日本同仁化学アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 

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アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit Amino Acid Uptake Assay Kit

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Amino Acid Uptake Assay Kit

アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞機能解析
  • 細胞老化
  • 細胞内代謝
  • 蛍光色素
  • 顕微鏡
  • FCM

アミノ酸取り込み検出キット

  • アミノ酸取り込み能力を簡便に検出できる
  • 蛍光顕微鏡、プレートリーダー、フローサイトメーターを用いて検出が可能
  • 製品コード
    UP04  Amino Acid Uptake Assay Kit
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
20 tests ¥16,000 346-09891
100 tests ¥45,000 342-09893

<使用回数の目安> 100 testsあたり、35 mm dish 10枚、96-well plate 1枚

キット内容
20 tests BPA Solution
BPA Dilution Buffer
Probe Solution 
35 ×l×1
35 ×l×1
15 ×l×1
100 tests BPA Solution
BPA Dilution Buffer
Probe Solution 
175 ×l×1
175 ×l×1
75 ×l×1

  • アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 
試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit  日本語
    アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 
  • 取扱説明書 アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit  English
    アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 

技術情報

この製品でできること

アミノ酸の取り込みを阻害する薬剤を抗がん剤としてスクリーニングしたり、正常細胞とがん細胞の取り込み能力を比較することができます。

アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 

よくある質問

Q

BPAはどのトランスポーターを介して取り込まれるのでしょうか?

A

BPAは、LAT1, LAT2, ATB0,+を介して取り込まれることが報告されています(Wongthai P et al., “Boronophenylalanine, a boron delivery agent for boron neutron capture therapy, is transported by ATB0,+, LAT1 and LAT2”, Cancer Sci., 2015, Mar;106(3):279-86)。また、小社では、LAT1の阻害剤BCHや、LAT1の基質であるleucineなどの競合阻害実験でBPAの取り込みが阻害されることを確認しています。

Q

使用実績のある細胞種を教えて下さい。

A

付着細胞(HeLa, A549, HepG2, MCF-7, C2C12, MEF, U251), 浮遊細胞(MOLT4)

Q

BPAは細胞内に取り込まれた後、分解・代謝されるのでしょうか?

A

BPAは安定な構造を有しているため、実験操作内において分解されることはございません。

Q

BPAを生細胞へ取り込ませた後、細胞を固定することは可能でしょうか?

A

プローブが細胞内から漏出するため、染色後の細胞を固定することはできません。

Q

BPAは細胞内での局在性はありますか?

A

取り込まれたBPAは細胞内に均一に存在します。

Q

BPA uptake solution, Working solutionは保存可能でしょうか?

A

BPA uptake solution, Working solutionは保存できません。

Q

蛍光シグナルの変化が観察されない場合、どうすればいいですか?

A

2点原因が考えられるため、以下のようにすると改善される可能性があります。
①BPA uptake solutionの取り込み量が少ない可能性があります。その場合は、BPA Solutionの希釈倍率を下げてご検討ください。(5~50倍希釈)
②Working solutionが劣化している可能性があります。再度、Working solutionを調製してください。

Q

バックグラウンドが高い場合、どうすればいいですか?

A

細胞に取り込まれなかったBPAがウェル内に残存している可能性があります。
HBSSによる洗浄を繰り返してください。

Q

BPAの定量はできますか?

A

取り込まれたBPAの定量を行う事はできません。本キットは、アミノ酸取り込み能力の増減を確認するためのキットとなります。

Q

蛍光測定用のマイクロプレートはどのようなものが使えますか?

A

使用実績のあるマイクロプレートは下記の通りです。

社名 製品名 Cat No.
ibidi μPlate 96 well ibiTreat black S 15 ib89626
AGC techno glass EZVIEW Glass Bottom Culture Plate LB 96well 5866-096
Thermo Fisher 96 Well Black/Clear Bottom Plate, TC Surface, Pack of 10 165305

アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit  アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 

取扱条件

取扱条件
1.危険物第4類 第3石油類 危険等級Ⅲ, 2.火気厳禁 3.保存方法:冷凍(-20℃)
危険・有害
シンボルマーク
アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 
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アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 

関連製品

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    グルコース取り込み検出キットGreen

    Glucose Uptake Assay Kit-Green

  • アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 

    グルコース測定キット

    Glucose Assay Kit-WST

  • アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 

    乳酸測定キット

    Lactate Assay Kit-WST

  • アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 

    α-ケトグルタル酸測定キット

    α-Ketoglutarate Assay Kit-Fluorometric

  • アミノ酸取り込み検出キット Amino Acid Uptake Assay Kit 

    老化細胞検出キット(マイクロプレート用)

    Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal

日本同仁化学有機シンチレーター関連試薬:第2溶質 POPOP 

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有機シンチレーター関連試薬:第2溶質 POPOP POPOP

12 有機シンチレーター

POPOP

有機シンチレーター関連試薬:第2溶質 POPOP 

  • 有機シンチレーター

有機シンチレーター関連試薬:第2溶質

  • 製品コード
    P009  POPOP
  • CAS番号
    1806-34-4
  • 化学名
    1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene
  • 分子式・分子量
    C24H16N2O2=364.4
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
25 g ¥35,000 342-02252
  • 有機シンチレーター関連試薬:第2溶質 POPOP 
試験成績書

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  • ご購入方法
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技術情報

有機シンチレーター関連試薬:第2溶質 POPOP 

取扱条件

規格
性状: 本品は、淡黄色針状結晶でありピリジンに溶ける。
純度(HPLC): 99.0% 以上
トルエン溶状: 試験適合
吸光度: 1.000 以上(360 nm付近)
融点: 240~247℃
強熱残分(硫酸塩): 0.10% 以下
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
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有機シンチレーター関連試薬:第2溶質 POPOP 

関連製品

日本同仁化学分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 1500 

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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 1500 Agarose 1500

03 分子生物学関連試薬

Agarose 1500

  • 分子生物学関連試薬

分子生物学関連試薬-Agarose

  • 製品コード
    A427  Agarose 1500
  • CAS番号
    9012-36-6
  • 化学名
    Agarose
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
25 g ¥8,600 344-07832
100 g ¥24,200 346-07831
試験成績書

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マニュアル

  • プロトコル 分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 1500  電気泳動で核酸を分離したい
    分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 1500 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色~灰黄白色粉末である。
水溶状: 試験適合
強熱残分(硫酸塩): 1.0% 以下
乾燥減量(80℃): 20.0% 以下
硫黄含量: 0.30% 以下
ゲル強度: 1400 g/cm2 以上
凝固温度: 35~40℃
融解温度: 91~95℃
DNase活性: 不検出
RNase活性: 不検出
バックグラウンド試験: 試験適合
取扱条件
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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 1500 

関連製品

日本同仁化学シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 

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シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit Cystine Uptake Assay Kit

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Cystine Uptake Assay Kit

シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞内代謝

シスチン取り込み検出キット

  • シスチン取り込み能力を簡便に検出できる
  • プレートリーダーを用いて検出が可能
  • 製品コード
    UP05  Cystine Uptake Assay Kit
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
20 tests ¥18,000 344-09951
100 tests ¥50,000 340-09953

<使用回数の目安> 100 testsあたり、96-well plate 1枚

キット内容
20 tests Cystine Analog Solution
Fluorescent Probe
Reducing Agent
Assay Buffer
45 μl×1
×1
×1
5 ml×1
100 tests Cystine Analog Solution
Fluorescent Probe
Reducing Agent
Assay Buffer
225 μl×1
×1
×2
25 ml×1

  • シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 
  • シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 
  • シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 
  • シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 
試験成績書

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  • ご購入方法
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マニュアル

  • 取扱説明書 シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit  日本語
    シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 
  • 取扱説明書 シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit  English
    シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 

技術情報

この製品でできること

本キットはCystine Analog (CA)としてSelenocystineを用いており、細胞のシスチン取り込み能力を短時間の操作で簡便にプレートリーダーにて測定することが可能です。

シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 

参考文献

参考文献を表示する
文献No. 対象サンプル 装置 引用(リンク)
1) 細胞
(A172; LN229)
プレートリーダー K. Hayashima, H. Katoh, "Expression of gamma-glutamyltransferase 1 in glioblastoma cells confers resistance to cystine deprivation-induced ferroptosis", J. Biol. Chem.2022, doi:10.1016/j.jbc.2022.101703.

よくある質問

Q

Cystine Analogはどのトランスポーターを介して取り込まれるのでしょうか?

A

Cystine Analogはシスチン・グルタミン酸トランスポーター(xCT)を介して細胞内へ取り込まれます。

Q

細胞種の実績を教えて下さい。

A

下記の細胞において使用実績があります。

由来 細胞名
ヒト神経膠芽腫由来細胞 A172
ヒト肺胞基底上皮腺癌細胞 A549
ヒト悪性黒色種 A375
ヒト結腸腺癌 HCT116
ヒト子宮頸癌由来細胞 HepG2
白血病細胞 HL60
ヒトサルコーマ細胞 HT1080
マウス胚性線維芽細胞 MEF
ヒト肺小細胞​癌 SBC-5
アストロサイト―マ U-251 MG

 

 

 

Q

Cystine Analogは細胞内に取り込まれた後、分解・代謝されるのでしょうか?

A

Cystine Analogは安定な構造を有しているため、実験操作内において分解されることはございません。

Q

Cystine uptake solutionは保存可能でしょうか?

A

Cystine uptake solutionは保存できません。添加前に必要量のCystine uptake solutionを調製して下さい。

Q

シスチンを定量することはできますか?

A

本製品を用いてシスチンを定量することはできません。

Q

細胞内に取り込まれたCystine Analogを定量することはできますか?

A

細胞内に取り込まれたCystine Analogを定量することはできません。本製品は、シスチン取り込み能力を数値化するためのキットです。

Q

蛍光シグナルの変化が観察されない場合、どうすればいいですか?

A

CA Uptake solutionによる細胞の処理時間を延長して(30分~1時間程度) ご検討下さい。

Q

バックグラウンドが高い場合、どうすればいいですか?

