原生质体是脱去细胞壁的细胞，它可通过细胞融合形成新植物品种或再生植物体。

PDC氧化

●　PDC氧化在中性条件下进行

●　用于容易被酸破坏的底物反应

反应例子^【d】

PDC氧化

标准中型丙烯酸干燥箱C-4型

　　本产品是可用于存放小物件的中型亚克力干燥箱，可在单位间隔28mm的主柱上自由调节层板位置。柜门带锁，可放心使用。

◆参数

◆主要参数

※在湿度环境急剧变化或受到撞击的情况下，湿度计会产生极大的误差。因此，湿度计读数仅供参考。

◆材质

◆同系列产品

◆产品特点

●  根据保存物品的大小，可自由调节层板位置，单位调节间距为28mm，适用于长期保存大量的小物件。

●  柜门带锁，防止误开柜门，在制作过程中也可放心使用。

miRNA研究专题

　　Wako提供miRNA从分离、克隆到靶基因功能研究的一系列试剂盒。

　　列表中的产品仅仅用于实验室研究，不能作为药物、食物或人的使用。

◆简便高效的microRNA分离试剂盒——microRNA Isolation Kit

  产品编号：291-70201

　　microRNA Isolation Kit可同时分离出miRNA和及其靶基因mRNA，操作简单。分离得到的Ago IP RNA fraction，可用于miRNA和靶基因mRNA的克隆、定量和表达谱分析。

◆高效的miRNA克隆——microRNA Cloning Kit Wako

   产品编号：290-66501

●　高效率克隆microRNA

●　可克隆具有二级结构的microRNA

●　重复性好。

◆miRNA靶基因mRNA的克隆—— Target mRNA Cloning Kit Wako

  产品编号：298-68001

　　miRbase中miRNA的数目已经达到10883，但是miRNA已知的靶序列mRNA却很少， 而miRNA的靶序列研究也是其功能研究一个重要部分，由于miRNA与其靶mRNA存在不完全配对，对计算机预测造成困难。

　　miRNA、靶mRNA和Ago蛋白会以复合物RISC形式存在，本试剂盒通过从细胞中分离得到的RISC复合物中，直接有效的克隆特定miRNA的靶序列mRNA，可作为miRNA靶序列的新发现与筛选的有力工具。

特点

●　用于扩增微量 mRNA

●　可直接从Ago IP RNA片段中克隆mRNA，用于microRNA 靶基因的研究

靶序列mRNA的cDNA克隆实验路线图：

◆PCR反应的纯化试剂盒——PCR  Purification Kit Wako

  产品编号：298-67901

　　不需要使用凝胶试剂盒回收纯化，可通过PCR  Purification Kit Wako直接去除PCR扩增后DNA反应液中含有的引物、引物二聚体、dNTP、酶类如DNA聚合酶和限制内切酶等物质，操作简单，纯化后DNA溶液可用于限制酶处理、Southern杂交、标记，克隆，测序，体外转录等实验。

miRNA试剂盒（Wako）的应用：（miR-122 targeted mRNA的研究）

实验总路线图：

①　扩增到cDNA电泳检测

　　结果显示：可以从Ago IP RNA片段中成功的扩增到cDNA.

②　扩增后的cDNA的克隆

　　miR-122的潜在靶序列的cDNA克隆 ，然后通过在线软件如TargetScan 4.2对获得序列是否是靶序列进行评分。

　　※ 1. CSP：Context Score Percentile

　　靶序列mRNA的合理参数值

　　※ 2.对照细胞

　　转染了GL3（荧光素酶）siRNA的HepG2细胞

③　靶序列 mRNA 的鉴定（ qRT-PCR）

　　mRNA的定量（CSP※1 of Clone ≧ 80）

　　其中ALDOA mRNA已经证实是miR-122的靶基因，此外，通过此方法发现了很多新的miR-122潜在的靶序列。

参考文献：

Hayashida, Y., et al . A useful approach to total analysis of RISC-associated RNA., BMC Research Notes , 2, 169（2009）

细胞培养用培养基添加物

细胞増殖因子

　　细胞增殖的相关物质。参与各种各样的细胞生物学、生理学过程的调节，通过与靶细胞表面受容体蛋白质的特异性结合，参与细胞间的信号传递。产品取自牛、人，植物重组体、大洋洲产地原料。

◆白蛋白

　　白蛋白是可用于酵素和成长因子等的生物学性敏感型高分子稀释·稳定剂，或可添加到脂质培养基中难溶于水的成分。

◆胰岛素

　　胰岛素是对生物体内的血糖调节、促进蛋白质合成有着重要作用的激素。可作为细胞培养中的增殖因子，促进蛋白质的合成。

◆转铁蛋白（Transferrin）

　　转铁蛋白主要负责运转培养基中所含的铁离子。

 相关产品

◆细胞培养用产品 
 
　　我司为您充分准备了液体培养基如平衡盐溶液、细胞剥离·分散用溶液、抗生物质溶液、细胞外基质等产品。

◆神经干细胞用添加剂

　　作为血清替代品用于神经干细胞的培养。我司现有两款产品，一是用Transferrin（Apo）调制而成的，一是用Transferrin（Holo）调制而成的。一般产品都含Transferrin（Holo），但是使用含有Transferrin（Apo）的N2 Supplement的话，根据细胞类型的不同神经干细胞的增殖能力可不同层次的增加。

