが、濃度によって変化の値は変わります。

0.1mol/lで調製した緩衝液（HEPES）の温度とpHの変化です。
Temp(℃）ｐＨ
14.2　　 7.30
15.1 　　7.28
16.9　　 7.26
18.9 　　7.24
20.9 　　7.22
22.8 　　7.21
24.9 　　7.19
26.2 　　7.17
28.8 　　7.15
29.9 　　7.13
30.8 　　7.12
32.4 　　7.10
33.7 　　7.08
34.2 　　7.07
35.2 　　7.06
36.0 　　7.05
36.4 　　7.04
48.8 　　6.87
67.0 　　6.70

Q

HEPESの調製方法を教えてください。

A

＜試薬＞
①0.1 mol/l HEPES 溶液
　HEPES 23.831 gを純水300～400 mlに完全に溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

②0.1 mol/l NaOH溶液
　NaOH 4gを純水200～300 mlに溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

＜pH調製＞
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 HEPES　

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

＊プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか？

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 HEPES　 生化学用緩衝剤 HEPES　

取扱条件

規格
性状： 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定)： 99.0％ 以上
水溶状： 試験適合 0.025 以下(320 nm)
乾燥減量(110℃)： 0.20％ 以下
強熱残分(硫酸塩)： 0.10％ 以下
重金属(Pbとして)： 0.0005％ 以下
鉄(Fe)： 0.0005％ 以下
IRスペクトル： 試験適合
取扱条件
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生化学用緩衝剤 HEPES　

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生化学用緩衝剤0.1 mol/L Tris-HCl, pH 8.0(±0.1, 25℃), 10 mmol/L EDTA 10x TE　10x TE

03 分子生物学関連試薬

10x TE

  • 分子生物学関連試薬

生化学用緩衝剤

0.1 mol/L Tris-HCl, pH 8.0(±0.1, 25℃), 10 mmol/L EDTA

  • 製品コード
    MB08　 10x TE
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
500 ml ￥11,600 344-07555
試験成績書

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参考文献

参考文献を表示する

1) J. Sambrook, E. F. Fritsch and T. Maniatis, "Molecular Cloning:A Laboratory Manual", 2nd ed ., Cold Spring Harbor Laboratory, New York, 1989.

取扱条件

規格
性状： 本品は、無色液体である。
pH(25℃)： 7.9～8.1
RNase： 不検出
DNase： 不検出
取扱条件
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生化学用緩衝剤0.1 mol/L Tris-HCl, pH 8.0(±0.1, 25℃), 10 mmol/L EDTA 10x TE　

関連製品

日本同仁化学生化学用緩衝剤 HEPPSO　

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生化学用緩衝剤 HEPPSO　HEPPSO

13 生化学用緩衝剤

HEPPSO

生化学用緩衝剤 HEPPSO　

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB11　 HEPPSO
  • CAS番号
    68399-78-0
  • 化学名
    2-Hydroxy-3-[4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinyl]propanesulfonic acid, monohydrate
  • 分子式・分子量
    C9H20N2O5S･H2O=286.35
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
25 g ￥7,400 340-04132
  • 生化学用緩衝剤 HEPPSO　
試験成績書

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技術情報

溶解例

14.32 g/50 ml（水）

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は何ですか？

A

-Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 HEPPSO　

Q

HEPPSOの調製方法を教えてください。

A

＜試薬＞
①0.1 mol/l HEPPSO 溶液
　HEPPSO 28.635 gを純水300～400 mlに完全に溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

②0.1 mol/l NaOH溶液
　NaOH 4 gを純水200～300 mlに溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

＜pH調製＞
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 HEPPSO　

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

＊プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

 

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか？

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 HEPPSO　 生化学用緩衝剤 HEPPSO　

取扱条件

規格
性状： 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定)： 99.0％ 以上
水溶状： 試験適合 0.050 以下(320 nm)
強熱残分(硫酸塩)： 0.10％ 以下
重金属(Pbとして)： 0.0005％ 以下
鉄(Fe)： 0.0005％ 以下
IRスペクトル： 試験適合
取扱条件
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生化学用緩衝剤 HEPPSO　

関連製品

日本同仁化学DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit – γH2AX　- Red　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Red　DNA Damage Detection Kit – γH2AX　- Red

02 酸化ストレス関連試薬

DNA Damage Detection Kit – γH2AX　- Red

DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Red　

  • 酸化ストレス関連試薬
  • 細胞機能解析
  • 細胞老化

DNAダメージ検出抗体

  • 製品コード
    G266　 DNA Damage Detection Kit – γH2AX　- Red
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 set ￥35,200 340-09431
キット内容
1 set ・Anti γH2AX antibody
・Secondary antibody – Red
・Blocking Solution		 ×1
×1
22 ml×1

  • DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Red　
試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Red　 日本語
    DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Red　
  • 取扱説明書 DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Red　 English
    DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Red　

技術情報

DNAダメージの検出原理

DNA ダメージにより二重鎖切断が生じると、ヒストンタンパク質の一種であるH2AX が速やか、かつ広範囲にわたってリン酸化されます。リン酸化H2AX(γH2AX) は、DNA ダメージの鋭敏なマーカーであることから、化学物質や活性酸素、紫外線や放射線などの遺伝毒性及び発がん性評価への応用が期待されています。また、γH2AX の検出は近年では細胞老化を評価する指標としても知られています。
本製品はモノクローナル抗体研究所製の抗γH2AX 抗体を使用しています。
DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Red　

よくある質問

Q

Anti γH2AX antibody staining solution及びSecondary antibody staining solutionは保存できますか？

A

保存はできません。その日のうちにご使用ください。

Q

抗体をキット付属のBlocking Solution以外の溶液で希釈してもいいですか？

A

キット付属のBlocking Solutionでの希釈をお勧めします。
他の溶液で希釈をするとバックグラウンドが上昇する可能性があります。

Q

多重染色時の注意点はありますか？

A

本キットではマウス由来の一次抗体を使用しているため、他抗原を同時染色する場合にはマウス由来以外の一次抗体を選択ください。

Q

組織染色時の注意点はありますか？

A

組織染色の際、マウス組織は使用できませんのでご注意ください。
マウス組織を染色すると、抗マウス抗体(蛍光標識二次抗体)がマウス組織中のIgGへ非特異吸着を起こし、バックグラウンドが上昇します。

 

＜キットに含まれる抗体情報＞　　　　　　 　　　　　　　

  由来 交差性
一次抗体 マウス ヒト、マウス
蛍光標識二次抗体 ヤギ マウスIgG

DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Red　 DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Red　

取扱条件

取扱条件
1.保存方法：冷蔵, 2.吸湿注意
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DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Red　

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    老化細胞検出キット（マイクロプレート用）

    Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal

  • DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Red　

    死細胞染色色素

    –Cellstain®- DAPI solution

日本同仁化学生化学用緩衝剤pH 8.0 (±0.1, 25℃) 1M Tris-HCl　

发表于由

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生化学用緩衝剤pH 8.0 (±0.1, 25℃) 1M Tris-HCl　1M Tris-HCl

03 分子生物学関連試薬

1M Tris-HCl

  • 分子生物学関連試薬

生化学用緩衝剤
pH 8.0 (±0.1, 25℃)

  • 製品コード
    MB10　 1M Tris-HCl
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
500 ml ￥11,600 348-07575
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参考文献

参考文献を表示する

1) J. Sambrook, E. F. Fritsch and T. Maniatis, "Molecular Cloning:A Laboratory Manual", 2nd ed ., Cold Spring Harbor Laboratory, New York, 1989.

取扱条件

規格
性状： 本品は、無色液体である。
pH(25℃)： 7.9～8.1
RNase： 不検出
DNase： 不検出
取扱条件
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生化学用緩衝剤pH 8.0 (±0.1, 25℃) 1M Tris-HCl　

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日本同仁化学DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit – γH2AX　- Deep Red　

发表于由

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DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Deep Red　DNA Damage Detection Kit – γH2AX　- Deep Red

02 酸化ストレス関連試薬

DNA Damage Detection Kit – γH2AX　- Deep Red

DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Deep Red　

  • 酸化ストレス関連試薬
  • 細胞機能解析
  • 細胞老化

DNAダメージ検出抗体

  • 製品コード
    G267　 DNA Damage Detection Kit – γH2AX　- Deep Red
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 set ￥35,200 347-09441
キット内容
1 set ・Anti γH2AX antibody
・Secondary antibody – Deep Red
・Blocking Solution		 ×1
×1
22 ml×1

  • DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Deep Red　
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マニュアル

  • 取扱説明書 DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Deep Red　 日本語
    DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Deep Red　
  • 取扱説明書 DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Deep Red　 English
    DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Deep Red　

技術情報

DNAダメージの検出原理

DNA ダメージにより二重鎖切断が生じると、ヒストンタンパク質の一種であるH2AX が速やか、かつ広範囲にわたってリン酸化されます。リン酸化H2AX(γH2AX) は、DNA ダメージの鋭敏なマーカーであることから、化学物質や活性酸素、紫外線や放射線などの遺伝毒性及び発がん性評価への応用が期待されています。また、γH2AX の検出は近年では細胞老化を評価する指標としても知られています。
本製品はモノクローナル抗体研究所製の抗γH2AX 抗体を使用しています。
DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Deep Red　

よくある質問

Q

Anti γH2AX antibody staining solution及びSecondary antibody staining solutionは保存できますか？

A

保存はできません。その日のうちにご使用ください。

Q

抗体をキット付属のBlocking Solution以外の溶液で希釈してもいいですか？

A

キット付属のBlocking Solutionでの希釈をお勧めします。
他の溶液で希釈をするとバックグラウンドが上昇する可能性があります。

Q

多重染色時の注意点はありますか？

A

本キットではマウス由来の一次抗体を使用しているため、他抗原を同時染色する場合にはマウス由来以外の一次抗体を選択ください。

Q

組織染色時の注意点はありますか

A

組織染色の際、マウス組織は使用できませんのでご注意ください。
マウス組織を染色すると、抗マウス抗体(蛍光標識二次抗体)がマウス組織中のIgGへ非特異吸着を起こし、バックグラウンドが上昇します。

 

＜キットに含まれる抗体情報＞　　　　　　 　　　　　　　

  由来 交差性
一次抗体 マウス ヒト、マウス
蛍光標識二次抗体 ヤギ マウスIgG

DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Deep Red　 DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Deep Red　