A

細胞に取り込まれなかったCystine Analogがウェル内に残存している可能性があります。PBSによる洗浄を繰り返してください。

Q

シスチン不含無血清培地以外にCA Uptake solutionの調製に使用できるバッファーはありますか?

A

HeLa細胞においてHBSSや0.1%Glucoseを含むPBS(+)を使用して測定した実績がございます。

Q

蛍光強度を細胞数で補正する方法を教えてください。

A

核酸染色剤による補正が可能です。また、小社製品"Cell Count Normalization Kit (製品コード:C544)"を用いて細胞数をカウントし、補正することも可能です。

Q

蛍光測定用のマイクロプレートはどのようなものが使えますか?

A

使用実績のあるマイクロプレートは下記の通りです。

社名 製品名 Cat No.
ibidi μPlate 96 well ibiTreat black S 15 ib89626
AGC techno glass EZVIEW Glass Bottom Culture Plate LB 96well 5866-096
Thermo Fisher 96 Well Black/Clear Bottom Plate, TC Surface, Pack of 10 165305

シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit  シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 

取扱条件

取扱条件
1. 医薬用外毒物, 2. 保存方法:冷凍(-20℃)
危険・有害
シンボルマーク
シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 
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シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

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    Glucose Uptake Assay Kit-Green

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    アミノ酸取り込み検出キット

    Amino Acid Uptake Assay Kit

  • シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 

    グルタチオン定量キット

    GSSG/GSH Quantification Kit

  • シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 

    トータルROS検出キット

    ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-

  • シスチン取り込み検出キット Cystine Uptake Assay Kit 

    細胞内鉄イオン測定試薬

    FerroOrange

日本同仁化学有機シンチレーター関連試薬 Scintisol® AL-1 

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有機シンチレーター関連試薬 Scintisol&reg;  AL-1 Scintisol® AL-1

12 有機シンチレーター

Scintisol® AL-1

  • 有機シンチレーター

有機シンチレーター関連試薬

  • 製品コード
    SC01  Scintisol® AL-1
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
500 ml ¥8,600 343-02405
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取扱条件

規格
性状: 本品は、紫色蛍光性透明液体である。
取扱条件
1.危険物第4類 第1石油類 危険等級Ⅱ, 2.安衛法,化審法, 3.火気厳禁 4.保存方法:冷暗所保存,1.危険物第4類 第2石油類 危険等級Ⅲ, 2.安衛法,化審法, 3.火気厳禁 4.保存方法:冷暗所保存
PRTR法 第1種指定化学物質
外国為替及び外国貿易法・輸出貿易管理令 要承認(別表2)
危険・有害
シンボルマーク
有機シンチレーター関連試薬 Scintisol&reg;  AL-1 有機シンチレーター関連試薬 Scintisol&reg;  AL-1 有機シンチレーター関連試薬 Scintisol&reg;  AL-1 
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有機シンチレーター関連試薬 Scintisol&reg;  AL-1 

関連製品

日本同仁化学生体高分子機能解析用試薬 BABE 

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生体高分子機能解析用試薬 BABE BABE

03 分子生物学関連試薬
09 二価性試薬

BABE

生体高分子機能解析用試薬 BABE 

  • 分子生物学関連試薬
  • 二価性試薬

生体高分子機能解析用試薬

  • 製品コード
    B437  BABE
  • CAS番号
    84256-91-7
  • 化学名
    1-(p-Bromoacetamidobenzyl)ethylenediamine-N,N,N’,N’-tetraacetic acid
  • 分子式・分子量
    C19H24BrN3O9=518.31
容 量 メーカー希望
小売価格
¥特注品
  • 生体高分子機能解析用試薬 BABE 
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技術情報

溶解例

緩衝溶液、DMSOに可溶

参考文献

参考文献を表示する

1) L. H. DeRiemer, C. F. Meares, D. A. Goodwin and C. I. Diamanti, "BLEDTA II: Synthesis of a New Tumer-Visualizing Derivative of Co(III)-bleomycin", J. Labelled Compd. Radiopharm., 1981, 18, 1517.
2) T. M. Rana and C. F. Meares, "Specific Cleavage of a Protein by an Attached Iron Chelate", J. Am. Chem. Soc., 1990, 112, 2457.
3) T. M. Rana and C. F. Meares, "Transfer of Oxigen from an artificial protease to peptide carbon during proteolysis", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1991, 88, 10578.
4) D. P. Greiner, R. Miyake, J. K. Moran, A. D. Jones, T. Negishi, A. Ishihama and C. F. Meares, "Synthesis of the Protein Cutting Reagent Iron (S)-1-(p-Bromoacetamidobenzyl)ethylebediaminetetraacetate and Conjuation to cysteine Sie Cahins", Bioconjugate Chem., 1997, 8, 44.
5) E. Platis, M. R. Ermacora and R. O. Fox, "Oxidative Polypeptide Cleavage Mediated by EDTA-Fe Covalently Linked to Cysteine Residue", Biochemistry, 1993, 32, 12761.
6) S. L. Traviglia, S. A. Datwyler, D. Yan, A. Ishihama and C. F. Meares, "Targeted Protein Footprinting: Where Different Transcription Factors bind to RNA Polymerase", Biochemistry, 1999, 38, 4259.
7) J. B. Ghaim, D. P. Greiner, C. F. Meares and R. B. Gennis, "Proximity Mapping the suface of Membrane Protein Using an Artificial Protease: Demonstration That the Quinone-Binding Domain of Subunit I Is near the N-Terminal Region of Subunit II of Cytochrome bd", Biochemistry, 1995, 34, 11311.
8) R. Miyake, K. Murakami, J. T. Owens, D. P. Greiner, O. N. Ozoline, A. Ishihama and C. F. Meares, "Dimeric Association of Escherichia coli RNA Polymerase alfa subunits, studied by Cleavage of Single-Cysteine alfa Sununits Conjugated to Iron-(S)-1-(p-(Bromoacetamido)benzyl)ethylenediaminetetraacetate", Biochemistry, 1998, 37, 1344.
9) J. T. Owens, R. Miyake, K. Murakami, A. J. Chmura, N. Fujita, A. Ishihama and C. F. Meares, "Mapping the sigma70 subunits contact sites on Escherichia coli RNA polymerase with a sigma70-conjugated chemical protease", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1998, 95, 6021.
10) J. A. Bown, J. T. Owens, C. F. Meares, N. Fujita, A. Ishihama, S. J. Busby and S. D. Minchin, "Organization of open complexes at Escherichia coli promoters. Location of promoter DNA sites close to region 2.5 of the sigma70 subunit of RNA polymerase", J. Biol. Chem., 1999, 274, 2263.
11) F. Colland, N. Fujita, D. Kotlarz, J. A. Bown, C. F. Meares, A. Ishihama and A. Kolb, "Positioning of sigma(S), the stationary phase sigma factor, in Escherichia coli RNA polymerase-promoter open complexes", EMBO J., 1999, 18, 4049.
12) G. M. Heilek, R. Marusak, C. F. Meares and H. F. Noller, "Directed hydroxyl radical probing of 16S rRNA using Fe(II) tethered to ribosomal protein S4", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1995, 92, 1113.
13) G. M. Heilek and H. F. Noller, "Site-directed hydroxyl radical probing of the rRNA neighborhood of ribosomal protein S5", Science, 1996, 272, 1659.
14) K. R. Lieberman and H. F. Noller, "Ribosomal protein L15 as a probe of 50 S ribosomal subunit structure.", J. Mol. Biol., 1998, 284, 1367.

取扱条件

取扱条件
1.保存方法:冷凍, 2.吸湿注意
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生体高分子機能解析用試薬 BABE 

関連製品

日本同仁化学ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 

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ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence

ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • ミトコンドリア関連
  • 細胞内代謝
  • 細胞毒性

ADP/ATP比測定キット

  • 安定したADP/ATPの値が取得可能
  • 調液後、保存可能
  • 冷蔵保存(凍結融解不要)
  • 製品コード
    A552  ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
100 tests ¥50,000 346-09911

<使用回数の目安> 96-well plate 1枚

アプリケーションデータ追加してます!
アポトーシス誘導におけるADP/ATP比の変動
老化誘導におけるADP/ATP比の変動

キット内容
100 tests ・ATP Enzyme Solution
・ATP Substrate
・Assay Buffer
・ADP Enzyme Solution
・ADP Substrate
・ADP Dilution Buffer
20 ×l×1
×1
11 ml×1
25 ×l×1
×1
250 ×l×1

  • ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 
試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence  日本語
    ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 
  • 取扱説明書 ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence  英語
    ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 

技術情報

既存品との比較

他社既存品との比較を下記表にまとめます。

ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 

本キットは、既存品に比べATPとADPの総量に依存せず、比率を安定的に測定することが可能です。

ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 

よくある質問

Q

1キットあたり測定可能なサンプル数を教えて下さい。

A

サンプルの測定をn=3で行った場合、32サンプルの測定が可能です。96ウェルプレートのレイアウト例については、取扱説明書をご参照下さい。

Q

測定用のプレートは白色以外のプレートを使用できますか?

A

ブラックプレートや透明プレートを用いた場合、発光強度が下がります。また、透明プレートの場合はブランクが高くなります。よって、白色プレートを推奨致します。

Q

working solutionは保存できますか?