ISOPLANT II

DNA快速提取试剂(植物/酵母/細菌)

　　ISOPLANT II是可以迅速地从植物・酵母・细菌提取DNA的试剂盒。与旧产品ISOPLANT一样，利用Solution II的主要成分氯化苄，对细胞壁进行破坏，在表面活性剂的作用下，使其溶解。植物组织的多糖及多酚比植物组织多，提取时常混入DNA中。这些物质抑制限制性内切酶反应及PCR，难以对DNA进行定量测定。改良后的新产品ISOPLANT II，可有效去除多糖及多酚等抑制物质。不仅可以从草本植物提取，还可以从难度较大的木本植物提取，提取到的DNA可用于PCR及限制性内切酶反应。

◆特点

　　•　迅速地从植物・酵母・细菌提取基因组DNA

　　•　无需使用臼等工具捣碎材料，便于处理多个样品

　　•　经改良，可有效去除抑制物质（多糖及多酚）

◆产品列表

保存方法

　　冷蔵保存（2～10°C）

　　若长时间不使用RNase A ，请冷冻保存（-20°C）。除了RNase A ，其他产品可以室温保存。

◆使用实例

操作流程

植物	酵母、细菌

实验数据

1. 使用从植物叶子提取的DNA进行RAPD分析

2. 使用从植物叶子提取的DNA进行制限性内切酶反应

3. 从细菌、酶提取得DNA进行制限性内切酶反应

4. ISOPLANT II与旧产品（ISOPLANT）的纯度比较

Data 1: 使用从植物叶子提取的DNA进行RAPD分析

　　分别使用各样品0.1g冻结粉碎的叶子的1/100提取到的DNA，进行RAPD分析。

结果

	lane 1. 西瓜 lane 2. 黄瓜 lane 3. 南瓜 lane 4. 玉米 lane 5. 水稻 lane 6. 葱 lane 7. 豆子 lane 8. 烟草	lane 9. 菠菜 lane 10. 银杏 lane 11. 苹果 lane 12. 牡蛎 lane 13. 桃 lane 14. 柚子 lane 15. 梅干 lane 16. 梨
	M : Marker 4 (φX174/Hae III)

　Arbitrary Primer: AP-A-2(TGGATTGGTC)

　Taq DNA polymerase: Gene Taq

　3% Agarose 21

Data 2: 使用从植物叶子提取的DNA进行制限性内切酶反应

　　分别使用各样品0.1g冻结粉碎的叶子的1/20提取到的DNA，进行制限性内切酶反应(5～20 units)。

	lane 1. 烟草 lane 2. 菠菜 lane 3. 胡萝卜 lane 4. 梨 lane 5. 水稻 lane 6. 茶 lane 7. 柚子 lane 8. 苹果
	M : Marker 2 (λ/Hind III・EcoR I) a : intact DNA b : Hind III digest + RNase A

　　　　　　　0.8% Agarose S 

　　•注意事项　提取DNA时进行NaBH4处理，获得上述数据。

Data 3: 从细菌、酵母提取的DNA进行制限性内切酶反应

　　分别取1/20从1.5ml培养液体提取到的DNA，进行制限性内切酶反应(5～20 units)。

	lane 1. 粘质沙雷氏菌　Serratia marcescens lane 2. 牛莫拉氏杆菌　Moraxella bovis lane 3. 流感嗜血杆菌C 　Haemophilus influenzae c lane 4. 普通变形杆菌　Proteus vulgaris lane 5. 裂殖酵母　Shizosaccharomyces pombe lane 6. 毕赤酵母　Pichia pastoris lane 7. 酿酒酵母　Sacaomyces cerevisiae
	M : Marker 2 (λ/Hind III・EcoR I) a : intact DNA b : Hind III digest + RNase A

　　　　　　　0.8% Agarose S 

Data 4: ISOPLANT II与旧产品（ISOPLANT）的纯度比较

　　使用相同的样本量，分别用ISOPLANT II及旧产品（ISOPLANT）从菠菜及苹果叶子提取DNA，检测吸光度（200～300 nm）

菠菜	苹果

　　使用ISOPLANT II提取DNA，在260nm有峰值。表明DNA不含多糖及多酚等夹杂物，纯度较高。

◆备注

　　本产品为实验研究用试剂，不可用于医疗或其他用途。

　　不了解试剂基本知识的人士请不要使用。

◆相关产品

　　•　 从植物・酵母・细菌提取DNA试剂盒　ISOPLANT

[ 1 ]　Xing S. and Aharon G.: Analytical Biochemistry, 174, 650-657 (1988)