取扱条件

取扱条件
1.保存方法：冷蔵, 2.吸湿注意
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DNAダメージ検出抗体 DNA Damage Detection Kit - γH2AX　- Deep Red　

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    Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal

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    死細胞染色色素

    –Cellstain®- DAPI solution

日本同仁化学生化学用緩衝剤 MES　

发表于由

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生化学用緩衝剤 MES　MES

13 生化学用緩衝剤

MES

生化学用緩衝剤 MES　

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB12　 MES
  • CAS番号
    145224-94-8
  • 化学名
    2-Morpholinoethanesulfonic acid, monohydrate
  • 分子式・分子量
    C6H13NO4S･H2O=213.25
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
25 g ￥3,200 341-01622
100 g ￥7,400 349-01623
250 g ￥15,800 343-01621
500 g ￥29,400 345-01625
1 kg ￥53,000 343-01626
  • 生化学用緩衝剤 MES　
試験成績書

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技術情報

溶解例

10.66 g/50 ml（水）

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は何ですか？

A

-Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 MES　

Q

MESの調製方法を教えてください。

A

＜試薬＞
①0.1 mol/l MES 溶液
MES 21.325 gを純水300～400 mlに完全に溶解した後、
純水で全容1000 mLとする。

②0.1 mol/l NaOH溶液
　NaOH 4gを200～300 mlに溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

＜pH調製＞
①液25 mL に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。
生化学用緩衝剤 MES　
*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

 

＊プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか？

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 MES　 生化学用緩衝剤 MES　

取扱条件

規格
性状： 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定)： 99.0％ 以上
水溶状： 試験適合 0.020 以下(300 nm)
乾燥減量(110℃)： 6.0～9.0％
強熱残分(硫酸塩)： 0.10％ 以下
重金属(Pbとして)： 0.0005％ 以下
鉄(Fe)： 0.0005％ 以下
IRスペクトル： 試験適合
取扱条件
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生化学用緩衝剤 MES　

関連製品

日本同仁化学細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit – Fluo 4　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fluo 4　Calcium Kit – Fluo 4

04 細胞内蛍光プローブ

Calcium Kit – Fluo 4

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fluo 4　

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内カルシウムイオン測定キット

  • 製品コード
    CS22　 Calcium Kit – Fluo 4
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
10 plates ￥43,800 344-91261
キット内容
10 plates ・Fluo 4-AM　
・Dimethylsulfoxide　
・5% Pluronic F-127　
・5% Cremophor El　　
・250 mmol/l Probenecid　
・Recording Medium(2X)		 50 μg x10
2 ml x1
2.5 ml x1
2.5 ml x1
1.3 ml x1
100 ml x1

  • 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fluo 4　
試験成績書

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マニュアル

  • 取扱説明書 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fluo 4　 日本語
    細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fluo 4　
  • プロトコル 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fluo 4　 蛍光で細胞内 Ca を測定したい
    細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fluo 4　

技術情報

特 長

1) 細胞内Ca2+測定に必要な試薬が全て揃ったフルキット
2) Caプローブは1プレート毎に小分け済み [10 plates/kit]
3) プローブ溶解補助剤・漏れ出し防止剤の濃度は任意に設定可能
4) 測定系に影響の少ないWashタイプ

＊使用方法は、プロトコルをご覧下さい。

よくある質問

Q

WashとNon Washの測定結果に差はありますか？

A

ほとんど差はありません。
ただしNon WashタイプはQuenching Bufferを使用するため、

細胞や刺激剤によっては、蛍光強度の変化率やレスポンスに違いが見られる可能性があります。

Q

はじめて測定します。Ca2+プローブの原理や測定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細胞内Ca2+測定をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
原理、Ca2+プローブの特徴、測定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご参照下さい。
下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細胞内Ca2+を測定する方へ　－カスタマーサポート担当者の視点から－」

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fluo 4　 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fluo 4　

取扱条件

取扱条件
1.危険物第4類　第3石油類　危険等級Ⅲ, 2.火気厳禁 3.保存方法：冷凍,遮光
危険・有害
シンボルマーク 		細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fluo 4　
SDSダウンロード
細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fluo 4　

関連製品

日本同仁化学過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　

发表于由

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過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　Liperfluo

02 酸化ストレス関連試薬

Liperfluo

過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　

  • 酸化ストレス関連試薬

過酸化脂質検出蛍光試薬

  • 製品コード
    L248　 Liperfluo
  • CAS番号
    1448846-35-2
  • 化学名
    N-(4-Diphenylphosphinophenyl)-N‘-(3,6,9,12-tetraoxatridecyl)perylene-3,4,9,10-tetracarboxydiimide
  • 分子式・分子量
    C51H41N2O8P=840.85
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 set (50 μg x5) ￥22,000 345-91551

＜使用回数の目安＞ 50 µgあたり、5-50回（保存不可)

  • 過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　
試験成績書

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マニュアル

  • 取扱説明書 過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　 日本語
    過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　
  • 取扱説明書 過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　 English
    過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　
  • プロトコル 過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　 生細胞の過酸化脂質を蛍光検出したい
    過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　

技術情報

過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　

図1 過酸化脂質によるLiperfluoの励起および蛍光スペクトル変化（エタノール溶媒中）

参考文献

参考文献を表示する

Liperfluoが使用された細胞種別の参考文献（細胞名：英数順）

文献No. 対象サンプル 測定機器 引用(リンク)
1 3T3-L1 adipocytes Microscope Osteocalcin triggers Fas/FasL-mediated necroptosis in adipocytes via activation of p300
2 4T1 Microscope Boosting the Ferroptotic Antitumor Efficacy via Site-Specific Amplification of Tailored Lipid Peroxidation
3 4T1, HT1080 Microscope WO3/Pt nanoparticles promote light-induced lipid peroxidation and lysosomal instability within tumor cells
4 B16, HT-1080 FCM CD8+ T cells regulate tumour ferroptosis during cancer immunotherapy
5 B16-F10 FCM Chemically Programmed Vaccines: Iron Catalysis in Nanoparticles Enhances Combination Immunotherapy and Immunotherapy-Promoted Tumor Ferroptosis
6 BeWo Microscope PLA2G6 guards placental trophoblasts against ferroptotic injury
7 BMDM FCM SiO2 and TiO2 nanoparticles synergistically trigger macrophage inflammatory responses
8 Brain slices from　LN229TAZ(4SA) Microscope Neutrophil-induced ferroptosis promotes tumor necrosis in glioblastoma progression
9 Burkitt's Lymphoma FCM Artesunate activates the ATF4-CHOP-CHAC1 pathway and affects ferroptosis in Burkitt's Lymphoma
10 BV2 Microglial Microscope Induction of ferroptosis in response to graphene quantum dots through mitochondrial oxidative stress in microglia
11 Hacat Microscope Blue light-induced oxidative stress in live skin
12 HBE Microscope Pseudomonas aeruginosa utilizes host polyunsaturated phosphatidylethanolamines to trigger theft-ferroptosis in bronchial epithelium
13 HEI-OC1 Microscope Inhibition of ferroptosis protects House Ear Institute-Organ of Corti 1 cells and cochlear hair cells from cisplatin-induced ototoxicity
14 HEI-OC1 Microscope Liproxstatin-1 Protects Hair Cell-Like HEI-OC1 Cells and Cochlear Hair Cells against Neomycin Ototoxicity
15 HeLa Microscope Golgi stress mediates redox imbalance and ferroptosis in human cells
16 HeLa FCM Membrane Damage during Ferroptosis Is Caused by Oxidation of Phospholipids Catalyzed by the Oxidoreductases POR and CYB5R1
17 HeLa, SAS Microscope
FCM		 Mitochondrial dysfunction promotes aquaporin expression that controls hydrogen peroxide permeability and ferroptosis
18 HepG2 Microscope Novel Fluorescence-Based Method To Characterize the Antioxidative Effects of Food Metabolites on Lipid Droplets in Cultured Hepatocytes
19 HL-60 Microscope Oxygenated phosphatidylethanolamine navigates phagocytosis of ferroptotic cells by interacting with TLR2
20 Horse breed stallions FCM Effects of media and promoters on different lipid peroxidation assays in stallion sperm
21 Human hair Microscope Mechanism of Cuticle Hole Development in Human Hair Due to UV-Radiation Exposure
22 MEF Microscope Oxidized arachidonic and adrenic PEs navigate cells to ferroptosis
23 Murine T cells FCM Murine T Cell Maturation Entails Protection from MBL2, but Complement Proteins Do Not Drive Clearance of Cells That Fail Maturation in the Absence of NKAP
24 NCI-ADR/Res (NAR)  Microscope Triggered ferroptotic polymer micelles for reversing multidrug resistance to chemotherapy
25 OEC-M1 Microscope Assessment of zero-valent iron-based nanotherapeutics for ferroptosis induction and resensitization strategy in cancer cells
26 PMVECs Microscope Genetic inactivation of the phospholipase A2 activity of peroxiredoxin 6 in mice protects against LPS-induced acute lung injury
27 RAW 264.7 Microscope Redox lipid reprogramming commands susceptibility of macrophages and microglia to ferroptotic death
28 RAW 264.7 FCM Nano-decocted ferrous polysulfide coordinates ferroptosis-like death in bacteria for anti-infection therapy
29 SH-SY5Y FCM New aspects of 24(S)-hydroxycholesterol in modulating neuronal cell death
30 SH-SY5Y Microscope
FCM		 A novel fluorescent probe with high sensitivity and selective detection of lipid hydroperoxides in cells
31 SH-SY5Y Microscope Activation of p62-Keap1-Nrf2 Pathway Protects 6-Hydroxydopamine-Induced Ferroptosis in Dopaminergic Cells
32 THP-1 FCM Molecular hydrogen suppresses free radical-induced cell death by mitigating fatty acid peroxidation and mitochondrial dysfunction
33 THP-1 FCM Molecular hydrogen regulates gene expression by modifying the free radical chain reactiondependent generation of oxidized phospholipid mediators

よくある質問

Q

S343 Spy-LHPとの違いは何ですか？

A

DMSOへの溶解性が増し、生細胞の過酸化脂質の染色が容易になりました。
溶解例：1 mmol/l (50 µg/60 µl DMSO)

Q

蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーで観察する際、どの励起フィルター、レーザーが使用可能でしょうか？