A

本キットには4種類のworking solutionがございます。ADP working solutionは保存できないため、用時調製して下さい。その他の3種類に関して、保存条件と保存可能期間は以下の通りです。

 

保存条件

保存期間

ATP working solution

冷凍(-20℃)

30日間

ADP Substrate working solution

冷蔵(0-5℃)

30日間

ADP Enzyme working solution

冷蔵(0-5℃)

30日間

ADP working solution

保存不可

保存不可

Q

細胞数の最適化の方法を教えて下さい。

A

段階希釈した細胞をプレートに播種し、目的実験と同様の条件で培養します。その後、本キットを用いて検量線(図1参照)を作成しその結果、直線性がある範囲であり、ADP/ATP 比率(図2参照)が一定となる細胞数範囲内で測定を行って下さい。下記の例の場合、細胞数範囲は2,000~4,000 cellsとなります。

ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 

ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence  ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 

取扱条件

取扱条件
1.保存方法:冷蔵, 2.吸湿注意
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ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 

関連製品

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  • ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 

    MT-1ミトコンドリア膜電位検出キット

    MT-1 MitoMP Detection Kit

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    トータルROS検出キット

    ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-

  • ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 

    グルコース測定キット

    Glucose Assay Kit-WST

  • ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 

    ATP測定キット

    ATP Assay Kit-Luminescence

日本同仁化学生化学用緩衝剤 ACES 

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生化学用緩衝剤 ACES ACES

13 生化学用緩衝剤

ACES

生化学用緩衝剤 ACES 

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB01  ACES
  • CAS番号
    7365-82-4
  • 化学名
    N-(2-Acetamido)-2-aminoethanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C4H10N2O4S=182.20
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
25 g ¥9,000 347-04882
100 g ¥28,000 349-04881
  • 生化学用緩衝剤 ACES 
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技術情報

溶解例

4.55 g/50 ml(水,加温)

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は何ですか?

A

-Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 ACES 

Q

ACESの調製方法を教えてください。

A

<試薬>
①0.1 mol/l ACES 溶液
 ACES 18.22 gを純水300~400 mlに完全に溶解した後、
 純水で全容1000 mlとする。

②0.1 mol/l NaOH溶液
 NaOH 4 gを純水200~300 mlに溶解した後、
 純水で全容1000 mlとする。

<pH調製>
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 ACES 

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

*プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか?

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。
 

生化学用緩衝剤 ACES  生化学用緩衝剤 ACES 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定): 99.0% 以上
水溶状: 試験適合 0.010 以下(300 nm)
乾燥減量(110℃): 0.50% 以下
強熱残分(硫酸塩): 0.10% 以下
重金属(Pbとして): 0.0005% 以下
鉄(Fe): 0.0005% 以下
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
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生化学用緩衝剤 ACES 

関連製品

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生体高分子機能解析用試薬 FeBABE FeBABE

03 分子生物学関連試薬
09 二価性試薬

FeBABE

生体高分子機能解析用試薬 FeBABE 

  • 分子生物学関連試薬
  • 二価性試薬

生体高分子機能解析用試薬

  • 製品コード
    F279  FeBABE
  • CAS番号
    186136-50-5
  • 化学名
    1-(p-Bromoacetamidobenzyl)ethylenediamine-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, iron(III)
  • 分子式・分子量
    C19H21BrFeN3O9=571.13
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 mg ¥16,600 345-08641
  • 生体高分子機能解析用試薬 FeBABE 
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技術情報

溶解例

緩衝溶液、DMSOに可溶

参考文献

参考文献を表示する

1) L. H. DeRiemer, C. F. Meares, D. A. Goodwin and C. I. Diamanti, "BLEDTA II: Synthesis of a New Tumer-Visualizing Derivative of Co(III)-bleomycin", J. Labelled Compd. Radiopharm., 1981, 18, 1517.
2) T. M. Rana and C. F. Meares, "Specific Cleavage of a Protein by an Attached Iron Chelate", J. Am. Chem. Soc., 1990, 112, 2457. 
3) T. M. Rana and C. F. Meares, "Transfer of Oxigen from an artificial protease to peptide carbon during proteolysis", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1991, 88, 10578. 
4) D. P. Greiner, R. Miyake, J. K. Moran, A. D. Jones, T. Negishi, A. Ishihama and C. F. Meares, "Synthesis of the Protein Cutting Reagent Iron (S)-1-(p-Bromoacetamidobenzyl)ethylebediaminetetraacetate and Conjuation to cysteine Sie Cahins", Bioconjugate Chem., 1997, 8, 44. 
5) E. Platis, M. R. Ermacora and R. O. Fox, "Oxidative Polypeptide Cleavage Mediated by EDTA-Fe Covalently Linked to Cysteine Residue", Biochemistry, 1993, 32, 12761.
6) S. L. Traviglia, S. A. Datwyler, D. Yan, A. Ishihama and C. F. Meares, "Targeted Protein Footprinting: Where Different Transcription Factors bind to RNA Polymerase", Biochemistry, 1999, 38, 4259.
7) J. B. Ghaim, D. P. Greiner, C. F. Meares and R. B. Gennis, "Proximity Mapping the suface of Membrane Protein Using an Artificial Protease: Demonstration That the Quinone-Binding Domain of Subunit I Is near the N-Terminal Region of Subunit II of Cytochrome bd", Biochemistry, 1995, 34, 11311.
8) R. Miyake, K. Murakami, J. T. Owens, D. P. Greiner, O. N. Ozoline, A. Ishihama and C. F. Meares, "Dimeric Association of Escherichia coli RNA Polymerase alfa subunits, studied by Cleavage of Single-Cysteine alfa Sununits Conjugated to Iron-(S)-1-(p-(Bromoacetamido)benzyl)ethylenediaminetetraacetate", Biochemistry, 1998, 37, 1344.
9) J. T. Owens, R. Miyake, K. Murakami, A. J. Chmura, N. Fujita, A. Ishihama and C. F. Meares, "Mapping the sigma70 subunits contact sites on Escherichia coli RNA polymerase with a sigma70-conjugated chemical protease", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1998, 95, 6021.
10) J. A. Bown, J. T. Owens, C. F. Meares, N. Fujita, A. Ishihama, S. J. Busby and S. D. Minchin, "Organization of open complexes at Escherichia coli promoters. Location of promoter DNA sites close to region 2.5 of the sigma70 subunit of RNA polymerase", J. Biol. Chem., 1999, 274, 2263.
11) F. Colland, N. Fujita, D. Kotlarz, J. A. Bown, C. F. Meares, A. Ishihama and A. Kolb, "Positioning of sigma(S), the stationary phase sigma factor, in Escherichia coli RNA polymerase-promoter open complexes", EMBO J., 1999, 18, 4049.
12) G. M. Heilek, R. Marusak, C. F. Meares and H. F. Noller, "Directed hydroxyl radical probing of 16S rRNA using Fe(II) tethered to ribosomal protein S4", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1995, 92, 1113.
13) G. M. Heilek and H. F. Noller, "Site-directed hydroxyl radical probing of the rRNA neighborhood of ribosomal protein S5", Science, 1996, 272, 1659.
14) K. R. Lieberman and H. F. Noller, "Ribosomal protein L15 as a probe of 50 S ribosomal subunit structure.", J. Mol. Biol., 1998, 284, 1367.

取扱条件

規格
性状: 本品は、黄褐色粉末である。
純度(HPLC): 95.0% 以上
水溶状: 試験適合
取扱条件
1.安衛法, 2.保存方法:冷凍, 3.吸湿注意
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生体高分子機能解析用試薬 FeBABE 

関連製品

日本同仁化学解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit Glycolysis/OXPHOS Assay Kit

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Glycolysis/OXPHOS Assay Kit

解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • ミトコンドリア関連
  • 細胞内代謝

解糖系/酸化的リン酸化測定キット

  • プレートリーダーを使用するため、高額な装置購入が不要
  • 必要試薬は全て入ったAll in Oneのキット形態
  • 実験操作の流れが解る詳細なプロトコル
  • 製品コード
    G270  Glycolysis/OXPHOS Assay Kit
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
50 tests ¥48,000 343-09921

<使用回数の目安>
使用回数は、行う実験の種類や検討方法によって異なります。
詳細は、よくある質問「1キットあたり測定可能なサンプル数を教えて下さい。」をご確認ください。

キット内容
50 tests ・Dye Mixture
・Lactate Standard
・LDH Solution
・Lactate Assay Buffer
・Reconstitution Buffer
・Substrate
・Luciferase Solution
・ATP Assay Buffer
・Oligomycin
・2-DG
×1
150 ×l×1
12 ×l×1
5.5 ml×1
550 ×l×1
×1
10 ×l×1
5.5 ml×1
×1
140 ×l×1

  • 解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 
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マニュアル

  • 取扱説明書 解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit  日本語
    解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 
  • 取扱説明書 解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit  英語
    解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 

技術情報

検出原理

本キットは、細胞内のアデノシン三リン酸(ATP)量をホタル・ルシフェラーゼ発光法で測定し、細胞外へ排出される乳酸量をWSTホルマザンを用いた吸光度測定法にて測定するキットです。解糖系と酸化的リン酸化それぞれに対する阻害剤を使用し得られる結果から、代謝経路を評価することが可能です。また、本キットではマイクロプレートを用いた測定が可能です。

解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 

よくある質問

Q

1キットあたり測定可能なサンプル数を教えて下さい。

A

 

サンプルの測定をそれぞれn=3で行った場合、下記表に記載のサンプル数を測定頂けます。

  50 tests
Lactate Assay ATP Assay
解糖能評価 代謝シフト評価 代謝経路依存性
評価
解糖能評価 代謝シフト評価 代謝経路依存性
評価
96 well プレート 48 well分   48 well分   48 well分 48 well分
測定可能なサンプル数
(n=3で行った場合)
6 サンプル   4 サンプル   8 サンプル 5 サンプル


※予備実験を行わない場合の最大測定可能サンプル数を記載しています。
※Lactate Assayを行う際、培地に血清を含む場合、バックグラウンドコントロールとして、使用した血清入り培地のみの測定試料を準備することをお勧めします。

 

  50 tests
Lactate Assay ATP Assay
解糖能評価 代謝シフト評価 代謝経路依存性
評価
解糖能評価 代謝シフト評価 代謝経路依存性
評価
96 well プレート 9 well分   9 well分   21 well分 9 well分
測定可能なサンプル数
(n=3で行った場合)
5 サンプル   4 サンプル   4 サンプル 4 サンプル


※予備実験を行った場合の最大測定可能サンプル数を記載しています。
※Lactate Assayを行う際、培地に血清を含む場合、バックグラウンドコントロールとして、使用した血清入り培地のみの測定試料を準備することをお勧めします。

 

 

解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 
解糖能評価(Lactate Assay)のプレートレイアウト例(n=3)
(左:予備実験無し、右:予備実験あり)

解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 

代謝シフト評価(ATP Assay)のプレートレイアウト例(n=3)
(左:予備実験無し、右:予備実験あり)