[ 2 ]　C. S. Kim, C. H. Lee, J. S. Shin, Y. S. Chung and N. I. Hyung: Nucleic Acids Res., 25 (5) 1085-1086 (1997)

PFA-消化容器

　　PFA高强度的消化容器：金属溶出极少，耐高压，耐强酸，可以直接在加热板上加热，口径大，加快"赶酸"效率。该产品还可用于高纯酸的存储、运输。

◆产品参数

◆产品列表

四环素类抗生物质

◆盐酸四环素（Tetracycline   Hydrochloride）

CAS No. 64-75-5 C22H24N2O8・HCl=480.90 滴定度:900μg/mg 以上 可溶性溶剂:水 用途（作用）:四环素类抗生物质。和细菌的30s核糖体结合，抑制氨基酰-tRNA在核糖体A部位的结合。抗菌谱宽，对病原体、衣原体感染都有杀菌作用。

◆盐酸米诺环素（Minocycline   Hydrochloride）

CAS No. 13614-98-7 C23H27N3O7・HCl=493.94 滴定度:890 ～ 950μg/mg（脱水物换算） 可溶性溶剂:水 用途（作用）:四环素类抗生物质。和细菌的30s核糖体结合，抑制氨基酰-tRNA在核糖体A部位的结合。抗菌谱宽，对病原体、衣原体感染都有杀菌作用。

相关资料详情请查看：http:///pdf/show/80.html

Tim-4 (mouse):Fc (human) (rec.) (Biotin)

Tim-4（小鼠）：Fc（人）（重组）（生物素标记）

◆产品详情

别名：TIM4，TIMD4

          T Cell Immunoglobulin and Mucin Domain-containing Protein 4；

          T细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域蛋白4

产品类型：蛋白质

特性

来源/宿主： CHO细胞

序列：小鼠TIM-4（aa 22-279）的胞外域融合到人IgG1的Fc区的N端

交叉反应性：人，小鼠

应用

功能：

        -抑制受刺激的T细胞增殖

        -用于分离细胞外囊泡

标记：生物素标记

特异性：TIM-4可以用于分离表面含有磷脂酰丝氨酸（PS）的不同物种（人，小鼠，大鼠等）的细胞外囊泡。

生物活性：测量其对经抗CD3诱导刺激人T细胞增殖能力的抑制作用。Tim-4 (mouse):Fc (human)(rec.) 

                 (Biotin)结合磁珠可用于细胞外囊泡的分离。在钙离子依存的情况下，120ng蛋白足够分离

                 1010的细胞外囊泡颗粒。

分子量：~95kDa (SDS-PAGE)

纯度：≥95% (SDS-PAGE)

内毒素：<0.05EU/μg 蛋白 (LAL test; Lonza)

浓度：复溶后0.1mg/mL

复溶：100 µL灭菌水复溶

规格：溶于PBS中，经0.2μm过滤后冻干

其他产品数据：NCBI reference NP_848874.3: Tim-4 (mouse)

运输和保存

运输：冰块

短期储存：+4℃

长期储存：-20°C

保存建议：避免反复冻融。

使用/稳定性：收到产品后可在-20°C稳定保存6-12个月。

                      产品分装后可在-20°C稳定保存3个月。

◆产品描述

　　细胞外囊泡（EVs）由多种细胞释放到细胞微环境中，可以自发的运输或携带多种生物活性分子，如非编码RNA、miRNA、基因组DNA、脂质、生长因子和信号分子。EVs可分为外泌体（30～100nm）、微囊泡（100-1000 nm）和凋亡小体（＞1000 nm）。EVs不仅在正常生理过程的调节中起着重要作用，而且在疾病发病机制中起着重要作用，它的内含物能够反映分泌细胞的生理状态。目前正在研究和开发利用EVs进行治疗和诊断的方法。因此，开发理想的EVs分离和定量方法已经成为了一个活跃的研究领域。细胞外囊泡在其外部脂质双分子层上表达磷脂酰丝氨酸（PS）。

　　Tim-4 (T cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein 4)是一种单链I型膜蛋白，属于免疫球蛋白超家族和TIM家族。Tim-4含有一个Ig样V型（免疫球蛋白样）结构域。它在树突细胞和巨噬细胞上表达。Tim-4在T辅助细胞2（Th2）的增殖中起重要作用。Tim-4以钙离子依赖的形式与凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸（PS）结合，并且介导凋亡细胞的吞噬。

　　EV膜富含磷脂酰丝氨酸（PS），Tim-4可以结合EVs表面上的PS。华山力成教授团队开发了一种新型的亲和方法，通过将生物素亲和的Tim-4结合到链霉素磁珠上，在钙离子存在的情况下，进行EVs的分离。该方法可以用于替代目前最常用的超速离心法来进行EVs的纯化。这种全新的Tim-4亲和法与其他方法相比（如超离法、PEG沉淀法、抗体免疫沉淀法），可以获得更好的产率、纯度，以及分离多种群EVs。