A

蛍光顕微鏡の場合、GFPフィルター（励起：450-490 nm, 蛍光:500-545 nm）やFITCフィルター（励起：467-498 nm, 蛍光:513-556 nm）が使用可能です。

フローサイトメトリーの場合は、488nmで励起可能です。

Q

培地中のフェノールレッドや血清の影響はありますか？
また、バックグランドが高い場合や、蛍光が弱い(probeが光らない)場合に改善する点はありますか？

A

フェノールレッドや血清入り培地でも使用可能です。
ただし、バックグランドが高い場合はPBSに置換して下さい。
　　
また、バックグランドが高い場合、Liperfluoが光により自然酸化されている可能性があります。
インキュベーション時もなるべく遮光するようにしてください。
（溶解後は必ずアルミ箔などで遮光してください。）

蛍光強度が弱い場合、反応時間を長くしてもバックグランドも高くなってしまうためお勧めできません。
そのため、装置の測定（蛍光観察）の条件を調整してください。
→励起光の強度を強くする。
→露光時間を長くする。

Q

浮遊細胞と付着細胞のどちらでも使用可能でしょうか？
また、固定化した細胞を染色することはできますか？

A

浮遊細胞、付着細胞、どちらでも使用可能です。
HL-60細胞（浮遊細胞）、CHO細胞・SH-SY5Y細胞（付着細胞）で実績があります。
固定化した細胞では染色することはできません。

過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　 過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　

取扱条件

規格
性状： 本品は、暗赤色結晶性粉末又は固体である。
純度(HPLC)： 90.0％ 以上
NMRスペクトル： 試験適合
取扱条件
1.保存方法：冷蔵,遮光, 2.窒素置換
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過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　

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    Lipi-Blue

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    脂肪滴測定キット

    Lipid Droplet Assay Kit – Blue

  • 過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　

    ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬

    MitoPeDPP

  • 過酸化脂質検出蛍光試薬 Liperfluo　

    グルタチオン定量キット

    GSSG/GSH Quantification Kit

日本同仁化学生化学用緩衝剤 MOPS　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

生化学用緩衝剤 MOPS　MOPS

13 生化学用緩衝剤

MOPS

生化学用緩衝剤 MOPS　

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB13　 MOPS
  • CAS番号
    1132-61-2
  • 化学名
    3-Morpholinopropanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C7H15NO4S=209.26
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
25 g ￥3,800 349-01802
100 g ￥7,800 345-01804
250 g ￥18,400 341-01801
500 g ￥28,200 343-01805
1 kg ￥50,200 341-01806
  • 生化学用緩衝剤 MOPS　
試験成績書

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技術情報

溶解例

10.46 g/50 ml（水）

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は何ですか？

A

 -Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 MOPS　

Q

MOPSの調製方法を教えてください。

A

＜試薬＞
①0.1 mol/l MOPS 溶液
　MOPS 20.927 gを純水300～400 ml に完全に溶解した後、
　純水で全容1000 ml とする。

②0.1 mol/l NaOH溶液
　NaOH 4 gを純水200～300 ml に溶解した後、
　純水で全容1000 ml とする。

＜pH調製＞
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 MOPS　

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

＊プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか？

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 MOPS　 生化学用緩衝剤 MOPS　

取扱条件

規格
性状： 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定)： 99.0％ 以上
水溶状： 試験適合 0.020 以下(300 nm)
乾燥減量(110℃)： 0.30％ 以下
強熱残分(硫酸塩)： 0.10％ 以下
重金属(Pbとして)： 0.0005％ 以下
鉄(Fe)： 0.0005％ 以下
IRスペクトル： 試験適合
取扱条件
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生化学用緩衝剤 MOPS　

関連製品

日本同仁化学細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit – Fura 2　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fura 2　Calcium Kit – Fura 2

04 細胞内蛍光プローブ

Calcium Kit – Fura 2

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fura 2　

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内カルシウムイオン測定キット

  • 製品コード
    CS23　 Calcium Kit – Fura 2
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
10 plates ￥33,200 341-91271
キット内容
10 plates ・Fura 2-AM
・Dimethylsulfoxide
・5% Pluronic F-127
・5% Cremophor El
・250 mmol/l Probenecid
・Recording Medium(2X)		 50 μg x10
2 ml x1
2.5 ml x1
2.5 ml x1
1.3 ml x1
100 ml x1

  • 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fura 2　
試験成績書

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  • ご購入方法
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マニュアル

  • 取扱説明書 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fura 2　 日本語
    細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fura 2　
  • プロトコル 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fura 2　 蛍光で細胞内Ca を測定したい
    細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fura 2　

技術情報

測定原理

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fura 2　

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fura 2　

よくある質問

Q

WashとNon Washの測定結果に差はありますか？

A

ほとんど差はありません。
ただしNon WashタイプはQuenching Bufferを使用するため、細胞や刺激剤によっては、蛍光強度の変化率やレスポンスに違いが見られる可能性があります。

Q

はじめて測定します。Ca2+プローブの原理や測定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細胞内Ca2+測定をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
原理、Ca2+プローブの特徴、測定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細胞内Ca2+を測定する方へ　－カスタマーサポート担当者の視点から－」

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fura 2　 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fura 2　

取扱条件

取扱条件
1.危険物第4類　第3石油類　危険等級Ⅲ, 2.火気厳禁 3.保存方法：冷凍,遮光
危険・有害
シンボルマーク 		細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fura 2　
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細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit - Fura 2　

関連製品

日本同仁化学ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　MitoPeDPP

02 酸化ストレス関連試薬

MitoPeDPP

ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　

  • 酸化ストレス関連試薬
  • 細胞機能解析
  • ミトコンドリア関連

ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬

  • 製品コード
    M466　 MitoPeDPP
  • CAS番号
    –
  • 化学名
    3-[4-(Perylenylphenylphosphino)phenoxy]propyltriphenylphosphonium iodide
  • 分子式・分子量
    C53H41IOP2=882.74
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
5 μg x 3 ￥19,800 346-91721
  • ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　
試験成績書

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マニュアル

  • 取扱説明書 ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　 日本語
    ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　
  • 取扱説明書 ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　 English
    ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　
  • プロトコル ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　 生細胞の過酸化脂質を蛍光検出したい
    ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　

技術情報

検出原理

ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　

MitoPeDPPは生細胞膜を透過して分子内の正電荷の作用によりミトコンドリアに集積した後、ミトコンドリア膜内の過酸化物による酸化を受けて蛍光が増大する。

 

参考文献

参考文献を表示する

1) K. Shioji K, Y. Oyama, K. Okuma and H. Nakagawa, "Synthesis and properties of fluorescence probe for detection of peroxides in mitochondria.", Bioorg Med Chem Lett., 2010, 20, (13), 3911.
2) S. Oka, J. Leon, K. Sakumi, T. Ide, D. Kang, F. M. LaFerla and Y. Nakabeppu, "Human mitochondrial transcriptional factor A breaks the mitochondria-mediated vicious cycle in Alzheimer’s disease", Scientific Reports ., 2016, DOI: 10.1038/srep37889 , .
3) S. Nakamura, A. Nakanishi, M. Takazawa, S. Okihiro, S. Urano and K. Fukui, "Ionomycin-induced calcium influx induces neurite degeneration in mouse neuroblastoma cells: Analysis of a time-lapse live cell imaging system", Free Radical Research., 2016, 50, (11), 1214.
4) M. Akimoto, R. Maruyama, Y. Kawabata, Y. Tajima and K. Takenaga, "Antidiabetic adiponectin receptor agonist AdipoRon suppresses tumour growth of pancreatic cancer by inducing RIPK1/ERKdependent necroptosis", Cell Death Dis., 2018, 9, 804.
5) M. Álvarez-Córdoba, A. Fernández Khoury, M. Villanueva-Paz, C. Gómez-Navarro, I. Villalón-García, J. M. Suárez-Rivero, S. Povea-Cabello, M. Mata, D. Cotán, M. Talaverón-Rey, A. J. Pérez-Pulido, J. J. Salas, E. M. Pérez-Villegas, A. Díaz-Quintana, J. A. Armengol, J. A. Sánchez-Alcázar , "Pantothenate Rescues Iron Accumulation in Pantothenate Kinase-Associated Neurodegeneration Depending on the Type of Mutation.", Mol. Neurobiol. ., 2019, 56, (5), 3638.

取扱条件

規格
性状： 本品は、黄色～橙黄色結晶性粉末又は固体である。
純度(HPLC)： 80.0％ 以上
NMRスペクトル： 試験適合
取扱条件
1.保存方法：冷蔵,遮光, 2.窒素置換
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ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　

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    ミトコンドリア染色用色素 Green

    MitoBright LT Green

  • ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　

    マイトファジー検出キット

    Mitophagy Detection Kit

  • ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　

    ミトコンドリア一重項酸素検出試薬

    Si-DMA for Mitochondrial Singlet Oxygen Imaging

  • ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬 MitoPeDPP　

    グルタチオン定量キット

    GSSG/GSH Quantification Kit

日本同仁化学生化学用緩衝剤 MOPSO　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

生化学用緩衝剤 MOPSO　MOPSO

13 生化学用緩衝剤

MOPSO

生化学用緩衝剤 MOPSO　

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB14　 MOPSO
  • CAS番号
    68399-77-9
  • 化学名
    2-Hydroxy-3-morpholinopropanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C7H15NO5S=225.26
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
25 g ￥4,800 341-04162
  • 生化学用緩衝剤 MOPSO　
試験成績書

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技術情報

溶解例

11.26 g/50 ml（水）

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は何ですか？

A

-Good's Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 MOPSO　

Q

MOPSOの調製方法を教えてください。

A

＜試薬＞
①0.1 mol/l MOPSO 溶液
　MOPSO 22.527 gを純水300～400 mlに完全に溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

②0.1 mol/l NaOH溶液
　NaOH 4gを純水200～300 mlに溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

＜pH調製＞
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 MOPSO　
*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。

*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

＊プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

 

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか？

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 MOPSO　 生化学用緩衝剤 MOPSO　

取扱条件

規格
性状： 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定)： 99.0％ 以上
水溶状： 試験適合 0.025 以下(320 nm)
乾燥減量(110℃)： 0.20％ 以下
強熱残分(硫酸塩)： 0.10％ 以下
重金属(Pbとして)： 0.0005％ 以下
鉄(Fe)： 0.0005％ 以下
IRスペクトル： 試験適合
取扱条件
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生化学用緩衝剤 MOPSO　