解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 

代謝経路依存性評価のプレートレイアウト例(n=3)
(左:ATP Assay、右:Lactate Assay)(予備実験なし)

解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 

代謝経路依存性評価のプレートレイアウト例(n=3)
(左:ATP Assay、右:Lactate Assay)(予備実験あり)

Q

解糖能の評価において、検出されたサンプルの吸光度の値が培地のみ(blank)の吸光度と変わりません。原因と解決策を教えて下さい。

A

原因として、細胞から放出される乳酸量が少ないことが考えられます。播種する細胞数を増やし、インキュベート時間をさらに延ばしてください(3時間⇒5時間)。

Q

それぞれの評価において、ノーマライズは必要になりますか。また、ノーマライズする場合の方法を教えて下さい。

A

Oligomycinおよび2-DG処理5時間では、タンパク量によるノーマライズ前後での結果はほとんど変わらないことを確認しております。ただし、細胞の刺激に使用する薬剤処理等により、細胞数やタンパク量に大きな変化が無いことを予め確認してから本キットでの評価を行って下さい。

解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 

タンパク量でノーマライズする場合は、以下に示す図を参照下さい。
※タンパク量でノーマライズする場合、ATP Assayに使用する試薬の組成上、ATP AssayやLactate Assayに用いた同一細胞サンプルでの評価ができません。そのため、タンパク定量用に別途細胞サンプルをご準備下さい。

解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 

Q

Lactate Assayは450 nm以外の吸収フィルターで測定できますか。

A

450 nm以外では、490 nmのフィルターでの使用が可能です。ただし、吸光度値は450 nmで測定した場合と比較し低くなります。

解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 

Q

還元物質を含むサンプルは測定できますか。

A

サンプル中に還元性を持つ物質が含まれていると、色素WSTが誤発色して正確なlactateの変化が測定できません。培地に、還元性を持つ薬剤等を添加して実験を行う場合、バックグラウンドコントロールとして「細胞を含まない培地+薬剤のみ」の試薬ブランクを一緒に測定して下さい。

Q

Working solutionはどのくらい安定ですか。

A

Working solutionは保存できません。用時調製して下さい。また、光に不安定であるため、調製後は遮光して下さい。遮光下室温で4時間安定です。

Q

発光シグナルはどの程度安定ですか。

A

発光シグナルは3時間安定です。ただし、温度と光が発光に影響しますので、すぐに測定できない場合は、遮光し温度を一定(25℃付近)に保てる場所で静置して下さい。

Q

測定用のプレートは白色以外のプレートを使用できますか。

A

測定はできますが、ブラックプレートや透明プレートを用いた場合、発光強度が下がります。また、透明プレートの場合、ブランクが高くなりますので、白色プレートを推奨しております。

解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit  解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 

取扱条件

取扱条件
1.保存方法:冷蔵,遮光
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解糖系/酸化的リン酸化測定キット Glycolysis/OXPHOS Assay Kit 

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日本同仁化学生化学用緩衝剤 ADA 

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生化学用緩衝剤 ADA ADA

13 生化学用緩衝剤

ADA

生化学用緩衝剤 ADA 

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB02  ADA
  • CAS番号
    26239-55-4
  • 化学名
    N-(2-Acetamido)iminodiacetic acid
  • 分子式・分子量
    C6H10N2O5=190.15
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
25 g ¥4,400 346-04732
100 g ¥9,600 348-04731
  • 生化学用緩衝剤 ADA 
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技術情報

溶解例

9.51 g/50 ml [30 ml(2 mol/l-NaOH) + 水]

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は?

A

Q: Good's Buffersの特長は何ですか?

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 ADA 

Q

ADAの調製方法を教えてください。

A

<試薬>
①0.1 mol/l ADA 溶液
 ADA 19.016 g とNaOH 4 g を純水300~400 mlに完全に溶解した後、 純水で全容を1000 mlとする。
 *ADAは水に難溶のためモノナトリウム塩溶液として調製する。

②0.1 mol/l NaOH溶液
 NaOH 4 gを純水200~300 mlに溶解した後、純水で全容1000 mlとする。

<pH調製>
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 ADA 

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

*プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか?

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。
 

生化学用緩衝剤 ADA  生化学用緩衝剤 ADA 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色結晶性粉末でアルカリに溶ける。
純度(滴定): 99.0% 以上
アルカリ溶状: 試験適合 0.080 以下(300 nm)
乾燥減量(110℃): 0.50% 以下
強熱残分(硫酸塩): 0.10% 以下
重金属(Pbとして): 0.0005% 以下
鉄(Fe): 0.0005% 以下
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
1.化審法
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生化学用緩衝剤 ADA 

関連製品

日本同仁化学β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 

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β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal SPiDER-βGal

03 分子生物学関連試薬

SPiDER-βGal

β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 

  • 分子生物学関連試薬
  • 細胞機能解析
  • 細胞老化

β-galactosidaseの検出試薬

  • 製品コード
    SG02  SPiDER-βGal
  • CAS番号
    1824699-57-1
  • 化学名
    (2S,3R,4S,5R,6R)-2-{[3′-(Diethylamino)-5′-(fluoromethyl)-3H-spiro(isobenzofuran-1,9′-xanthen)-6′-yl]oxy}-6-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-3,4,5-triol
  • 分子式・分子量
    C31H34FNO8=567.60
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
20 μg x 3 ¥44,600 343-09161
  • β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 
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マニュアル

  • 取扱説明書 β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal  日本語
    β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 
  • 取扱説明書 β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal  English
    β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 
  • アプリケーション β-ガラクトシダーゼ検出試薬(基質)の選択ガイド – 発生学 –
    β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 
  • 試薬選択ガイド β-ガラクトシダーゼ検出試薬(基質)の選択ガイド
    β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 
  • 試薬選択ガイド β-ガラクトシダーゼ検出試薬の比較データ
    β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 

技術情報

原理

β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 

図1 SPiDER-βGalの細胞染色原理
SPiDER-βGal は生細胞膜を透過した後、細胞中のβ-galactosidaseによる酵素反応を受け、その中間体はタンパク質中の求核性基と共有結合を形成することで細胞内に滞留する。
 

参考文献

参考文献を表示する

1) T. Doura, M. Kamiya, F. Obata, Y. Yamaguchi, T. Y. Hiyama, T. Matsuda, A. Fukamizu, M. Noda, M. Miura, Y. Urano, "Detection of LacZ-Positive Cells in Living Tissue with Single-Cell Resolution.", Angew Chem Int Ed Engl., 2016, doi: 10.1002/anie.201603328
2) H. Omori, S. Ogaki, D. Sakano, M. Sato, K. Umeda, N. Takeda, N. Nakagata, S. Kume, "Changes in expression of C2cd4c in pancreatic endocrine cells during pancreatic development.", FEBS Lett., 2016, doi: 10.1002/1873-3468.12271
3) Y. Nakamura, A. Mochida, T. Nagaya, S. Okuyama, F. Ogata, P. L. Choyke, H. Kobayashi, "A topically-sprayable, activatable fluorescent and retaining probe, SPiDER-βGal for detecting cancer; Advantages of anchoring to cellular proteins after activation ", Oncotarget., 2017, doi: 10.18632/oncotarget.17080.
4) S. Lu, S. Liu, A. Wietelmann, B. Kojonazarov, A. Atzberger, C. Tang, R. T. Schermuly, H. J. Gröne, S. Offermanns, "Developmental vascular remodeling defects and postnatal kidney failure in mice lacking Gpr116 (Adgrf5) and Eltd1 (Adgrl4)", PLoS ONE., 2017, 10.1371/journal.pone.0183166.
5) T. Sugizaki, S. Zhu, G. Guo, A. Matsumoto, J. Zhao, M. Endo, H. Horiguchi, J. Morinaga, Z. Tian, T. Kadomatsu, K. Miyata, H. Itoh & Y. Oike, "Treatment of diabetic mice with the SGLT2 inhibitor TA-1887 antagonizes diabetic cachexia and decreases mortality", NPJ Aging Mech Dis., 2017, DOI:10.1038/s41514-017-0012-0.
6) Y. Nakatani, H. Kiyonari and T. Kondo , "Ecrg4 deficiency results in extended replicative capacity of neural stem cells in a Foxg1-dependent manner", Development., 2019,doi: 10.1242/dev.168120 .
7) A. A.Tokmakov AA and K. I. Sato , "Activity and intracellular localization of senescence-associated β-galactosidase in aging Xenopus oocytes and eggs.", Exp. Gerontol.., 2019, 119, 157.
8) Y. Han, T. Bedarida, Ye Ding, Q. Wang, P. Song, and M. H. Zou, β-Hydroxybutyrate Prevents Vascular Senescence through hnRNP A1-Mediated Upregulation of Oct4', Molecular Cell., 2019, 71, 1064–1078.9) A. J. Barinda, K. Ikeda, D. B. Nugroho, D. A. Wardhana, N. Sasaki, S. Honda, R. Urata, S. Matoba, K. Hirata and N. Emoto, Endothelial progeria induces adipose tissue senescence and impairs insulin sensitivity through senescence associated secretory phenotype', Nat. Commun. ., 2020, 11, 481.
9) A. J. Barinda, K. Ikeda, D. B. Nugroho, D. A. Wardhana, N. Sasaki, S. Honda, R. Urata, S. Matoba, K. Hirata and N. Emoto, Endothelial progeria induces adipose tissue senescence and impairs insulin sensitivity through senescence associated secretory phenotype', Nat. Commun. ., 2020, 11, 481.
10) Y. Saito, T. Chikenji, T. Matsumura, M. Nakano and M. Fujimiya, "Exercise enhances skeletal muscle regeneration by promoting senescence in fibro-adipogenic progenitors", Nat. Commun., 2020, doi:10.1038/s41467-020-14734-x.
11) M. Suda, I. Shimizu, G. Katsuumi, Y. Yoshida, Y. Hayashi, R. Ikegami, N. Matsumoto, Y. Yoshida, R. Mikawa, A. Katayama, J. Wada, M. Seki, Y. Suzuki, A. Iwama, H. Nakagami, A. Nagasawa, R. Morishita, M. Sugimoto, S. Okuda, M. Tsuchida, K. Ozaki, M. Nakanishi-Matsui and T. Minamino, "Senolytic vaccination improves normal and pathological age-related phenotypes and increases lifespan in progeroid mice", Nature Aging, 2021, doi:10.1038/s43587-021-00151-2.