◆相关产品

　　本品是含有有机色素指示剂的蓝色硅胶，比含氯化钴的传统型硅胶更安全。吸湿时，本品颜色会从原有的蓝色慢慢变为红色。

定量NMR用标准液DSS-d6

　　定量NMR法是以标准物质作为基准，测定对象物质（样本）的纯度或评估浓度的一种方法。FUJIFILM和光纯药株式会社出售定量NMR用标准物质和能用于内标法的定量NMR用标准液。

◆特点

●　利用定量NMR法保证其纯度

●　无需精密称量标准物质

●　具有可信赖的应用不确定度

●　可作为外标法的标准物质使用

◆产品列表

DNA Extractor^® Kit  血清/生物制药残余DNA提取试剂盒

　　本产品是血清中含有的病毒DNA和含有生物制剂等的菌体来源的微量的总DNA的提取试剂盒。无需使用苯酚、氯仿等剧毒物，可以在短时间内以高纯度和高回收率提取DNA。本试剂盒适用于提取血液、培养细胞以及生物制药中残余宿主DNA*。

*组织中的基因组DNA时请选用DNA Extractor^® WB-Rapid Kit。

◆DNA Extractor^® Kit 的原理

　　用碘化钠和阴离子去垢剂溶解样品中的蛋白和脂质，然后在混合物中加入异丙醇，使核酸和糖原进行共沉淀。这时碘化钠和阴离子去垢剂阻止样品中蛋白等成分的沉淀并使其溶于液相，从而选择性沉淀DNA。

◆特点

1.    高回收率，极微量的DNA（10pg）也可以回收约90%。

2.    只需使用一支离心管就能完成实验（1~1.5小时）。

3.    无需苯酚、氯仿等有机溶剂

◆试剂盒组成

1． 碘化钠溶液（Sodium N-Lauroyl Sarcosinate Solution）：26 mL × 1

2． 月桂酰肌氨酸钠（Sodium Iodide Solution）：1.2 mL × 1

3． 洗涤溶液（A） （Washing Solution（A））：42 mL × 1

4． 洗涤溶液（B） （Washing Solution（B））：40 mL × 2

5． 糖原溶液（Glycogen Solution）：0.1 mL × 1

* 试剂盒不包含异丙醇、蒸馏水。

◆使用方法

◆应用实例

①DNA添加·回收实验

用³²P标记 λ/Hind III 10~1,000 pg，添加100 μL的人血清，用本试剂盒提取DNA，并算出回收率。

②PCR检测

连续稀释含有HBV（乙型肝炎病毒）的血清，用本试剂盒和苯酚法提取DNA，通过PCR扩增HBV-DNA，并用琼脂糖凝胶电泳进行检测。

Lane1：φX174DNA/Hae III

◆产品列表

岛津蛋白测序仪配套试剂/色谱柱

品牌：日本和光Wako

产地：日本

注：

#125-05061质谱分析前处理时最常用的蛋白质分解酶即赖氨酸肽链内切酶，该酶可以特异性切除赖氨酸基团C末端的多肽，可用于蛋白测序分析和Lys-X化合物的合成。若同时使用赖氨酸肽链内切酶和胰酶，可更好地切断赖氨酸基团的多肽，增加多肽的数量。

欲了解相关产品请点击文字：岛津蛋白质测序仪PPSQ-51A/53A型

相关资料

色谱柱转接头（D型转W型）

抗焦虑药

◆安定（Diazepam）

CAS No. 439-14-5 C16H13ClN2O=284.74 纯度:98.0+％（Titration） 可溶性溶剂:乙醇 用途（作用）:苯并二氮类化合物。作用于GABA受体，对中枢神经有抑制作用，作用时间长。

◆三唑安定（Alprazolam）

CAS No. 28981-97-7 C17H13ClN4=308.76 纯度:98.0 ～ 102.0％（Titration） 可溶性溶剂:乙醇 用途（作用）:苯并二氮类化合物。作用于GABA受体，对中枢神经有抑制作用，作用时间中等。

◆甲氨二氮草（Chlordiazepoxide）

CAS No. 58-25-3 C16H14ClN3O=299.75 纯度:98.0+％（Titration） 可溶性溶剂:稀盐酸 用途（作用）:苯并二氮类化合物。作用于GABA受体，对中枢神经有抑制作用，作用时间长。

◆劳拉西泮（Lorazepam）

CAS No. 846-49-1 C15H10Cl2N2O2=321.16 纯度:98.0+％（Titration） 可溶性溶剂:乙醇 用途（作用）:苯并二氮类化合物。作用于GABA受体，对中枢神经有抑制作用，作用时间中等。