関連製品

日本同仁化学細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II – Fluo 4　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fluo 4　Calcium Kit II – Fluo 4

04 細胞内蛍光プローブ

Calcium Kit II – Fluo 4

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fluo 4　

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内カルシウムイオン測定キット

  • 製品コード
    CS32　 Calcium Kit II – Fluo 4
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
10 plates ￥53,600 348-91281
キット内容
10 plates ・Fluo 4-AM
・Dimethylsulfoxide
・5% Pluronic F-127
・5% Cremophor El
・250 mmol/l Probenecid
・Hanks’ HEPES Buffer (10X)
・Quenching Buffer 		50 μg x10
2 mlx1
2.5 ml x1
2.5 ml x1
1.3 ml x1
6 ml x1
55 ml x1

  • 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fluo 4　
試験成績書

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  • ご購入方法
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マニュアル

  • 取扱説明書 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fluo 4　 日本語
    細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fluo 4　
  • プロトコル 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fluo 4　 蛍光で細胞内 Ca を測定したい
    細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fluo 4　

技術情報

特長

1) 細胞内Ca2+測定に必要な試薬が全て揃ったフルキット。
2) Caプローブは1プレート毎に小分け済み [10 plates/kit]。
3) プローブ溶解補助剤・漏れ出し防止剤の濃度は任意に設定可能。
4) 洗浄操作を必要としないNon-Washタイプ。

＊使用方法は、プロトコルをご覧下さい。

よくある質問

Q

WashとNon Washの測定結果に差はありますか？

A

ほとんど差はありません。
ただしNon WashタイプはQuenching Bufferを使用するため、細胞や刺激剤によっては、蛍光強度の変化率やレスポンスに違いが見られる可能性があります。

Q

はじめて測定します。Ca2+プローブの原理や測定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細胞内Ca2+測定をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
原理、Ca2+プローブの特徴、測定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細胞内Ca2+を測定する方へ －カスタマーサポート担当者の視点から－」

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fluo 4　 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fluo 4　

取扱条件

取扱条件
1.危険物第4類　第3石油類　危険等級Ⅲ, 2.火気厳禁 3.保存方法：冷凍,遮光
危険・有害
シンボルマーク 		細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fluo 4　
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細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fluo 4　

関連製品

日本同仁化学マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　MDA Assay Kit

02 酸化ストレス関連試薬

MDA Assay Kit

マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　

  • 酸化ストレス関連試薬
  • 細胞機能解析
  • 細胞毒性
  • フェロトーシス

マロンジアルデヒド測定キット

  • 細胞、組織中のMDA量を測定可能
  • 操作時間を大幅に短縮
  • 製品コード
    M496　 MDA Assay Kit
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
100 tests ￥29,000 341-09961

<使用回数の目安> 96-well plate 1枚

キット内容
100 tests ・Lysis Buffer
・Dilution Buffer
・Standard
・Substrate
・Antioxidant		 6.5 ml×1
10 ml×1
200 ×l×1
58 mg×1
200 ×l×1

  • マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　
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マニュアル

  • 取扱説明書 マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　 日本語
    マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　
  • 取扱説明書 マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　 英語
    マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　

技術情報

細胞、組織中のMDA量を測定可能

細胞を測定試料とする場合は、蛍光法で測定できます。組織を測定試料とする場合は、サンプル量や予想されるMDA含有量より蛍光法もしくは比色法から測定方法を選択できます。
 

  蛍光法 比色法 必要サンプル量 測定可能MDA濃度範囲
細胞 ○ × 1-3×107 cells 1-10 µmol
組織 ○ ○

蛍光法：10-30 mg

比色法：20-50 mg

蛍光法：1-10 µmol

比色法：1-50 µmol

 

よくある質問

Q

本キットの測定原理を教えてください。

A

本キットはSubstrateにチオバルビツール酸 (TBA)を使用しております。MDAとTBAの反応により生成したTBA付加体の吸光度もしくは蛍光強度を測定し、Standardの値と比較することでサンプル中のMDAを定量することができます。

Q

1キットあたり測定可能なサンプル数を教えてください。

A

サンプルの測定をn=3で行った場合、24サンプルの測定が可能です。

Q

溶液調製後の保存方法を教えてください。

A

Substrate stock solutionは調製後、冷凍保存 (－20℃)して下さい(2カ月間安定)。
Antioxidant PBS solutionとWorking solutionは保存できません。その日の内にお使い下さい。

Q

本キットを使用する場合、細胞数の補正は必要ですか？

A

薬剤刺激等を行っても細胞数の変化がない場合は、細胞数の補正は必要ありません。
細胞数が変化する場合は、タンパク質定量法による補正を行うことで正確なMDAを定量することができます。
なお、タンパク質定量で補正を行う場合はBCA法を推奨します。

Q

本キットの定量下限値を教えてください。

A

蛍光法、比色法ともに1 µmol/lのMDA濃度となります。

マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　 マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　

取扱条件

取扱条件
1.危険物第4類　第3石油類　危険等級Ⅲ, 2.安衛法,化審法, 3.火気厳禁 4.保存方法：冷凍
PRTR法 第１種指定化学物質
危険・有害
シンボルマーク 		マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　
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マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　

    グルタチオン定量キット

    GSSG/GSH Quantification Kit

  • マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　

    細胞内鉄イオン測定試薬

    FerroOrange

  • マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　

    トータルROS検出キット

    ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-

  • マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit　

    過酸化脂質検出蛍光試薬

    Liperfluo

日本同仁化学生化学用緩衝剤 PIPES　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

生化学用緩衝剤 PIPES　PIPES

13 生化学用緩衝剤

PIPES

生化学用緩衝剤 PIPES　

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB15　 PIPES
  • CAS番号
    5625-37-6
  • 化学名
    Piperazine-1,4-bis(2-ethanesulfonic acid)
  • 分子式・分子量
    C8H18N2O6S2=302.37
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
25 g ￥3,800 341-02222
100 g ￥8,600 347-02224
500 g ￥31,000 345-02225
  • 生化学用緩衝剤 PIPES　
試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

技術情報

溶解例

15.12 g/50 ml [30 ml(2 mol/l-NaOH) + 水]

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は何ですか？

A

 -Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 PIPES　

Q

PIPESの調製方法を教えてください。

A

＜試薬＞
①0.1 mol/l PIPES 溶液
　PIPES 30.237 g とNaOH 4 g を純水300～400 mlに完全に溶解した後、
　純水で全容を1000 mlとする。
　*PIPESは水に難溶のためモノナトリウム塩溶液として調製する。

②0.1 mol/l NaOH溶液
　NaOH 4gを純水200～300 mlに溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

＜pH調製＞
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 PIPES　
*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

＊プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

 

 

 

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか？

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 PIPES　 生化学用緩衝剤 PIPES　

取扱条件

規格
性状： 本品は、白色結晶性粉末でアルカリに溶ける。
純度(滴定)： 99.0％ 以上
アルカリ溶状： 試験適合 0.030 以下(300 nm)
乾燥減量(110℃)： 0.50％ 以下
強熱残分(硫酸塩)： 0.10％ 以下
重金属(Pbとして)： 0.0005％ 以下
鉄(Fe)： 0.0005％ 以下
IRスペクトル： 試験適合
取扱条件
SDSダウンロード
生化学用緩衝剤 PIPES　

関連製品

日本同仁化学細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II – Fura 2　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fura 2　Calcium Kit II – Fura 2

04 細胞内蛍光プローブ

Calcium Kit II – Fura 2

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fura 2　

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内カルシウムイオン測定キット

  • 製品コード
    CS33　 Calcium Kit II – Fura 2
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
10 plates ￥42,800 345-91291
キット内容
10 plates ・Fura 2-AM
・Dimethylsulfoxide　
・5% Pluronic F-127　
・5% Cremophor El　
・250 mmol/l Probenecid　
・Hanks’ HEPES Buffer (10X)　
・Quenching Buffer　		 50 μg x10
2 ml x1
2.5 ml x1
2.5 mlx1
1.3 ml x1
6 ml x1
55 ml x1

  • 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fura 2　
試験成績書

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  • ご購入方法
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マニュアル

  • 取扱説明書 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fura 2　 日本語
    細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fura 2　
  • プロトコル 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fura 2　 日本語
    細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fura 2　

技術情報

特長

1) 細胞内Ca2+測定に必要な試薬が全て揃ったフルキット
2) Caプローブは1プレート毎に小分け済み [10 plates/kit]
3) プローブ溶解補助剤・漏れ出し防止剤の濃度は任意に設定可能
4) 洗浄操作を必要としないNon-Washタイプ

＊使用方法は、プロトコルをご覧下さい。

よくある質問

Q

WashとNon Washの測定結果に差はありますか？

A

ほとんど差はありません。

ただしNon WashタイプはQuenching Bufferを使用するため、細胞や刺激剤によっては、蛍光強度の変化率やレスポンスに違いが見られる可能性があります。

Q

はじめて測定します。Ca2+プローブの原理や測定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細胞内Ca2+測定をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
原理、Ca2+プローブの特徴、測定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細胞内Ca2+を測定する方へ －カスタマーサポート担当者の視点から－」

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fura 2　 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fura 2　

取扱条件

取扱条件
1.危険物第4類　第3石油類　危険等級Ⅲ, 2.火気厳禁 3.保存方法：冷凍,遮光
危険・有害
シンボルマーク 		細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fura 2　
SDSダウンロード
細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - Fura 2　

関連製品

日本同仁化学トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-

02 酸化ストレス関連試薬

ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-

トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　

  • 酸化ストレス関連試薬
  • 蛍光色素

トータルROS検出キット

  • トータルROSを高感度に検出
  • 蛍光顕微鏡、プレートリーダー、フローサイトメーターで検出可能
  • 製品コード
    R252　 ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
100 tests ￥18,000 340-09811
キット内容
100 tests ・Highly Sensitive DCFH-DA Dye
・loading Buffer (10x)		 10 ×l×1
1.0 ml×1

  • トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　 日本語
    トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　
  • 取扱説明書 トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　 English
    トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　

技術情報

既存試薬との比較

活性酸素種に対する反応選択性

Highly Sensitive DCFH-DAは活性酸素種（ROS）に対して、DCFH-DAと同様の反応性を示します。
また、DCFH-DAと同様の蛍光特性（λex：505 nm、λem：525 nm）を持つため、同じ励起・蛍光波長での検出が可能です。

トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　

 

検出感度の比較

過酸化水素処理したHeLa細胞（1×104 cells/ml）をDCFH-DAまたはROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-で染色し、細胞内ROSの検出能を比較しました。 結果、いずれの検出装置においてもROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-ではDCFH-DAよりも高感度に細胞内のROSを検出できました。

①蛍光顕微鏡での検出
※Highly Sensitive DCFH-DAの観察条件で比較

トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　
（スケールバー：50 µm）

<検出条件>
 GFPフィルター(Ex. 450 – 490 nm / Em. 500 – 550 nm)
 細胞種：HeLa細胞

 

②蛍光プレートリーダーでの検出

　トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　

<検出条件>
 Ex. 490 – 520 nm / Em. 510 – 540 nm
 細胞種：HeLa細胞

 

③フローサイトメーターでの検出

トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　

<検出条件>
 FITC laser gain：215 V
 細胞種：HeLa細胞

参考文献

参考文献を表示する
文献No. 対象サンプル 装置 引用（リンク）
1)

細胞
U-251MG cells(ヒトグリア芽腫・アストロサイトーマ )

 蛍光顕微鏡 S. Kato, "Effects of platinum‑coexisting dopamine with X‑ray irradiation upon human glioblastoma cell proliferation", Hum. Cell, 2021, doi:10.1007/s13577-021-00591-3.
2)

細胞
Valve Interstitial Cells(弁間質細胞)

 蛍光顕微鏡 K. Kanno, T. Sakaue, M. Hamaguchi, K. Namiguchi, D. Nanba, J. Aono, M. Kurata, J. Masumoto, S. Higashiyama, H. Izutani, "Hypoxic Culture Maintains Cell Growth of the Primary Human Valve Interstitial Cells with Stemness", Int. J. Mol. Sci. 2021, doi:10.3390/ijms221910534.
3)

細胞
BPH-1細胞(LPS誘導)

 フローサイトメーター C. Fang, L. Wu, M. Zhao, T. Deng, J. Gu, X. Guo, C. Li, W. Li, X. Zeng, "Periodontitis Exacerbates Benign Prostatic Hyperplasia through Regulation of Oxidative Stress and Inflammation", Oxid. Med. Cell. Longevity, 2021, doi:10.1155/2021/2094665.
4) 菌
（Synechococcus elongatus PCC7942)		 プレートリーダー M. Tamoi and S. Shigeoka, "CP12 Is Involved in Protection against High Light Intensity by Suppressing the ROS Generation in Synechococcus elongatus PCC7942", Plants, 2021, doi:10.3390/plants10071432.
5) 細胞
SW982(ヒト滑膜肉腫細胞株)		 蛍光顕微鏡 S. Xia, Z. Ma, B. Wang, F. Gao, C. Yi, X. Zhou, S. Guo, L. Zhou, "In vitro anti-synovial sarcoma effect of diallyl trisulfide and mRNA profiling", Gene, 2021, doi:10.1016/j.gene.2021.146172.
6) 細胞
BRL3A(肝由来細胞株)		 蛍光顕微鏡 Z. Luo, Q. Gao, H. Zhang, Y. Zhang, S. Zhou, J. Zhang, W. Xu, J. Xu, " Microbe-derived antioxidants attenuate cobalt chloride-induced mitochondrial function, autophagy and BNIP3-dependent mitophagy pathways in BRL3A cells", 2022, doi:10.1016/j.ecoenv.2022.113219.

よくある質問

Q

1キットで測定可能なサンプル数を教えてください。

A

測定可能なサンプル数は以下をご参考ください。
・ 96-well plate：1枚
・ ibidi 8-well plate：6枚
・ 35 mm dish：5枚
・ 6-well plate：5ウェル

Q

ポジティブコントロールになる実験例はありますか？

A

取扱説明書に過酸化水素処理をしたHeLa細胞による検出例を掲載しております。

Q

Highly Sensitive DCFH-DA working solutionはLoading Buffer以外でも調製できますか？

A

染色時の細胞へのダメージを軽減するため付属のLoading Bufferを推奨しますが、Hanks’ HEPESやHBSSでも調製できます。
培地で調製する場合は無血清培地をご使用ください。

Q

染色後の洗浄には、HBSSの代わりにPBSを使用できますか？

A

細胞へのダメージを軽減するためHBSSを推奨しております。
HBSSがお手元にない場合は培地での洗浄をお勧めします。

Q

蛍光顕微鏡でイメージングする際の注意点はありますか？

A

色素はROSと反応し、酸化することで蛍光を発します。
励起光を照射し続けると色素が酸化されることでバックグラウンドが上昇するため、イメージング画像を取得する際は明視野でピントを調整後に蛍光画像を取得してください。

Q

フローサイトメーターで使用する際、細胞を剥がす操作はどの段階で行えば良いですか？

A

取扱説明書 操作6の後(薬剤処理しHBSSで洗浄した後)に細胞を剥がす操作(トリプシン処理)を行ってください。
トリプシン処理後は、培地を添加し反応を止めた後、遠心しHBSSで１回洗浄後、
さらに遠心しHBSSで細胞を懸濁して測定サンプルとしてください。
 

トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　 トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　

取扱条件

取扱条件
1.危険物第4類　第3石油類　危険等級Ⅲ, 2.火気厳禁 3.保存方法：冷凍
危険・有害
シンボルマーク 		トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　
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  • トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　

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    MT-1 MitoMP Detection Kit

  • トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　

    グルタチオン定量キット

    GSSG/GSH Quantification Kit

  • トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-　

    過酸化脂質検出蛍光試薬

    Liperfluo

過酸化脂質検出試薬 Spy-LHP　同仁化学研究所

发表于由

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過酸化脂質検出試薬 Spy-LHP　同仁化学研究所Spy-LHP

02 酸化ストレス関連試薬

Spy-LHP

過酸化脂質検出試薬 Spy-LHP　同仁化学研究所

  • 酸化ストレス関連試薬

過酸化脂質検出試薬

  • 製品コード
    S343　 Spy-LHP
  • CAS番号
    892396-71-3
  • 化学名
    2-(4-Diphenylphosphanylphenyl)-9-(1-hexylheptyl)anthra[2,1,9-def,6,5,10-d’e’f’]diisoquinoline-1,3,8,10-tetraone
  • 分子式・分子量
    C55H49N2O4P=832.96
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 mg ￥24,600 347-91251
  • 過酸化脂質検出試薬 Spy-LHP　同仁化学研究所
試験成績書

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技術情報

溶解例

1 mg/ 150 μL アセトン(25℃,飽和)、1 mg /1 mL クロロホルム

参考文献

参考文献を表示する

1) N. Soh, T. Ariyoshi, T. Fukaminato, K. Nakano, M. Irie, T. Imato, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2006, 16(11), 2943.
2)T. Chan, Y. Shimizu, P. Pospišil, N. Nijo, A. Fujiwara, Y. Taninaka, T. Ishikawa, H. Hori, D. Nanba, A. Imai, N. Morita, M. Yoshioka-Nishimura, Y. Izumi, Y. Yamamoto, H. Kobayashi, N. Mizusawa, H. Wada and Y. Yamamoto, "Quality control of photosystem II: lipid peroxidation accelerates photoinhibition under excessive illumination", PLoS One, 2012, 7(12), e52100.
3) Shinohara N, Tsuduki T, Ito J, Honma T, Kijima R, Sugawara S, Arai T, Yamasaki M, Ikezaki A, Yokoyama M, Nishiyama K, Nakagawa K, Miyazawa T, Ikeda I. , "Jacaric acid, a linolenic acid isomer with a conjugated triene system, has a strong antitumor effect in vitro and in vivo.", Biochim Biophys Acta. ., 2012, 1821, (7), 980.
4)H. Tsuru, H. Shibaguchi, M. Kuroki, Y. Yamashita and M. Kuroki, "Tumor growth inhibition by sonodynamic therapy using a novel sonosensitizer", Free Radic. Biol. Med., 2012, 53(3), 464.

よくある質問

Q

Spy-LHPの使用例を教えてください

A

チラコイド膜に埋め込まれているタンパク質複合体『PSⅡ（光科学系Ⅱ）』の過酸化脂質測定例を紹介致します。
この方法は次の文献を参考にしております。

真野純一, Sergey Khorobrykh, 尼子克己, "1.代謝産物量の定量 d.活性酸素種,抗酸化物", 低温科学, 2009, 67, 179.

1.用意するもの

(1)Spy-LHP測定溶液：1 mmol/L Spy-LHPになるようアセトンにて溶解し、さらにエタノールで2.7 mmol/Lになるよう希釈する。

※Spy-LHPは酸化されやすいため、溶解、希釈に用いるアセトンとエタノールはあらかじめ窒素バブリング等により溶存酸素量を減らしてご使用ください。またSpy-LHP溶液は用時調製にてご使用ください。※一測定あたり2.7 mL使用

(2)標準LOOH(検量線作成用)：25-250 nmol/L m-chloroperbenzoic acid

2.PSⅡ膜標品が50 μg Chl/mLの濃度となるように50 mmol/lLMES-NaOH(pH6.0), 35 mol/l NaClに懸濁する。

3.光照射し、継時的に0.3 mlをとり、Spy-LHP測定溶液2.7 mLと混合する（5 μg Chl/mL）。

4.暗所で30分静置後、遠心（18,000 ×g, 5 min）により膜画分を除き、上清を励起光524 nmで、535-537 nmの蛍光を測定する。

5.検量線および消光補正は次のように行う。

標準LOOH(各濃度)に、PSⅡ膜標品を加えたもの（＋PSⅡ）と加えないもの（－PSⅡ）を調製する。光照射せずに0.3 mLをSpy-LHP測定溶液2.7 mLと混合、静置、遠心し、上清を得る。

＋PSⅡ,－PSⅡ試料それぞれの標準LOOH濃度ゼロの蛍光強度をa1、 a2、それぞれの検量線の傾きをb1、b2とする。クエンチング係数はb1/b2であり、光照射後の試料の蛍光強度Xが得られたなら、それに対応するLOOH濃度は(X－a1)×b2/b1 となる。