よくある質問

Q

既存法に対する利点を教えてください。また、既存法との相関性はありますか?

A

①生細胞に適用できます。同様に生細胞に適用できるGFP融合タンパク質発現細胞を用いて相関性があることを確認しました。
②GFP法と比べて固定化後も蛍光観察ができます。
③既存の低分子β-ガラクトシダーゼ蛍光検出試薬と比較して、「細胞膜透過性」及び「細胞内滞留性」が優れるため、β-ガラクトシダーゼ発現細胞のみを一細胞レベルで染色できます。

Q

Working solutionは、Hanks’ HEPES以外でも調製できますか?

A

PBS, HBSSなどが使用できます。

Q

Working solutionは、どのくらい安定ですか?

A

保存できません。調整した日のうちに使用してください。

Q

フローサイトメーターで使用可能ですか?

A

使用できます。β-ガラクトシダーゼ発現および未発現のHEK細胞の混合試料をフローサイトメーターで測定して、測り分けすることができました。取扱説明書に手順と条件を記載しています。

Q

固定後、試料の染色はできますか?

A

可能です。 4%パラホルムアルデヒドやメタノールで固定化しても蛍光観察ができます。固定化によりβ-ガラクトシダーゼ活性は低下しますので、固定化条件の検討を行ってください。

Q

推奨フィルターを教えてください。

A

以下のフィルターを推奨します。
・蛍光顕微鏡: 励起(500-540 nm), 蛍光(500-540 nm)
・フローサイトメーター: 励起(488 nm), 蛍光(500-540 nm)

取扱説明書の「励起/蛍光スペクトル」及び「上記フィルターを用いた蛍光顕微鏡測定例」もご参考ください。

Q

染色後、試料の固定はできますか?

A

可能です。 4%パラホルムアルデヒドやメタノールで固定化しても蛍光観察ができます。

Q

組織染色は可能ですか?

A

可能です。細胞染色と比べてWorking solution濃度を高くして染色条件をご検討ください(10-20 μmol/Lを目安)。組織染色用プロトコルをご用意しています。

β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal  β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 

取扱条件

規格
性状: 本品は赤色~赤紫色固体でアセトニトリル及びジメチルスルホキシドに溶ける。
純度(HPLC): 85.0% 以上
NMRスペクトル: 試験適合
蛍光スペクトル: 試験適合
取扱条件
1.保存方法:冷蔵
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β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 

関連製品

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  • β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 

    老化細胞検出キット

    Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal

  • β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 

    オートファジー(オートリソソーム)の検出試薬

    DALGreen – Autophagy Detection

  • β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 

    マイトファジー検出キット

    Mitophagy Detection Kit

  • β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal 

    細胞毒性測定キット

    Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST

日本同仁化学ストレスマーカー検出試薬 ARP(Aldehyde Reactive Probe) 

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ストレスマーカー検出試薬 ARP(Aldehyde Reactive Probe) ARP(Aldehyde Reactive Probe)

02 酸化ストレス関連試薬

ARP(Aldehyde Reactive Probe)

ストレスマーカー検出試薬 ARP(Aldehyde Reactive Probe) 

  • 酸化ストレス関連試薬

ストレスマーカー検出試薬

  • 製品コード
    A305  ARP(Aldehyde Reactive Probe)
  • CAS番号
    139585-03-8
  • 化学名
    N-(Aminooxyacetyl)-N’-biotinylhydrazine
  • 分子式・分子量
    C12H21N5O4S=331.39
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
10 mg ¥23,200 340-07611
  • ストレスマーカー検出試薬 ARP(Aldehyde Reactive Probe) 
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技術情報

注意事項

・本製品を粉末の状態で取り出し使用する場合、性状の性質上、静電気等の要因で容器内に付着し、取り出しにくい場合があります。
・容器内に付着し、取り出せなかった粉末に関しては、使用する溶媒を容器に入れ、溶かし出して使用してください。

参考文献

参考文献を表示する

参考文献

1) R. Rago, J. Mitchen and G. Wilding, "DNA Fluorometric Assay in 96-well Tissue Culture Plates Using Hoechst 33258 after Cell Lysis by Freezing in Distilled Water", Anal. Biochem., 1990, 191, 31. 
2) K. Kubo, H. Ide, S. S. Wallace and Y. W. Kow, "A Novel, Sensitive, and Specific Assay for Abasic Sites, The Most Commonly Produced DNA Lesion", Biochemistry, 1992, 31, 3703.
3) H. Ide, K. Akamatsu, Y. Kimura, K. Michiue, K. Makino, A. Asaeda, Y. Takamori and K. Kubo, "Synthesis and Damage Specificity of a Novel Probe for the Detection of Abasic Sites in DNA", Biochemistry, 1993, 32, 8276. 
4) M. Yao and Y. W. Kow, "Strand-specific Cleavage of Mismatch-containig DNA by Deoxyinosine 3'-Endonuclease from Escherichia coli", J. Biol. Chem., 1994, 269, 31390. 
5) 岡村忠, "光によるDNAの損傷とその修復", 化学, 1994, 49, 425. 
6) 大塚栄子, "遺伝子の損傷ががんの引き金にDNAの変異と修復のメカニズムを探る", 化学, 1994, 49, 394. 
7) T. Shida, M. Noda and J. Sekiguchi, "The recognition of DNA containning AP-site by E. coli endonuclease IV(exonuclease)", Nucleic Acids Symposium Series, 1995, 34, 87. 
8) H. B. Sun, L. Qian and H. Yokota, "Detection of abasic sites on individual DNA molecules using atomic force microscopy", Anal. Chem., 2001, 73, 2229.
9) J. Nakamura, J. A. Swenberg, "Endogenous Apurinic/apyrimidinic Sites in Genomic DNA of Mammalian Tissues", Cancer Res., 1999, 59, 2522.
10) Y. W. Kow and A. Dare, "Detection of Abasic Sites and Oxidative DNA Base Damage using an ELISA-like Assay", METHODS, 2000, 22, 164.
11) L. Yan, A. Bulgar, Y. Miao, V. Mahajan, J. R. Donze, S. L. Gerson and L. Liu, "Combined Treatment with Temozolomide and Methoxyamine: Blocking Apurininc/Pyrimidinic Site Repair Coupled with Targeting Topoisomerase II", Clin. Cancer Res., 2007, 13, 1532.
12) P. D. Chastain, II, J. Nakamura, J. Swenberg and D. Kaufman, "Nonrandom AP site distribution in highly proliferative cells", FASEB J., 2006, 20(14), 2612.

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色粉末で水に溶ける。
純度(HPLC): 95.0% 以上
水溶状: 試験適合
IRスペクトル: 試験適合
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件
1.保存方法:冷凍
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ストレスマーカー検出試薬 ARP(Aldehyde Reactive Probe) 

関連製品

日本同仁化学生化学用緩衝剤 BES 

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生化学用緩衝剤 BES BES

13 生化学用緩衝剤

BES

生化学用緩衝剤 BES 

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB03  BES
  • CAS番号
    10191-18-1
  • 化学名
    N,N-Bis(2-hydroxyethyl)-2-aminoethanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C6H15NO5S=213.25
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
25 g ¥3,800 341-00262
100 g ¥9,400 347-00264
500 g ¥37,000 345-00265
  • 生化学用緩衝剤 BES 
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技術情報

溶解例

10.66 g /50 ml(水)

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は?

A

-Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 BES 

Q

BESの調製方法を教えてください。

A

<試薬>
①0.1 mol/l BES 溶液
 BES 21.325 gを純水300~400 mlに完全に溶解した後、
 純水で全容1000 mlとする。

②0.1 mol/l NaOH溶液
 NaOH 4 gを純水200~300 mlに溶解した後、
 純水で全容1000 mlとする。

<pH調製>
①液25 mlに②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 BES 

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

*プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか?

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 BES  生化学用緩衝剤 BES 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定): 99.0% 以上
水溶状: 試験適合 0.025 以下(300 nm)
乾燥減量(80℃): 0.30% 以下
強熱残分(硫酸塩): 0.10% 以下
重金属(Pbとして): 0.0005% 以下
鉄(Fe): 0.0005% 以下
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
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生化学用緩衝剤 BES 

関連製品

日本同仁化学生化学用緩衝剤 HEPES 分子生物学用 

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生化学用緩衝剤 HEPES 分子生物学用 HEPES 分子生物学用

03 分子生物学関連試薬
13 生化学用緩衝剤

HEPES 分子生物学用

生化学用緩衝剤 HEPES 分子生物学用 

  • 分子生物学関連試薬
  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB70  HEPES 分子生物学用
  • CAS番号
    7365-45-9
  • 化学名
    2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C8H18N2O4S=238.31
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
20 g ¥2,600 340-08233
100 g ¥10,200 344-08231
500 g ¥36,600 346-08235
  • 生化学用緩衝剤 HEPES 分子生物学用 
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技術情報

溶解例

11.92 g/50 ml(水)

よくある質問

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか?