◆普拉西泮（Prazepam）

CAS No. 2955-38-6 C19H17ClN2O=324.80 纯度:98.5+％（Titration） 可溶性溶剂:乙醇 用途（作用）:苯并二氮类化合物。作用于GABA受体，对中枢神经有抑制作用，作用时间中等。

◆溴基安定（Bromazepam）

CAS No. 1812-30-2 C14H10BrN3O=316.15 纯度:99.0+％（Titration） 可溶性溶剂:氯仿 – 甲醇 用途（作用）:苯并二氮类化合物。作用于GABA受体，对中枢神经有抑制作用，作用时间中等。

◆恶唑安定（Oxazolam）

CAS No. 24143-17-7 C18H17ClN2O2=328.79 纯度:98.0+％（volumetric analysis） 可溶性溶剂:丙酮 用途（作用）:苯并二氮类化合物。作用于GABA受体，对中枢神经有抑制作用，作用时间中等。

◆氯氟卓乙酯（Ethyl Loflazepate）

CAS No. 29177-84-2 C18H14ClFN2O3=360.77 纯度:98.0+％（Titration） 可溶性溶剂:丙酮 用途（作用）:苯并二氮类化合物。作用于GABA受体，对中枢神经有抑制作用，作用时间非常长。

◆托非索泮（Tofisopam）

CAS No. 22345-47-7 C22H26N2O4=382.45 纯度:98.0+％（HPLC） 可溶性溶剂:乙醇 用途（作用）:苯并二氮类化合物。作用于GABA受体，对中枢神经有抑制作用，作用时间短。

◆氯噻西泮（Clotiazepam）

CAS No. 33671-46-4 C16H15ClN2OS=318.82 纯度:98.0+％（Titration） 可溶性溶剂:乙醇 用途（作用）:苯并二氮类化合物。作用于GABA受体，对中枢神经有抑制作用，作用时间短。

相关资料详情请查看：http:///pdf/show/80.html

除虫药成分

◆甲硝磺酰咪唑（Tinidazole）

◆磷酸氯喹（Chloroquine   Diphosphate）

◆灭滴灵（Metronidazole）

◆奎宁（Quinine）

相关资料详情请查看：http:///pdf/show/80.html

钼酸氧化

●　TROST氧化

●　可以选择性地将仲醇氧化成酮

◆反应例子^{【a】【b】}

参考文献

GenomONE^TM-CF EX 仙台病毒包膜细胞融合试剂 

　　GenomONE^TM-CF含有仙台病毒包膜和专用缓冲液，可促使细胞融合。适用于贴壁或者悬浮状态的任何细胞。仅仅需要30分钟就可完成融合细胞及制造混合动力的操作。

◆用途

　　●肿瘤疫苗·癌症免疫研究

　　　癌细胞和树突细胞融合等

　　●再生医疗·细胞治疗研究

　　　脏器来源细胞和干细胞融合等

　　●单克隆抗体的制备

　　　抗原B细胞和髓过氧化物酶细胞融合

　　●分生·分化·育种研究

　　　对脱核未受精卵的核移植（核置换）

　　●其他

　　　PEG&电融合的使用介绍

◆HVJ Envelope（HVJ-E）：

　　HVJ包膜（HVJ-E）是完全灭活和纯化仙台病毒（HVJ*），即只留下细胞膜融合能力的衣壳蛋白包膜。仙台病毒的HN蛋白可与细胞膜外的唾液酸受体结合，通过F蛋白的作用，引起细胞膜融合。在HVJ-E中，仙台病毒的基因组RNA已经完全失活，在人类和实验动物体内不存在感染或增殖。因而不需要特殊的操作和设备，它可以安全地在普通的实验室使用。

*HVJ：日本仙台病毒

◆HVJ-E细胞融合原理

在低温（0 – 8℃)条件下，每一个细胞与数百个以上的HVJ – E接触，HVJ – E与细胞膜上的唾液酸受体结合，通过细胞表面吸附（步骤1），细胞通过HVJ-E相互连接（步骤2），形成细胞彼此聚集的状态。当该细胞/ HVJ-E的复合物加热到37℃时，细胞膜干扰就会进一步扩大，细胞膜内膜结构也暂时改变。这种变化是短暂的，随后会立即返回到正常结构，但是在这个期间，细胞膜利用强疏水性结合力进行相互融合（步骤3）。

◆应用方法

◆悬浮细胞融合案例

同种细胞融合

异种细胞融合

　　荧光标记的红（* 1）细胞和绿色荧光标记（* 2）细胞（每1.0х105个）在融合缓冲液50μL混合后，加入HVJ-E冰敷5分钟，随后37℃下反应15分钟后，融合细胞（黄色）进行了观察。