また、光照射前に含まれるLOOH濃度は、(a1－a2)×b2/b1となる。

過酸化脂質検出試薬 Spy-LHP　同仁化学研究所 過酸化脂質検出試薬 Spy-LHP　同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品は、黒赤色結晶性粉末又は固体である。
純度(HPLC)： 90.0％ 以上
NMRスペクトル： 試験適合
取扱条件
1.保存方法：遮光, 2.窒素置換
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過酸化脂質検出試薬 Spy-LHP　同仁化学研究所

関連製品

日本同仁化学生化学用緩衝剤 POPSO　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

生化学用緩衝剤 POPSO　POPSO

13 生化学用緩衝剤

POPSO

生化学用緩衝剤 POPSO　

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB16　 POPSO
  • CAS番号
    68189-43-5
  • 化学名
    Piperazine-1,4-bis(2-hydroxy-3-propanesulfonic acid), dihydrate
  • 分子式・分子量
    C10H22N2O8S2･2H2O=398.45
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
25 g ￥6,000 344-04152
  • 生化学用緩衝剤 POPSO　
試験成績書

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  • ご購入方法
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技術情報

溶解例

19.92 g/50 ml [35 ml(2 mol/l-NaOH) + 水]

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は何ですか？

A

 -Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 POPSO　

Q

POPSOの調製方法を教えてください。

A

＜試薬＞
①0.1 mol/l POPSO 溶液
　POPSO 39.846 g とNaOH 4 g を純水300～400 mlに完全に溶解した後、
　純水で全容を1000 mlとする。
　*POPSOは水に難溶のためモノナトリウム塩溶液として調製する。

②0.1 mol/l NaOH溶液
　NaOH 4 gを純水200～300 mlに溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

＜pH調製＞
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 POPSO　

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

＊プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか？

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 POPSO　 生化学用緩衝剤 POPSO　

取扱条件

規格
性状： 本品は、白色結晶性粉末でアルカリに溶ける。
純度(滴定)： 99.0％ 以上
アルカリ溶状： 試験適合 0.035 以下(300 nm)
乾燥減量(110℃)： 8.0～10.0％
強熱残分(硫酸塩)： 0.10％ 以下
重金属(Pbとして)： 0.0005％ 以下
鉄(Fe)： 0.0005％ 以下
IRスペクトル： 試験適合
取扱条件
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生化学用緩衝剤 POPSO　

関連製品

日本同仁化学細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II – iCellux　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　Calcium Kit II – iCellux

04 細胞内蛍光プローブ

Calcium Kit II – iCellux

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内カルシウムイオン測定キット

  • 製品コード
    CS34　 Calcium Kit II – iCellux
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
10 plates ￥63,600 341-91651
キット内容
10 plates ・Calcium Probe
・Dimethylsulfoxide
・250 mmol/l Probenecid
・Quenching Buffer		 x10
2 ml x1
1.3 ml x1
100 ml x1

  • 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　
試験成績書

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  • ご購入方法
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マニュアル

  • 取扱説明書 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　 日本語
    細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　
  • プロトコル 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　 日本語
    細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　

技術情報

特長

1) 薬剤低濃度領域のシグナル応答が向上（小社Calcium Kit II – Fluo 4比較）
2) Ca2+プローブを添加した後の洗浄操作は不要
3) Fluo 3やFluo 4と同様の蛍光特性を有するプローブを使用
4) 96穴、384穴の両方のマイクロプレートに対応

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　  細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　

測定装置：FDSS7000 EX
細胞：CHO-K1
プレート：NUNC 384 wells plate (Non-coating)
刺激薬剤：ATP　Final：1 nM-10 μM
Probenecid：final 1.25 mM
Calcium Probe インキュベート時間：1hr

（データ提供：浜松ホトニクス株式会社）

よくある質問

Q

このキットにはCalcium Probeの溶解補助剤(Pluronic F-127やCremophor EL）が含まれておりませんが、 別に用意して添加した方がよいでしょうか？

A

既に最適化された溶解補助剤がQuenching Bufferに含まれておりますので、必要ありません。

Q

Calcium ProbeをDimethylsulfoxide(DMSO)に溶解した後は、保存可能ですか？

A

DMSOに溶解後は、冷凍で保存をした場合でも徐々に加水分解が進む為、保存は出来ません。
用時調整をお願い致します。

Q

はじめて測定します。Ca2+プローブの原理や測定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細胞内Ca2+測定をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
原理、Ca2+プローブの特徴、測定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細胞内Ca2+を測定する方へ －カスタマーサポート担当者の視点から－」

Q

蛍光顕微鏡でも観察は可能でしょうか？

A

 観察は可能です。
ただし、Quenching Bufferを使用する場合は、下方励起・下方蛍光測定が可能な蛍光顕微鏡でなければ観察できませんのでご注意ください。

細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　 細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　

取扱条件

取扱条件
1.危険物第4類　第3石油類　危険等級Ⅲ, 2.火気厳禁 3.保存方法：冷凍,遮光
危険・有害
シンボルマーク 		細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　
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細胞内カルシウムイオン測定キット Calcium Kit II - iCellux　

関連製品

グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit　同仁化学研究所

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit　同仁化学研究所Total Glutathione Quantification Kit

02 酸化ストレス関連試薬

Total Glutathione Quantification Kit

グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit　同仁化学研究所

  • 酸化ストレス関連試薬

グルタチオン定量キット

  • 製品コード
    T419　 Total Glutathione Quantification Kit
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
100 tests ￥33,200 348-90201
キット内容
100 tests ・Substrate（DTNB）　　　　
・Enzyme Solution　　 50 μl
・Coenzyme　　　　
・Buffer Solution　　　 50 ml
・Standard GSH　　　　　　　		 x2
x1
x2
x1
x1

  • グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit　同仁化学研究所
試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit　同仁化学研究所 日本語
    グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit　同仁化学研究所
  • 取扱説明書 グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit　同仁化学研究所 English
    グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit　同仁化学研究所

技術情報

特長

1) 高感度にtotal glutathioneを定量できる。
(検出範囲：6.25～100 μmol/L)
2) 一度に多検体の測定が可能である。

注意事項
キット開封後、各溶液の保存方法・保存期間は下記の通りである。
・Coenzyme working solution
純水で溶解後、-20℃にて保存。約2ヶ月使用できる。
・Substrate working solution
溶解後、-20℃にて保存。約2ヶ月使用できる。
・GSH standard solution
溶解後、-20℃にて保存。約2ヶ月使用できる。
・Enzyme working solution
希釈後、4℃にて保存。約2ヶ月使用できる。

参考文献

参考文献を表示する

    1) O. W. Griffith,"Determination of Glutathione and Glutathione Disulfide Using Glutathione Reductase and 2-Vinylpyridine", Anal. Biochem., 1980, 106, 207.
    2) M. E. Anderson, "Determination of Glutathione and Glutathione Disulfide in Biological Samples", Methods in Enzymol., 1985, 113, 548.
    3) M. A. Baker, G. J. Cerniglia and A. Zaman, "Microtiter Plate Assay for the Measurement of Glutathione and Glutathione Disulfide in Large Numbers of Biological Samples", Anal. Biochem., 1990, 190, 360.
    4) C. Vandeputte, I. Guizon, I. Genestie-Denis, B. Vannier and G. Lorenzon, "A Micrototer Plate Assay for Total Glutathione and Glutathione Disulfide Contents in Cultured/isolated Cells: Performance Study of a New Miniaturized Protocol", Cell Biol. Toxicol., 1994, 10, 415.
    5) S. A. McGrath-Morrow and J. Stahl,"Inhibition of Glutamine Synthetase in A549 Cells During Hyperoxia", Am. J. Respir. Cell Mol. Biol., 2002, 27, 99.
    6) T. Sato, K. Seyama, Y. Sato, H. Mori, S. Souma, T. Akiyoshi, Y. Kodama, T. Mori, S. Goto, K. Takahashi, Y. Fukuchi, N. Maruyama and A. Ishigami, "Senescence Marker Protein-30 Protects Mice Lungs from Oxidative Stress, Aging, and Smoking", Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2006, 174, 530.
    7) M. L. Mulhern, C. J. Madson, A. Danford, K. Ikesugi, P. F. Kador and T. Shinohara, "The Unfolded Protein Response in Lens Epithelial Cells from Galactosemic Rat Lenses", Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 2006, 47(9), 3951.

よくある質問

Q

5-スルホサリチル酸(SSA)は何のために使用するのでしょうか？ SSAの代わりに使用できる試薬はありませんか？

A

「除タンパク質」と「GSHの安定化」の目的で使用します。
また、除タンパク質剤として通常用いられる酸（トリクロロ酢酸、過塩素酸、メタリン酸など）
では、SSAとピクリン酸がGSHの酸化を防ぐ効果が高いといわれています。

弊社のプロトコールどおりにSSAを使用された際には、反応時のpHが適正に
なるように調整されておりますが、他の酸を用いた場合には
トリエタノールアミン等でpH7程度に中和するか、
酸濃度が1％程度以下になるように希釈してから測定して下さい。

pHが低すぎると定量に影響します。

Q

酸化ストレスの指標としてグルタチオン濃度・GSH/GSSG比はよく測定されますが、 グルタチオンの他に酸化ストレスマーカーとなるものはありますか？

A

酸化ストレスマーカーについてまとめた資料を作成しております。

カスタマーサポートの視点から、各酸化ストレスマーカーの特徴・測定サンプルの前処理方法などを記載しておりますので、ご参照ください。

下記URLよりダウンロード可能です。

「はじめての酸化ストレスマーカー測定プロトコル～カスタマーサポートの視点から～」

Q

サンプル中のglutathione量が多いのですが、 サンプルを薄める時はどのようにすればよいのでしょうか？

A

水または0.5％スルホサリチル酸（SSA)で希釈してください。

5％SSAでも調製可能ですが、測定時にはSSA濃度を1％以下にする必要があります。

SSA濃度が高いと反応時のpHが低くなり、吸光度に影響することが懸念されます。

Q

サンプル中のglutathione量が多いのですが、 サンプルを薄める時はどのようにすればよいのでしょうか？

A

 水または0.5％スルホサリチル酸（SSA)で希釈してください。

5％SSAでも調製可能ですが、測定時にはSSA濃度を1％以下にする必要があります。

SSA濃度が高いと反応時のpHが低くなり、吸光度に影響することが懸念されます。

Q

グルタチオンのSH基に選択的に反応するのでしょうか？ 測定上、妨害物質となるものはありますか？

A

グルタチオンだけでなく、他のSH基を持つ化合物とも反応します。

また、必ずしもSH基選択的ではありません。その理由はキットに使用しているSH基との反応試薬(DTNB)が、
亜硫酸イオンやジスルフィドイオンとも同様の反応をするためです。また、シアンイオンなども妨害します。