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 HEPES 分子生物学用  生化学用緩衝剤 HEPES 分子生物学用 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定): 99.7% 以上
水溶状: 試験適合 0.025 以下(320 nm)
乾燥減量(110℃): 0.20% 以下
強熱残分(硫酸塩): 0.10% 以下
重金属(Pbとして): 0.0005% 以下
鉄(Fe): 0.0005% 以下
RNase: 不検出
DNase: 不検出
エンドトキシン: 試験適合
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
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生化学用緩衝剤 HEPES 分子生物学用 

関連製品

日本同仁化学DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine polyclonal antibody 

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DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine polyclonal antibody Anti-Nitroguanosine polyclonal antibody

02 酸化ストレス関連試薬

Anti-Nitroguanosine polyclonal antibody

  • 酸化ストレス関連試薬

DNAダメージ検出抗体

  • 製品コード
    AB01  Anti-Nitroguanosine polyclonal antibody
  • 化学名
    Polyclonal anti-nitroguanosine antibody
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
50 μg ¥60,200 348-90681
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マニュアル

  • プロトコル DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine polyclonal antibody  ニトログアノシンを検出したい
    DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine polyclonal antibody 

技術情報

検出例

DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine polyclonal antibody   DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine polyclonal antibody 

インフルエンザウイルス感染マウスの肺上皮組織切片と蛍光(Vector Red)標識抗マウス抗体によって
免疫組織染色した画像。(熊本大学医学部微生物学教室 赤池孝章教授ご提供)

下図はプレートに固相化したNO2-Guanosine結合BSAと各種の物質に対する、本抗体の反応を競合法ELISAで検定したものである。本抗体が反応する物質は濃度に依存した右下がりの曲線を与え抗体が反応していることを示している。抗体が反応しない物質に対しては、競合物質の濃度に関係なく抗体は固相化したNO2-Guanosine結合BSAに反応するためほぼ一定の値を示す。

ポリクローナル抗体の反応性(IC50
・強く反応する(1 μmol/L)
8-NO2-guanosine, 8-NO2-guanine
・交差反応なし
guanosine, guanine, 8-OH-guanine, 3- NO2-tyrosine

使用濃度
ELISA (5 μg/mL)、免疫組織染色(10 μg/mL)

動物種
ウサギ(日本白色種)

DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine polyclonal antibody 

参考文献

参考文献を表示する

1) T. Akaike, S. Okamoto, T. Sawa, J. Yoshitake, F. Tamura, K. Ichimori, K. Miyazaki, K. Sasamoto and H. Maeda, "8-nitroguanosine formation in viral pneumonia and its implication for pathogenesis", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2003, 100, 685.
2) J. Yoshitake, T. Akaike, T. Akuta, F. Tamura, T. Ogura, H. Esumi and H. Maeda, "Nitric oxide as an endogenous mutagen for Sendai virus without antiviral activity", J. Virol., 2004, 78, 8709.
3) T. Sawa, M. H. Zaki, T. Okamoto, T. Akuta, Y. Tokutomi, S. Kim-Mitsuyama, H. Ihara, A. Kobayashi, M. Yamamoto, S. Fujii, H. Arimoto and T. Akaike, "Protein S-guanylation by the biological signal 8-nitroguanosine 3',5'-cyclic monophosphate", Nat. Chem. Biol., 2007, 3, 727.
4) M. H. Zaki, S. Fujii, T. Okamoto, S. Islam, S. Khan, K. A. Ahmed, T. Sawa and T. Akaike, "Cytoprotective function of heme oxygenase 1 induced by a nitrated cyclic nucleotide formed during murine salmonellosis", J. Immunol., 2009, 182, 3746.
5) Y. Terasaki, T. Akuta, M. Terasaki, T. Sawa, T. Mori, T. Okamoto, M. Ozaki, M. Takeya and T. Akaike, "Guanine nitration in idiopathic pulmonary fibrosis and its implication for carcinogenesis", Am. J. Respir. Crit. Care. Med., 2006, 174, 665.
6) T. Sawa, M. Tatemichi, T. Akaike, A. Barbin and H. Ohshima, "Analysis of urinary 8-nitroguanine, a marker of nitrative nucleic acid damage, by high-performance liquid chromatography-electrochemical detection coupled with immunoaffinity purification: association with cigarette smoking", Free Radic. Biol. Med., 2006, 40, 711.
7) K. A. Ahmed, T. Sawa and T. Akaike, "Protein cysteine S-guanylation and electrophilic signal transduction by endogeneous nitro-nucleotides", Amino Acids, 2011, 41(1), 123.
8) T. Sawa, H. Arimoto and T. Akaike, "Regulation of redox signaling involving chemical conjugation of protein thiols by nitric oxide and electrophiles", Bioconjugate Chem., 2010, 21(7), 1121.

よくある質問

Q

ニトログアノシンは酸化ストレスの指標として使用されますが、ニトログアノシンの他に酸化ストレスマーカーとなるものはありますか?

A

酸化ストレスマーカーについてまとめた資料を作成しております。
カスタマーサポートの視点から、各酸化ストレスマーカーの特徴・測定サンプルの前処理方法などを記載しておりますので、ご参照ください。

下記URLよりダウンロード可能です。

「はじめての酸化ストレスマーカー測定プロトコル~カスタマーサポートの視点から~」

Q

この抗体を用いることで何がわかりますか?

A

8-Nitroguanosineは、一酸化窒素(NO)と活性酸素(スーパーオキサイドアニオンラジカル)によって生じる過酸化亜硝酸(パーオキシナイトライト)によってRNAがニトロ化された核酸です。
生体組織が炎症を起こすと多量のNOが産生され、多くの過酸化亜硝酸が生じて、グアノシン,デオキシグアノシンをニトロ化することが知られております。
8-Nitroguanosineの局在や量などを調べることにより、8-Nitroguanosine残基の役割や遺伝子傷害、発癌機構の解明に役立つことが期待されます。

*ポリクローナル抗体で染色された場合、次のような確認を行なうことをお勧めします。
1.標準の8-Nitroguanineと競合させて染色されなくなること
2.Sodium hydrosulfiteなどの還元剤で試料中のニトログアノシン、ニトログアニンをアミノグアノシン、アミノグアニンに還元して染色されなくなること

Q

抗ニトログアノシン抗体はどのくらい保存できますか?

A

有効期間は設けておりませんが、希釈前の段階で冷蔵で1年使用できることを確認しております。

凍結・融解の繰り返しは劣化を早めますので、一旦解凍後は冷蔵にて保管してください。

また、希釈されますと吸着などもあり、期間の保証は出来ません。

DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine polyclonal antibody  DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine polyclonal antibody 

取扱条件

規格
性状: 本品は、無色~淡黄色微濁液体である。
力値: 試験適合
取扱条件
1.保存方法:冷凍
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DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine polyclonal antibody 

関連製品

日本同仁化学生化学用緩衝剤 Bicine 

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生化学用緩衝剤 Bicine Bicine

13 生化学用緩衝剤
14 キレート試薬

Bicine

生化学用緩衝剤 Bicine 

  • 生化学用緩衝剤
  • キレート試薬

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB04  Bicine
  • CAS番号
    150-25-4
  • 化学名
    N,N-Bis(2-hydroxyethyl)glycine
  • 分子式・分子量
    C6H13NO4=163.17
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
25 g ¥3,600 347-03282
100 g ¥8,000 343-03284
  • 生化学用緩衝剤 Bicine 
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技術情報

溶解例

8.16 g/50 ml(水)

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は?

A

-Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 Bicine 

Q

Bicineの調製方法を教えてください。

A

<試薬>
①0.1 mol/l Bicine 溶液
 Bicine 16.317 gを純水300~400 mlに完全に溶解した後、
 純水で全容1000 mlとする。

②0.1 mol/l NaOH溶液
 NaOH 4 gを純水200~300 mlに溶解した後、
 純水で全容1000 mlとする。

<pH調製>
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 Bicine 

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

*プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

 

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか?

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 Bicine  生化学用緩衝剤 Bicine 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定): 99.0% 以上
水溶状: 試験適合 0.025 以下(300 nm)
乾燥減量(110℃): 0.30% 以下
強熱残分(硫酸塩): 0.10% 以下
重金属(Pbとして): 0.0005% 以下
鉄(Fe): 0.0005% 以下
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
1.安衛法
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生化学用緩衝剤 Bicine 

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日本同仁化学生化学用緩衝剤 MOPS 分子生物学用 

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

生化学用緩衝剤 MOPS 分子生物学用 MOPS 分子生物学用

03 分子生物学関連試薬
13 生化学用緩衝剤

MOPS 分子生物学用

生化学用緩衝剤 MOPS 分子生物学用 

  • 分子生物学関連試薬
  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB71  MOPS 分子生物学用
  • CAS番号
    1132-61-2
  • 化学名
    3-Morpholinopropanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C7H15NO4S=209.26
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
20 g ¥3,000 347-08243
100 g ¥10,200 341-08241
500 g ¥37,000 343-08245
  • 生化学用緩衝剤 MOPS 分子生物学用 
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技術情報

溶解例

10.46 g/50 ml(水)

よくある質問

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか?

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 MOPS 分子生物学用  生化学用緩衝剤 MOPS 分子生物学用 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定): 99.5% 以上
水溶状: 試験適合 0.020 以下(300 nm)
乾燥減量(110℃): 0.30% 以下
強熱残分(硫酸塩): 0.10% 以下
重金属(Pbとして): 0.0005% 以下
鉄(Fe): 0.0005% 以下
RNase: 不検出
DNase: 不検出
エンドトキシン: 試験適合
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
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生化学用緩衝剤 MOPS 分子生物学用 

関連製品

日本同仁化学DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52) 

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52) Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52)

02 酸化ストレス関連試薬

Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52)

  • 酸化ストレス関連試薬

DNAダメージ検出抗体

  • 製品コード
    AB02  Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52)
  • 化学名
    Monoclonal anti-nitroguanosine antibody
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
50 μg ¥71,200 341-90671
試験成績書

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マニュアル

  • プロトコル DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52)  ニトログアノシンを検出したい
    DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52) 

技術情報

検出例

DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52) 

使用濃度
ELISA(1 μg/mL)、免疫染色組織(10 μg/mL)

DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52) 

図1.モノクローナル抗体NO2G52の反応性
プレートに固相化したNO2-Guanosine結合BSAと各種の物質に対する、本抗体の反応を
競合法ELISAで検定したものである。本抗体が反応する物質は濃度に依存した右下がりの
曲線を与え抗体が反応していることを示している。
モノクローナル抗体は、8位がニトロ化されたものを幅広く認識し、正常なヌクレオシド
や核酸塩基には反応しない。抜群の特異性と高力価を有している。

             <無刺激>                    LPS+INF-γ刺激                 L-NMMA投与

DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52)  DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52)  DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52) 

図2. RAW264.7細胞(murine macrophage cell line)における内因性のグアニンのニトロ化
蛍光標識したAnti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52)にて検出。
(データ提供:熊本大学医学部 教授 赤池孝章先生)

DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52) 