◆黏着态和悬浮态细胞融合案例

在粘合状态BHK-21（红）和在浮动状态（绿色）的P19细胞的融合

胶粘状态的HeLa S3（红）在浮动状态（绿色）的P19细胞的融合

　　荧光标记的（* 1）中的红，附着的细胞在12孔平板，绿色荧光标记（* 2）中，添加预先准备的HVJ-E，来处理漂浮细胞1×105个的悬浮液（融合缓冲污染），并在室温下离心（1000转），每个板5分钟。随后孵育37℃15分钟后，更换增殖用的培养基继续细胞培养。观察3个小时后的融合细胞（黄色）。

◆和PEG法的比较

　　红色荧光标志(* 1）的ratMSC（骨髓由来老鼠间叶系细胞）和绿色荧光标识的老鼠原代培养心肌细胞2×105个融合缓冲液50μL中混合后，添加HVJ – E，冰浴5分钟，然后37℃孵育反应15分钟，观察融合细胞（黄色）。1 – 2日培养后，观察到粘着的融合细胞。在PEG法中融合紧接之后细胞毒性强烈，融合细胞的数量很少。

◆安全性说明

HVJ-E失活的确认（确认无感染性病毒的存在）

相关资料

Q&A

Q1：什么是Genomone-CF EX？
A1：GenomONE-CF是由HVJ包膜（HVJ-E）和特殊缓冲液组成的细胞融合试剂盒。 它可以用于贴壁细胞和悬浮

A1：细胞。 使用该试剂盒融合相同或不同类型的细胞只需30分钟。

Q2：HVJ-E的特性？
A2：HVJ包膜是通过完全灭活的仙台病毒（HVJ：日本血凝素病毒）纯化后的产物。 它是一种囊泡，其中仅保留

A2：仙台病毒具有细胞膜融合能力的包膜蛋白。 众所周知，在鞘膜外耳炎（包膜）仙台病毒中的HN蛋白能识别

A2：细胞膜上的受体（在糖链的末端具有唾液酸）并且将其吸收，从而通过F蛋白（包膜的另一组分）介导膜融

A2：合。 HVJ-E中包含的仙台病毒基因组RNA已经完全灭活，并且在人或实验动物中既不能感染也没有增殖潜力。

A2： HVJ-E可以在普通实验室中安全使用，无需任何特殊操作或设施。

Q3：失效日期？
A3：在铝纸包装上印刷了冻干的HVJ-E的保质期。

Q4：对于HVJ灭活方法？
A4：虽然HVJ-E使用HVJ（仙台病毒/鼠副流感病毒1）作为原料，但HVJ的基因组RNA已经通过药物治疗而完全灭

A4：活*。 HVJ-E不会在人或动物中增殖或表现出致病作用。
A4：参考文献：Prior, P. et al.: BioPharm, 22-33 (Oct. 1996) Kaneda, Y. et al.: Advances in Genetics, 53, 308-332 (2005).

Q5：病毒灭活的评估和确认？
A5：通过对培养的细胞和生长的鸡蛋进行病毒增殖性电位排除试验，证实了每批的HVJ已经失活。

Q6：确认病毒灭活的方法？
A6：通过以下三种方法证实了在人或实验动物中缺乏HVJ-E的感染或增殖的可能性。
A6：（1）使用培养细胞的测定
A6：（2）使用受精的鸡蛋进行测定
A6：（3）使用小鼠进行测定

Q7：实验室生物实验安全级别，使用注意事项？
A7：Genomone可以在普通实验室安全使用。虽然HVJ-E使用HVJ（仙台病毒/鼠副流感病毒1）作为原料，

A７：但HVJ的基因组RNA已经通过药物治疗而完全灭活。 HVJ-E不会在人或动物中增殖或表现出致病作用。
A７：然而，当使用该产品进行细胞融合实验时，产生的重组生物体等可能属于卡塔赫纳生物安全议定书的限制。

A７：使用本产品生产重组生物体的实验者必须采取适当措施，防止此类生物体扩散，然后再使用本产品进行实验。
A７：此外， DNA重组实验，必须遵循重组DNA实验规则（在使用国的相关法规中规定或由相关设施的安全委员

A７：会规定），并且实验只能在具有合适设施的实验室中进行DNA重组实验。

Q8：质量保证？
A8：
A8：◆　通过对培养细胞和受精鸡蛋的病毒增殖性电位排除试验，确认每批HVJ的灭活。
A8：◆　无菌检测证实了不存在细菌和真菌污染。
A8：◆　内毒素水平已被证实小于2.5 EU / mL（鲎细胞裂解物凝胶凝块测定）。