妨害物質としては、アスコルビン酸,β-メルカプトエタノール,ジチオスレイトール[DTT]
のような還元性物質やシステイン、また、SH基と反応するような
化合物(マレイミドなど)は測定に影響を与えます。

その他として、アセトンなどの有機溶媒が共存すると吸光度が著しく変化します。
反応時のpHが低く(酸性)になることでも定量に影響を与えますのでご注意ください。

グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit　同仁化学研究所 グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit　同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
1.保存方法：冷蔵
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グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit　同仁化学研究所

関連製品

日本同仁化学細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2　Fura 2

04 細胞内蛍光プローブ

Fura 2

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2　

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内カルシウムイオン測定試薬

  • 製品コード
    F014　 Fura 2
  • CAS番号
    96314-98-6
  • 化学名
    1-[6-Amino-2-(5-carboxy-2-oxazolyl)-5-benzofuranyloxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, pentapotassium salt
  • 分子式・分子量
    C29H22K5N3O14=831.99
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 mg ￥29,200 347-05421

【注意】
本品は、通常、チューブ底面にフィルム状に付着した状態となっております。
稀に、輸送中の振動等により本品がチューブ底面から外れ、チューブ壁面やキャップ裏に付着している場合がございます。
内容物を下に落としてから開封をしてご使用ください。
ご不明な点がございましたら、小社カスタマーリレーション部までお問合せください。（Free Dial：0120-489-548）

  • 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2　
試験成績書

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  • ご購入方法
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マニュアル

  • プロトコル 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2　 蛍光で細胞内 Ca を測定したい
    細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2　

技術情報

溶解例

1 mg/0.25 mL（水）

参考文献

参考文献を表示する

1) G. Grynkiewicz, M. Poenie and R. Y. Tsien, "A New Generation of Ca2+ Indicators with Greatly Improved Fluorescence Properties", J. Biol. Chem., 1985, 260, 3440.
2) D. A. Williams, K. E. Fogarty, R. Y. Tsien and F. S. Fay, "Calcium Gradients in Single Smooth Muscle Cells Revealed by the Digital Imaging Microscope Using Fura-2", Nature, 1985, 318, 558.
3) R. Y. Tsien, T. J. Rink and M. Poenie, "Measurement of Cytosolic Free Ca2+ in Individual Small Cells Using Fluorescence Microscopy with Dual Excitation Wavelengths", Cell Calcium, 1985, 6, 145.
4) D. A. Williams and F. S. Fay, "Intracellular Calibration of the Fluorescent Calcium Indicator Fura-2", Cell Calcium, 1990, 11, 75.
5) W. Almers and E. Neher, "The Ca Signal from Fura-2 Loaded Mast Cells Depends Strongly on the Method of Dye-loading", FEBS Lett., 1985, 192, 13.
6) G. H. R. Rao, J. D. Peller and J. G. White, "Measurement of Ionized Calcium in Blood Platelets with a New Generation Calcium Indicator", Biochem. Biophys. Res. Commun., 1985, 132, 652.
7) H. Ozaki, K. Sato, T. Satoh and H. Karaki, "Simultaneous Recordings of Calcium Signals and Mechanical Activity Using Fluorescent Dye Fura 2 in Isolated Strips of Vascular Smooth Muscle", Jpn. J. Pharmacol., 1987, 45, 429.
8) M. Mitsui, A. Abe, M. Tajimi and H. Karaki, "Leakage of the Fluorescent Ca2+ Indicator Fura-2 in Smooth Muscle", Jpn. J. Pharmacol., 1993, 61, 165.
9) 宮川厚夫, 牧野徹, 玉川彰, 尾崎一穂, "ビデオ画像処理を用いた蛍光性カルシウム指示薬Fura-2による細胞内遊離カルシウムイオン濃度分布の測定", 分析化学, 1989, 38, 643.
10) P. L. Becker, F. S. Fay,"Photobleaching of fura-2 and its effect on determination of calcium concentrations", American Journal of Physiology, 1987, 253, 613.

よくある質問

Q

細胞内カルシウム測定試薬は何種類かありますが、どのように選べばよいのでしょうか？

A

測定機器や測定波長などで選ばれることが多いようです。

製品名の後ろに[-AM]が付いているものは細胞膜透過型になります。
それぞれの試薬の特性は

【Fura 2】
・2励起1蛍光
　　励起(λex= Ca:340 nm, Ca free:380 nm)、蛍光：λem=500 nm
・解離定数：224 nmol/L
・蛍光強度比での測定が出来るので、誤差要因の補正を行なうことが出来る。
=>細胞内Ca濃度の計算が行ない易い。
・最も多く使用されている。
・励起フィルターを切替えなくてはいけないので、切替え間のタイムロスがある。
　（機器の性能にもよる）

【Fluo 3】
・1励起1蛍光
　　励起：λex=508 nm、蛍光：λem=527 nm
・解離定数：400 nmol/L
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
　（NADH,NADPHの影響が出ない）
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。
・スライス標本には適さない
　（Fluo3がスライス表面の死んだ細胞に結合するのか、細胞外のカルシウム濃度を測定する）

【Fluo 4】
・1励起1蛍光
　　励起：λex=495 nm、蛍光：λem=518 nm
・解離定数：360 nmol/L
・Fluo3よりも蛍光強度が強い。
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
　（NADH,NADPHの影響が出ない）
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。
・Fluo3よりも細胞毒性がでやすい。

【Indo 1】
・1励起2蛍光
　　励起：λex= 330 nm、蛍光(λem= Ca:410 nm, Ca free:485 nm)
・解離定数：250 nmol/L
・励起波長の切替えの必要がないので、非常に早い速度のCa濃度変化や心筋細胞の
　ような動きの試料も測定できる（但し、検出器は2台必要）

【Rhod 2】
・1励起1蛍光
　　励起：λex=553 nm、蛍光：λem=576 nm
・解離定数：1.0 μmol/L
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
　（NADH,NADPHの影響が出ない）
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。

【Quin 2】
・1励起1蛍光
　　励起：λex=339 nm、蛍光：λem=492 nm
・解離定数：110 nmol/L
・一番最初に開発されたプローブ

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2　 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2　

取扱条件

規格
性状： 本品は、黄色～橙黄色粉末又は固体で水に溶ける。
純度(HPLC)： 98.0％ 以上
蛍光スペクトル： 試験適合
NMRスペクトル： 試験適合
取扱条件
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細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2　

関連製品

日本同仁化学生化学用緩衝剤 TAPS　

发表于由

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生化学用緩衝剤 TAPS　TAPS

13 生化学用緩衝剤

TAPS

生化学用緩衝剤 TAPS　

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB17　 TAPS
  • CAS番号
    29915-38-6
  • 化学名
    N-Tris(hydroxymethyl)methyl-3-aminopropanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C7H17NO6S=243.28
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
25 g ￥4,000 344-02572
100 g ￥11,200 340-02574
  • 生化学用緩衝剤 TAPS　
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技術情報

溶解例

12.16 g/50 ml（水）

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は何ですか？

A

-Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 TAPS　

Q

TAPSの調製方法を教えてください。

A

＜試薬＞
①0.1 mol/l TAPS 溶液
　TAPS 24.328 gを純水300～400 mlに完全に溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

②0.1 mol/l NaOH溶液
　NaOH 4 gを純水200～300 mlに溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

＜pH調製＞
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 TAPS　

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

＊プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか？

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 TAPS　 生化学用緩衝剤 TAPS　

取扱条件

規格
性状： 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定)： 99.0％ 以上
水溶状： 試験適合 0.025 以下(300 nm)
乾燥減量(110℃)： 0.40％ 以下
強熱残分(硫酸塩)： 0.10％ 以下
重金属(Pbとして)： 0.0005％ 以下
鉄(Fe)： 0.0005％ 以下
IRスペクトル： 試験適合
取扱条件
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生化学用緩衝剤 TAPS　

関連製品

NO検出関連試薬 NOC 7　同仁化学研究所

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

NO検出関連試薬 NOC 7　同仁化学研究所NOC 7

02 酸化ストレス関連試薬

NOC 7

NO検出関連試薬 NOC 7　同仁化学研究所

  • 酸化ストレス関連試薬

NO検出関連試薬

  • 製品コード
    N377　 NOC 7
  • CAS番号
    146724-84-7
  • 化学名
    1-Hydroxy-2-oxo-3-(N-methyl-3-aminopropyl)-3-methyl-1-triazene
  • 分子式・分子量
    C5H14N4O2=162.19
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
10 mg ￥12,600 344-06891
50 mg ￥45,800 340-06893
  • NO検出関連試薬 NOC 7　同仁化学研究所
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マニュアル

  • プロトコル NO検出関連試薬 NOC 7　同仁化学研究所 NO を系の中に加えたい
    NO検出関連試薬 NOC 7　同仁化学研究所

技術情報

注意事項

・本製品を粉末の状態で取り出し使用する場合、性状の性質上、静電気等の要因で容器内に付着し、取り出しにくい場合があります。
・容器内に付着し、取り出せなかった粉末に関しては、使用する溶媒を容器に入れ、溶かし出して使用してください。

参考文献

参考文献を表示する

1)J. A. Hrabie, J. R. Klose, D. A. Wink and L. K. Keefer, "New Nitric Oxide-releasing Zwitterions Derived from Polyamines.", J. Org. Chem., 1993, 58, 1472.
2) K. Hayashi, N. Noguchi and E. Niki, "Action of Nitric Oxide as a Antioxidant Against Oxidation of Soybean Phosphatidylcholine Liposomal Membrane", FEBS Lett., 1995,370, 37.(Noc 12)
3) S. Shibuta, T. Mashimo, A. Ohara, P. Zhang and I. Yoshiya, "Intracerebroventricular Administration of a Nitric Oxide-releasing Compound, NOC-18, Produces Thermal Hyperalgesia in Rats", Neurosci. Lett., 1995, 187, 103. (NOC18)
4) N. Yamanaka, O. Oda and S. Nagao, "Nitric Oxide Released from Zwitterionic Polyamine/NO Adducts Inhibits Cu2+-induced Low Density Lipoprotein Oxidation", FEBS Lett., 1996, 398 , 53.
5) D. Berendji, V. K-Bachofen, K. L. Meyer, O. Grapenthin, H. Weber, V. Wahn and K.-D Kroncke, "Nitric Oxide Mediates Intracytoplasmic and Intranuclear Zinc Release", FEBS Lett., 1997, 405, 37.
6) T. Ohnishi, T. Ishizaki, F. Sasaki, S. Ameshima, T. Nakai, S. Miyabo and S. Matsukawa, "The Effect of Cu2+ on Rat Pulmonary Arterial Rings", Eur. J. Pharmacol., 1997, 319, 49. (Noc 7)
7) Y. Adachi, K. Hashimoto, N. Ono, M. Yoshida, M. Suzuki-Kusaba, H. Hisa and S. Satoh, "Renal Effect of a Nitric Oxide Donor, NOC 7, in Anethetized Rabbits", Eur. J. Pharmacol., 1997, 324, 223. (Noc 7)
8) Y. Minamiyama, S. Takemura and M. Inoue, "Effect of Thiol Status on Nitric Oxide Metabolism in the Circulation", Arch. Biochem. Biophys., 1997, 341(1), 186.