参考文献

参考文献を表示する

1) T. Akaike, S. Okamoto, T. Sawa, J. Yoshitake, F. Tamura, K. Ichimori, K. Miyazaki, K. Sasamoto and H. Maeda, "8-nitroguanosine formation in viral pneumonia and its implication for pathogenesis", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2003, 100, 685.
2) J. Yoshitake, T. Akaike, T. Akuta, F. Tamura, T. Ogura, H. Esumi and H. Maeda, "Nitric oxide as an endogenous mutagen for Sendai virus without antiviral activity", J. Virol., 2004, 78, 8709.
3) T. Sawa, M. H. Zaki, T. Okamoto, T. Akuta, Y. Tokutomi, S. Kim-Mitsuyama, H. Ihara, A. Kobayashi, M. Yamamoto, S. Fujii, H. Arimoto and T. Akaike, "Protein S-guanylation by the biological signal 8-nitroguanosine 3',5'-cyclic monophosphate", Nat. Chem. Biol., 2007, 3, 727.
4) M. H. Zaki, S. Fujii, T. Okamoto, S. Islam, S. Khan, K. A. Ahmed, T. Sawa and T. Akaike, "Cytoprotective function of heme oxygenase 1 induced by a nitrated cyclic nucleotide formed during murine salmonellosis", J. Immunol., 2009, 182, 3746.
5) Y. Terasaki, T. Akuta, M. Terasaki, T. Sawa, T. Mori, T. Okamoto, M. Ozaki, M. Takeya and T. Akaike, "Guanine nitration in idiopathic pulmonary fibrosis and its implication for carcinogenesis", Am. J. Respir. Crit. Care. Med., 2006, 174, 665.
6) T. Sawa, M. Tatemichi, T. Akaike, A. Barbin and H. Ohshima, " Analysis of urinary 8-nitroguanine, a marker of nitrative nucleic acid damage, by high-performance liquid chromatography-electrochemical detection coupled with immunoaffinity purification: association with cigarette smoking", Free Radic. Biol. Med., 2006, 40, 711.
7) M. Feelisch, "Nitrated cyclic GMP as a new cellular signal", Nat. Chem. Biol., 2007, 3, 687.
8) K. A. Ahmed, T. Sawa and T. Akaike, "Protein cysteine S-guanylation and electrophilic signal transduction by endogeneous nitro-nucleotides", Amino Acids, 2011, 41(1), 123
9) T. Sawa, H. Arimoto and T. Akaike, "Regulation of redox signaling involving chemical conjugation of protein thiols by nitric oxide and electrophiles", Bioconjugate Chem., 201021(7), 1121

よくある質問

Q

ニトログアノシンは酸化ストレスの指標として使用されますが、 ニトログアノシンの他に酸化ストレスマーカーとなるものはありますか?

A

酸化ストレスマーカーについてまとめた資料を作成しております。
カスタマーサポートの視点から、各酸化ストレスマーカーの特徴・測定サンプルの前処理方法などを記載しておりますので、ご参照ください。

下記URLよりダウンロード可能です。

「はじめての酸化ストレスマーカー測定プロトコル~カスタマーサポートの視点から~」

Q

この抗体を用いることで何がわかりますか?

A

8-Nitroguanosineは、一酸化窒素(NO)と活性酸素(スーパーオキサイドアニオンラジカル)によって生じる過酸化亜硝酸(パーオキシナイトライト)によってRNAがニトロ化された核酸です。
生体組織が炎症を起こすと多量のNOが産生され、多くの過酸化亜硝酸が生じて、グアノシン,デオキシグアノシンをニトロ化することが知られております。
8-Nitroguanosineの局在や量などを調べることにより、8-Nitroguanosine残基の役割や遺伝子傷害、発癌機構の解明に役立つことが期待されます。

*ポリクローナル抗体で染色された場合、次のような確認を行なうことをお勧めします。
1.標準の8-Nitroguanineと競合させて染色されなくなること
2.Sodium hydrosulfiteなどの還元剤で試料中のニトログアノシン、ニトログアニンをアミノグアノシン、アミノグアニンに還元して染色されなくなること

Q

抗ニトログアノシン抗体はどのくらい保存できますか?

A

有効期間は設けておりませんが、希釈前の段階で冷蔵で1年
使用できることを確認しております。

凍結・融解の繰り返しは劣化を早めますので、一旦解凍後は冷蔵にて保管してください。

また、希釈されますと吸着などもあり、期間の保証は出来ません。

DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52)  DNAダメージ検出抗体 Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52) 

取扱条件

規格
性状: 本品は、無色~淡黄色微濁液体である。
力値: 試験適合
取扱条件
1.保存方法:冷凍
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日本同仁化学生化学用緩衝剤 Bis-Tris 

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生化学用緩衝剤 Bis-Tris Bis-Tris

13 生化学用緩衝剤

Bis-Tris

生化学用緩衝剤 Bis-Tris 

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB05  Bis-Tris
  • CAS番号
    6976-37-0
  • 化学名
    Bis(2-hydroxyethyl)iminotris(hydroxymethyl)methane
  • 分子式・分子量
    C8H19NO5=209.24
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
25 g ¥5,600 343-04742
100 g ¥15,800 345-04741
  • 生化学用緩衝剤 Bis-Tris 
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技術情報

溶解例

10.46 g/50 ml(水)

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は?

A

-Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 Bis-Tris 

 

Q

Bis-Trisの調製方法を教えてください。

A

<試薬>
①0.1mol/l Bis-Tris 溶液
 Bis-Tris 5.231 gを純水150~200 mlに完全に溶解した後、
 純水で全容250 mlとする。

②0.1mol/l HCl溶液
 塩酸 2.25 ml(0.9115 g HCl)を純水100 ml程度に溶解した後、
 純水で全容250 mlとする。

<pH調製>
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 Bis-Tris 

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。

*プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

 

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか?

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 Bis-Tris  生化学用緩衝剤 Bis-Tris 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定): 99.0% 以上
水溶状: 試験適合 0.040 以下(300 nm)
乾燥減量(80℃): 0.20% 以下
強熱残分(硫酸塩): 0.10% 以下
重金属(Pbとして): 0.0005% 以下
鉄(Fe): 0.0005% 以下
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
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日本同仁化学ストレスマーカー検出試薬 DPPP 

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ストレスマーカー検出試薬 DPPP DPPP

02 酸化ストレス関連試薬

DPPP

ストレスマーカー検出試薬 DPPP 

  • 酸化ストレス関連試薬

ストレスマーカー検出試薬

  • 製品コード
    D350  DPPP
  • CAS番号
    110231-30-6
  • 化学名
    Diphenyl-1-pyrenylphosphine
  • 分子式・分子量
    C28H19P=386.42
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
10 mg ¥15,200 340-07471
  • ストレスマーカー検出試薬 DPPP 
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技術情報

注意事項

・本製品を粉末の状態で取り出し使用する場合、性状の性質上、静電気等の要因で容器内に付着し、取り出しにくい場合があります。
・容器内に付着し、取り出せなかった粉末に関しては、使用する溶媒を容器に入れ、溶かし出して使用してください。

参考文献

参考文献を表示する

1) K. Akasaka, T. Suzuki, H. Ohrui and H. Meguro, "Study on Aromatic Phosphines for Novel Fluorometry of Hydroperoxides(II) – the Determination of Lipid Hydroperoxides with Diphenyl-1-Pyrenylphosphine -", Anal. Lett., 1987, 20, 797. 
2) K. Akasaka, H. Ohrui and H. Meguro, "An Aromatic Phosphine Reagent for the HPLC-fluorescence Determination of Hydroperoxides -Determination of Phosphatidylcholine Hydroperoxides in Human Plasma-", Anal. Lett., 1988, 21, 965.
3) K. Akasaka, I. Sasaki, H. Ohrui and H. Meguro, "A Simple Fluorometry of Hydroperoxides in Oils and Foods", Biosci. Biotech. Biochem., 1992, 56, 605. 
4) K. Akasaka, S. Ijichi, K. Watanabe, H. Ohrui and H. Meguro, "High-performance Liquid Chromatography and Post-Column Derivatization with Diphenyl-1-Pyrenylphosphine for Fluorimetric Determination of Triacylglycerol Hydroperoxides", J. Chromatogr., 1992, 596, 197. 
5) K. Akasaka, H. Ohrui and H. Meguro, "Simultaneous Determination of Hydroperoxides of Phosphatidylcholine, Cholesterol Esters and Triacylglycerols by Column-Switching High-Performance Liquid Chromatography with a Post-column Detection system", J. Chromatogr., 1993, 622, 153. 
6) K. Akasaka, H. Ohrui and H. Meguro, "Normal-phase High-performance Liquid Chromatograohy with a Fluorimetric Postcolumn Detection System for Lipid Hydroperoxides", J. Chromatogr., 1993, 628, 31. 
7) Y. Okamoto, A Watanabe, E. Niki, T. Yamashita and N. Noguchi, "A Novel Fluoresceint Probe Diphenyl-pyrenylphosphine to Follow Lipid Peroxidation in Cell Membranes", FEBS Lett., 2000, 474, 137.
8) 大類 洋, 赤坂和昭, 目黒煕, "ホスフィン試薬による過酸化脂質分析法の開発", DOJIN NEWS, 1994, 69, 12.
 

よくある質問

Q

DPPPを用いて,培養細胞の脂質過酸化を観察しようと思いますが, 溶解液,希釈率,反応時間,反応方法等を教えてください。

A

細胞膜の過酸化物の定量を行った報告です。

この論文での使用方法を下記に簡単にまとめます。
・DPPPをDMSOに5 mM濃度に溶解する。
・上記溶液を1×107 cells/mLの中に50 μM DPPPになるように添加する。
・37℃で10 minインキュベートする。
・その後、Hank's solutionで2回洗浄する。

この細胞にH2O2やMeLOOHを加えることによる蛍光増強をみています。
DPPPはDMSOに溶解し、細胞液中に添加するだけで細胞の中に取り込まれています。
詳細は参考文献をご覧下さい。

【参考文献】
・Y.Okimoto,et al.,FEBS Lett., 2000474,137-140.
こちらも参考としてください。
・M.Takahashi, et al.,Free Radical Biology and Medicine, 2001, 31(2),164-174.