Q9：许可证要求和商业用途？
A9：本产品由一个或多个专利的权利要求所覆盖，并且仅授予研究用途。 未经制造商事先书面许可，不得用于任

A9：何商业或其他目的，或在修改后转售等(Ishihara Sangyo Kaisha, Ltd.)。

Q10：每种试剂的作用？
A10：
A10：◆　冻干的HVJ-E：HVJ-E是通过完全灭活HVJ（仙台病毒）制备的纯化囊泡，其中仅保留HVJ具有细胞膜融

A10：◆　合能力的包膜蛋白。
A10：◆　HVJ-E悬浮缓冲液：用于复融，重悬，稀释HVJ-E或其他目的的生理浓度的中性缓冲液。
A10：◆　细胞融合缓冲液：用于细胞融合的优化缓冲液。
A10：◆　“细胞融合缓冲液（20X浓缩物）”应在使用前用无菌纯水（例如，不含内毒素的注射用水）以1：20

A10：◆　稀释。

Q11：每种试剂的成分和浓度？
A11：无相关数据

Q12：重组HVJ-E悬浮液的储存？
A12：
A12：◆　为了连续使用，请在冰箱（2-8°C）存放最多两个星期。
A12：◆　对于长期储存，根据每次使用量将试剂分装保存在-80℃下冷冻最多3个月。 冷冻后只能解冻一次。

Q13：“HVJ-E悬浮缓冲液”和“细胞融合缓冲液（20X）”的保存？
A13：储存在冰箱（2-8°C）。 不要冻结。

Q14：HVJ-E的粒度？
A14：约300nm（200-400nm）

Q15：HVJ-E颗粒数？
A15：40mL复融的HVJ-E悬浮液包括约109-1010个HVJ-E颗粒。

Q16：HVJ-E的血细胞凝集单位（HAU）？
A16：40mL复融的HVJ-E悬浮液，相当于约1,000-2,000个血凝单位（HAU）。

Q17：使用频率？
A17：
A17：◆　对于相同或不同类型的细胞的融合：约100次
A17：◆　用于制备B细胞杂交瘤：约10次

[1]　Genome Transfer Prevents Fragmentation and Restores Developmental Potential of Developmentally

        Compromised Postovulatory Aged Mouse Oocytes.YamadaM, Egli D.Stem Cell Reports. 2017 Mar 14;

        8(3):576-588. PMID: 28242217

[2]　Developmentally Regulated RNA-binding Protein 1 (Drb1)/RNA-binding Motif Protein 45 (RBM45), 

        a Nuclear-Cytoplasmic Trafficking Protein, Forms TAR DNA-binding Protein 43 (TDP-43)-mediated

        Cytoplasmic Aggregates.Mashiko T, Sakashita E, Kasashima K, Tominaga K, Kuroiwa K, Nozaki Y, 

        Matsuura T, Hamamoto T, Endo H.J Biol Chem. 2016 Jul 15;291(29):14996-5007. PMID: 27226551

食品分析用—儿茶素标准品

　　适用于食品功能性成分的定量分析实验。

　　儿茶素是茶叶等含有的成分，具有抗氧化作用。

　　食品功能性成分的标准品请见下面：

◆属性

◆产品列表

LDH-细胞毒性检测Wako

LDH-Cytotoxic Test Wako

◆背景

　　在日本每年在动物实验中死亡的小鼠和大鼠达850万只。其中以兔子眼睛作为药品和化妆品检测的样本，利用德莱兹法观察角膜和结膜的变化检测毒性·刺激性的实验，是非常残忍的。

　　因此，开发了在in vitro条件下的动物实验代替传统动物实验。此方法可检测培养细胞的毒性和细胞增值能力，不仅可测定因试剂破坏细胞而流出的酶量，还可以使色素渗入到活细胞中。比实验动物法实惠且节省操作，可客观地测定其毒性。

　　本产品是使用培养细胞对各种试剂的毒性进行简便测定的试剂盒。

　　可以直接测定细胞膜受到试剂影响而死亡的细胞中的游离LDH（乳酸脱氢酶），灵敏性高。

◆优点

●　可用于吸附细胞·浮游细胞

●　使用酶测定法进行测定，可以对细胞毒性进行精确的定量测定

●　通过调节样品处理时间和显色反应时间可以调节灵敏度

●　使用吸光全自动定量绘图酶标仪可以对多数样品进行测定

●　测定波长：吸光560 nm

◆测定原理

　　在LDH的作用下乳酸会被丙酮酸氧化，而辅酶会被NADH还原。样品中根据LDH活性按比例生成的NADH会在心肌黄酶的作用下会将硝基蓝四氮唑还原，生成蓝紫色的双蚁酯。在560 nm（±10 nm）下测定这个显色液的吸光度。

◆试剂盒构成

显色试剂 硝基蓝四氮唑还原

心肌黄酶，NAD（3.7mg/vial）——————————————5 mL用×10支

缓冲液 DL-乳酸锂（50mg/mL）——————————————————55 mL×11支

反应停止液 盐酸（1mol/L）————————————————————55 mL×11支

96孔微量滴定板—————————————————————————10块（未灭菌）

◆使用方法

实验步骤

96孔板（灭菌）

↓→添加细胞。37℃下过夜

↓→PBS清洗

↓→添加检测物。37℃，15分钟

↓→离心分离

上清液

◆用途

　　通过LDH法检测各种试剂毒性的试剂盒。

参考文献

[1]　Korzeniewski, C. andCallewaert, D. M. : J. Immunol. Methods, 64, 313 (1983)