よくある質問

Q

NOCとNORは両方ともNO発生剤として使用されますが、どう違うのですか？

A

構造的には全く異なるタイプのNOドナーです。
性能の違いとしては

【NOC】
高水溶性
水溶液での調製が容易（NaOH溶液）
NOCは高pH（アルカリ性）ほどNO放出が遅くなる。

半減期は(37℃、pH7.4)
NOC7(5min) > NOC5(25min) > NOC12(100min) > NOC18(21hrs)

【NOR】
比較的水溶性が低い
有機溶媒(DMSO)溶液の方が安定に扱える。
経口投与が可能である。
NORは低pH（酸性）ほどNO放出が遅くなる。

半減期は(37℃、pH7.4)
NOR1(1.8min) > NOR3(30min) > NOR4(60min) > NOR5(20hrs)

Q

NOC類を使用する際は、何に溶解して使用すればよいのでしょうか？

A

溶解するNOCよりも高濃度の水酸化ナトリウム水溶液などの強アルカリ水溶液に溶解してストック溶液としてください。（0.1M-NaOH等をご使用ください）

NO発生は事実上中性バッファー（サンプル溶液）に添加された時点から開始されます。
生理食塩水などの緩衝作用のないものでは、NOはきれいに放出しませんのでご注意ください。

＊用時調整してください。

Q

NOC7の溶解性を教えてください。

A

NOCs、NORsの溶解性は以下の通りです。

NO検出関連試薬 NOC 7　同仁化学研究所

＊注意＊
NOCsは水にも溶けますが、ストック液の調整は「アルカリ性溶液」で行ってください。
アルカリ性溶液では安定ですが、中性では分解してNOの放出します。
pHが下がるに従い分解(NO放出)は早くなります。

NO検出関連試薬 NOC 7　同仁化学研究所 NO検出関連試薬 NOC 7　同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品は、白色粉末でアルカリに溶ける。
純度(HPLC)： 90.0％ 以上
取扱条件
1.保存方法：冷凍,遮光
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NO検出関連試薬 NOC 7　同仁化学研究所

関連製品

日本同仁化学細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM　Fura 2-AM

04 細胞内蛍光プローブ

Fura 2-AM

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM　

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内カルシウムイオン測定試薬

  • 製品コード
    F015　 Fura 2-AM
  • CAS番号
    108964-32-5
  • 化学名
    1-[6-Amino-2-(5-carboxy-2-oxazolyl)-5-benzofuranyloxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, pentaacetoxymethyl ester
  • 分子式・分子量
    C44H47N3O24=1001.85
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 mg ￥33,800 341-08621
  • 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM　
試験成績書

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マニュアル

  • プロトコル 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM　
    細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM　

参考文献

参考文献を表示する

1) G. Grynkiewicz, M. Poenie and R. Y. Tsien, "A New Generation of Ca2+ Indicators with Greatly Improved Fluorescence Properties", J. Biol. Chem., 1985, 260, 3440.
2) D. A. Williams, K. E. Fogarty, R. Y. Tsien and F. S. Fay, "Calcium Gradients in Single Smooth Muscle Cells Revealed by the Digital Imaging Microscope Using Fura-2", Nature, 1985, 318, 558.
3) R. Y. Tsien, T. J. Rink and M. Poenie, "Measurement of Cytosolic Free Ca2+ in Individual Small Cells Using Fluorescence Microscopy with Dual Excitation Wavelengths", Cell Calcium, 1985, 6, 145.
4) D. A. Williams and F. S. Fay, "Intracellular Calibration of the Fluorescent Calcium Indicator Fura-2", Cell Calcium, 1990, 11, 75.
5) W. Almers and E. Neher, "The Ca Signal from Fura-2 Loaded Mast Cells Depends Strongly on the Method of Dye-loading", FEBS Lett., 1985, 192, 13.
6) G. H. R. Rao, J. D. Peller and J. G. White, "Measurement of Ionized Calcium in Blood Platelets with a New Generation Calcium Indicator", Biochem. Biophys. Res. Commun., 1985, 132, 652.
7) H. Ozaki, K. Sato, T. Satoh and H. Karaki, "Simultaneous Recordings of Calcium Signals and Mechanical Activity Using Fluorescent Dye Fura 2 in Isolated Strips of Vascular Smooth Muscle", Jpn. J. Pharmacol., 1987, 45, 429.
8) M. Mitsui, A. Abe, M. Tajimi and H. Karaki, "Leakage of the Fluorescent Ca2+ Indicator Fura-2 in Smooth Muscle", Jpn. J. Pharmacol., 1993, 61, 165.
9) 宮川厚夫, 牧野徹, 玉川彰, 尾崎一穂, "ビデオ画像処理を用いた蛍光性カルシウム指示薬Fura-2による細胞内遊離カルシウムイオン濃度分布の測定", 分析化学, 1989, 38, 643.

よくある質問

Q

細胞内カルシウム測定試薬は何種類かありますが、どのように選べばよいのでしょうか？

A

測定機器や測定波長などで選ばれることが多いようです。
製品名の後ろに[-AM]が付いているものは細胞膜透過型になります。
それぞれの試薬の特性は

【Fura 2】
・2励起1蛍光
　　励起(λex= Ca:340 nm, Ca free:380 nm)、蛍光：λem=500 nm
・解離定数：224 nmol/L
・蛍光強度比での測定が出来るので、誤差要因の補正を行なうことが出来る。
=>細胞内Ca濃度の計算が行ない易い。
・最も多く使用されている。
・励起フィルターを切替えなくてはいけないので、切替え間のタイムロスがある。
　（機器の性能にもよる）

【Fluo 3】
・1励起1蛍光
　　励起：λex=508 nm、蛍光：λem=527 nm
・解離定数：400 nmol/L
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
　（NADH,NADPHの影響が出ない）
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。
・スライス標本には適さない
　（Fluo3がスライス表面の死んだ細胞に結合するのか、細胞外のカルシウム濃度を測定する）

【Fluo 4】
・1励起1蛍光
　　励起：λex=495 nm、蛍光：λem=518 nm
・解離定数：360 nmol/L
・Fluo3よりも蛍光強度が強い。
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
　（NADH,NADPHの影響が出ない）
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。
・Fluo3よりも細胞毒性がでやすい。

【Indo 1】
・1励起2蛍光
　　励起：λex= 330 nm、蛍光(λem= Ca:410 nm, Ca free:485 nm)
・解離定数：250 nmol/L
・励起波長の切替えの必要がないので、非常に早い速度のCa濃度変化や心筋細胞の
　ような動きの試料も測定できる（但し、検出器は2台必要）

【Rhod 2】
・1励起1蛍光
　　励起：λex=553 nm、蛍光：λem=576 nm
・解離定数：1.0 μmol/L
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
　（NADH,NADPHの影響が出ない）
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。

【Quin 2】
・1励起1蛍光
　　励起：λex=339 nm、蛍光：λem=492 nm
・解離定数：110 nmol/L
・一番最初に開発されたプローブ

Q

はじめて測定します。Ca2+プローブの原理や測定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細胞内Ca2+測定をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
原理、Ca2+プローブの特徴、測定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細胞内Ca2+を測定する方へ　－カスタマーサポート担当者の視点から－」

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM　 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM　

取扱条件

規格
性状： 本品は、黄色～橙黄色結晶性粉末または固体でジメチルスルホキシドに溶ける。
純度(HPLC)： 98.0％ 以上
蛍光スペクトル： 試験適合
NMRスペクトル： 試験適合
取扱条件
1.保存方法：冷凍,遮光
SDSダウンロード
細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM　

関連製品

日本同仁化学生化学用緩衝剤 TES　

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

生化学用緩衝剤 TES　TES

13 生化学用緩衝剤

TES

生化学用緩衝剤 TES　

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB18　 TES
  • CAS番号
    7365-44-8
  • 化学名
    N-Tris(hydroxymethyl)methyl-2-aminoethanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C6H15NO6S=229.25
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
25 g ￥6,200 346-02652
100 g ￥15,200 344-02653
500 g ￥63,200 340-02655
  • 生化学用緩衝剤 TES　
試験成績書

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  • ご購入方法
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技術情報

溶解例

11.46 g/50 ml（水）

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は何ですか？

A

-Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 TES　

Q

TESの調製方法を教えてください。

A

＜試薬＞
①0.1 mol/l TES溶液
　TES 22.925 gを純水300～400 mlに完全に溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

②0.1 mol/l NaOH溶液
　NaOH 4gを純水200～300 mlに溶解した後、
　純水で全容1000 mlとする。

＜pH調製＞
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 TES　

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

＊プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか？

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 TES　 生化学用緩衝剤 TES　

取扱条件

規格
性状： 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定)： 99.0％ 以上
水溶状： 試験適合 0.020 以下(300 nm)
乾燥減量(110℃)： 0.40％ 以下
強熱残分(硫酸塩)： 0.10％ 以下
重金属(Pbとして)： 0.0005％ 以下
鉄(Fe)： 0.0005％ 以下
IRスペクトル： 試験適合
取扱条件
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