[2]　Decker, T. andLohmann-Matthes, M. -L. : J. Immunol. Methods, 115, 61 (1988)

酵母提取物

粉末状酵母提取物 SH

DRIED YEAST EXTRACT SH

◆概要

　　本产品是通过特殊方法萃取啤酒酵母中的（Saccharomyces CerevisiaeMeyen)水溶性组分，再烘干而成的浅棕色粉末，含有维生素和多种矿物质等。因此，用本产品代替肉汤或肉提取物用于一般培养基时，能够取得良好的结果。

◆标准值

◆应用

1） 作为无菌实验用巯基乙酸液体培养基的生长要素使用。

2） 适用于Bioassay的乳酸菌培养。

3） 用于乳制品或食品的微生物检验用培养基。

4） 适合用作抗生素发酵等的培养基材。

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粉末状酵母提取物 D-3H

DRIED YEAST EXTRACT SH

◆概要

　　本产品是通过酵母自身的自我消化法萃取啤酒酵母中的（Saccharomyces CerevisiaeMeyen)水溶性组分，再烘干而成的浅棕色粉末，含有维生素和多种矿物质等。

◆标准值

◆应用

1） 作为无菌实验用巯基乙酸液体培养基的生长要素使用。

2） 适用于Bioassay的乳酸菌培养。

3） 用于乳制品或食品的微生物检验用培养基。

4） 适合用作抗生素发酵等的培养基材。

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粉末状酵母提取物FH

DRIED YEAST EXTRACT FH

◆概要

　　本产品是通过酵母自身的自我消化法萃取啤酒酵母中的（Saccharomyces CerevisiaeMeyen)水溶性组分，再烘干而成的浅棕色粉末，含有维生素和多种矿物质等。

◆标准值

◆应用

1） 作为无菌实验用巯基乙酸液体培养基的生长要素使用。

2） 适用于Bioassay的乳酸菌培养。

3） 用于乳制品或食品的微生物检验用培养基。

4） 适合用作抗生素发酵等的培养基材。

※注意事项

上述产品均有吸湿性，需密封室温保存。

蛋白胨和酵母粉

粉末状酵母提取物 SH

DRIED YEAST EXTRACT SH

参考文献

1） 坂崎利一等：新细菌培养基学讲座 · 上（第2版），  培养基素材 P115，1986. 近代出版

粉末状酵母提取物 D-3H

DRIED YEAST EXTRACT SH

参考文献

1） 坂崎利一等：新细菌培养基学讲座 · 上（第2版），  培养基素材 P115，1986. 近代出版

PrimeSurface 24F 多孔板（24well・平底）

◆优点・特色

●　材料本身对样品的刺激少。 

●　胚胎干细胞分化研究。

●　巨噬细胞和树状细胞的刺激反应研究。

●　上皮细胞的三维培养。（维持细胞功能，观察细胞形态）

●　细胞相互作用研究。

● 　神经细胞分化研究。

● 　防止蛋白和多肽的吸附。

●　维持添加物活性。

●　回收细胞产物。

PSFM-J1昆虫细胞培养基

◆适用于培养Sf9细胞、Sf21细胞、H5细胞!
◆现新增更方便使用的500ml 包装。

　　本产品是昆虫细胞sf9、High Five（H5）培养无血清培养基。此外，实践证明，培养Sf21细胞可以观察到蛋白质。无需担心由于过多血清引起的生物活性变异及病毒感染。
培养High Five(H5)细胞时，无需添加L-谷氨酰胺。

Sf21细胞

Sf9细胞

High Five(H5)细胞

转移培养基时的注意点

　　●从现有培养基转移时请进行驯化。
   例）将本产品加入现有培养基比例10%→30%→50%→70%→90%→100%，逐渐提高比率。

　　●使用Hign Five时，无需添加L-谷氨酰胺

聚丙烯酰胺凝胶 SuperSep Ace

ISOGEN II

总RNA及小RNA提取试剂

    离心后的沉淀              ISOGEN II 100 mL

　　ISOGEN II是从动物组织和培养细胞中提取总RNA和小RNA的试剂。本品是含有苯酚和胍的均匀液体，根据与细胞成分的相互作用，能一步分离RNA。

　　使用旧产品（ISOGEN和ISOGEN-LS）需要添加氯仿，要进行液相分离，而本产品则无需此步骤。在样品中加入ISOGEN II溶解或是均质之后，添加水， DNA、蛋白质、多糖类等沉淀（不溶化），进行离心分离后可以去除（右图）。用酒精沉淀、洗净、溶解上清液之后，能分离出高纯度的RNA。若配合ISOGENOME 使用，也能够跟ISOGEN一样从同一样本中提取DNA。

◆特点