ストレスマーカー検出試薬 DPPP  ストレスマーカー検出試薬 DPPP 

取扱条件

規格
性状: 本品は、淡黄色粉末でクロロホルムに溶ける。
純度(HPLC): 97.0% 以上
IRスペクトル: 試験適合
クロロホルム溶状: 試験適合
取扱条件
1.保存方法:遮光, 2.窒素置換
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ストレスマーカー検出試薬 DPPP 

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日本同仁化学生化学用緩衝剤 PIPES 分子生物学用 

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生化学用緩衝剤 PIPES 分子生物学用 PIPES 分子生物学用

03 分子生物学関連試薬
13 生化学用緩衝剤

PIPES 分子生物学用

生化学用緩衝剤 PIPES 分子生物学用 

  • 分子生物学関連試薬
  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB72  PIPES 分子生物学用
  • CAS番号
    5625-37-6
  • 化学名
    Piperazine-1,4-bis(2-ethanesulfonic acid)
  • 分子式・分子量
    C8H18N2O6S2=302.37
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
20 g ¥3,800 344-08253
100 g ¥10,000 348-08251
500 g ¥36,200 340-08255
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技術情報

溶解例

15.12 g/50 ml [30 ml(2 mol/l-NaOH) + 水]

よくある質問

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか?

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 PIPES 分子生物学用  生化学用緩衝剤 PIPES 分子生物学用 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色結晶性粉末でアルカリに溶ける。
純度(滴定): 99.5% 以上
アルカリ溶状: 試験適合 0.030 以下(300 nm)
乾燥減量(110℃): 0.50% 以下
強熱残分(硫酸塩): 0.10% 以下
重金属(Pbとして): 0.0005% 以下
鉄(Fe): 0.0005% 以下
RNase: 不検出
DNase: 不検出
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
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日本同仁化学生化学用緩衝剤 CAPS 

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生化学用緩衝剤 CAPS CAPS

13 生化学用緩衝剤

CAPS

生化学用緩衝剤 CAPS 

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB06  CAPS
  • CAS番号
    1135-40-6
  • 化学名
    N-Cyclohexyl-3-aminopropanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C9H19NO3S=221.32
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
25 g ¥4,800 347-00482
100 g ¥12,400 343-00484
  • 生化学用緩衝剤 CAPS 
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技術情報

溶解例

11.07 g/50 ml(水)

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は?

A

-Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 CAPS 

Q

CAPSの調製方法を教えてください。

A

<試薬>
①0.1 mol/l CAPS溶液
 CAPS 22.131 gを純水300~400 mlに完全に溶解した後、
 純水で全容1000 mlとする。

②0.1 mol/l NaOH溶液
 NaOH 4 gを純水200~300 mlに溶解した後、
 純水で全容1000 mlとする。

<pH調製>
①液25ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 CAPS 

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

*プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか?

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 CAPS  生化学用緩衝剤 CAPS 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定): 99.0% 以上
水溶状: 試験適合 0.030 以下(270 nm)
乾燥減量(110℃): 0.50% 以下
強熱残分(硫酸塩): 0.10% 以下
重金属(Pbとして): 0.0005% 以下
鉄(Fe): 0.0005% 以下
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
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生化学用緩衝剤 CAPS 

関連製品

日本同仁化学生化学用緩衝剤 EPPS 分子生物学用 

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生化学用緩衝剤 EPPS 分子生物学用 EPPS 分子生物学用

03 分子生物学関連試薬
13 生化学用緩衝剤

EPPS 分子生物学用

生化学用緩衝剤 EPPS 分子生物学用 

  • 分子生物学関連試薬
  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB80  EPPS 分子生物学用
  • CAS番号
    16052-06-5
  • 化学名
    3-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]propanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C9H20N2O4S=252.33
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
20 g ¥6,200 347-08341
  • 生化学用緩衝剤 EPPS 分子生物学用 
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技術情報

溶解例

12.62 g/50 ml(水)

よくある質問

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか?

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 EPPS 分子生物学用  生化学用緩衝剤 EPPS 分子生物学用 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定): 99.5% 以上
水溶状: 試験適合 0.040 以下(320 nm)
乾燥減量(110℃): 0.40% 以下
強熱残分(硫酸塩): 0.10% 以下
重金属(Pbとして): 0.0005% 以下
鉄(Fe): 0.0005% 以下
RNase: 不検出
DNase: 不検出
エンドトキシン: 試験適合
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
1.保存方法:冷蔵
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生化学用緩衝剤 EPPS 分子生物学用 

関連製品

日本同仁化学ストレスマーカー検出試薬 3-Deoxyglucosone 

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ストレスマーカー検出試薬 3-Deoxyglucosone 3-Deoxyglucosone

02 酸化ストレス関連試薬

3-Deoxyglucosone

ストレスマーカー検出試薬 3-Deoxyglucosone 

  • 酸化ストレス関連試薬

ストレスマーカー検出試薬

  • 製品コード
    D535  3-Deoxyglucosone
  • CAS番号
    4084-27-9
  • 化学名
    3-Deoxy-D-erythro-hexos-2-ulose
  • 分子式・分子量
    C6H10O5=162.14
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 mg ¥13,200 341-90213
  • ストレスマーカー検出試薬 3-Deoxyglucosone 
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技術情報

溶解例

60 mg/mL(水)

参考文献

参考文献を表示する

1) F. Hayase, R. H. Nagaraj, S. Miyata, F. G. Njoroges and V. M. Monnier, "Aging of Proteins: Immunological Detection of a Glucose-derived Pyrrole Formed during Maillard Reaction in Vivo", J. Biol. Chem., 1989, 264, 3758.
2) S. Miyata and V. Monnier, "Immunohistochemical Detection of Advanced Glycosylation End Products in Diabetic Tissue Using Monoclonal Antibody to Pyrraline", J. Clin. Invest., 1992, 89, 1102.
3) S. Taneda and V. M. Monnier, "ELISA of Pentosidine, an Advanced Glycation End Product, in Biological Specimens", Clin. Chem., 1994, 40, 1766.
4) D. G. Dyer, J. A. Blackedge, S. R. Thorpe and J. W. Baynes, "Formation of Pentosidine during Nonenzymatic Browning of Proteins by Glucose", J. Biol. Chem., 1991, 266, 11654.
5) T. Shinoda, F. Hayase and H. Kato, "Suppres
sion of Cell-cycle Progression during the S Phase of Rat Fibroblasts by 3-Deoxyglucosone, a Maillard Reaction Intermediate", Biotechnol. Biochem., 1994, 58, 1936.
6) F. Hayase, Y. Konishi and H. Kato, "Identification of the Modified Structure of Arginine Residue in Proteins with 3-Deoxyglucosone, a Maillard Reaction Intermediate", Biosci. Biotechnol. Biochem., 1995, 59, 1407.
7) T. Niwa, "3-Deoxyglucosone: Metabolism, Analysis, Biological Activity, and Clinical Implication.", J Chromatogr. B. Biomed Sci. Appl., 1999, 731, 23.
8) 宮田哲、"蛋白糖化反応マーカーとしての3-DG",「蛋白の糖化」医学書院(繁田幸男、谷口直之編), 1997, p.57.
9) D. V. Zyzak, J. M. Richardson, S. R. Thoepe and J. W. Baynes, "Formation of Reactive Intermediates from Amadori Compounds under Physiological Conditions", Arch. Biochem. Biophys., 1995, 316, 547.
10) B. S. Szwergold, F. Kappler and T. R. Brown, "Identification of Fructose 3-Phosphate in the Lens of Diabetic Rats", Science, 1990, 247, 451.

よくある質問

Q

3-Deoxyglucosone(3-DG)は不安定な物質と聞いたことがありますが、保存しておけるのでしょうか?

A

粉末で保存する場合、下記項目に注意していただければ比較的安定です。
 1)吸湿に注意する(特に冷凍から取り出した時)
 2)冷凍保管を行う
 3)アミン(NH2)化合物との接触を避ける
この化合物は分子中に還元性のアルデヒド基を持ち、酸化され易いため注意してください。

水溶液としては、長期の保存は避けて下さい。

Q

3-Deoxyglucosoneは何に溶かせばよいでしょうか?

A

本品は水溶性の化合物ですので、水に溶かしてご使用できます。

またメタノール、DMSOなどにも溶解できます。

水溶液とする場合、超音波をかけて溶かしても支障はありません。 溶解性は60 mg/mL(水)濃度まで確認しております。

なお、本化合物は還元性アルデヒド基を持つため、一級アミンとシッフ塩基を形成したり、酸化剤により酸化されます。 よって、緩衝液や培地を使用する際は、一級アミンを持つアミノ酸や酸化剤を含まないものをご使用下さい。

ストレスマーカー検出試薬 3-Deoxyglucosone  ストレスマーカー検出試薬 3-Deoxyglucosone 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色~淡黄色固体で水に溶ける。
純度(HPLC): 99.0% 以上
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
1.保存方法:冷凍, 2.窒素置換,吸湿注意
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ストレスマーカー検出試薬 3-Deoxyglucosone 

関連製品

日本同仁化学生化学用緩衝剤 MES 分子生物学用 

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生化学用緩衝剤 MES 分子生物学用 MES 分子生物学用

03 分子生物学関連試薬
13 生化学用緩衝剤

MES 分子生物学用

生化学用緩衝剤 MES 分子生物学用 

  • 分子生物学関連試薬
  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB81  MES 分子生物学用
  • CAS番号
    145224-94-8
  • 化学名
    2-Morpholinoethanesulfonic acid, monohydrate
  • 分子式・分子量
    C6H13NO4S・H2O=213.25
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
20 g ¥3,200 344-08351
  • 生化学用緩衝剤 MES 分子生物学用 
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技術情報

溶解例

10.66 g/50 ml(水)

よくある質問

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか?

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 MES 分子生物学用  生化学用緩衝剤 MES 分子生物学用 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定): 99.5% 以上
水溶状: 試験適合 0.020 以下(300 nm)
乾燥減量(110℃): 6.0~9.0%
強熱残分(硫酸塩): 0.10% 以下
重金属(Pbとして): 0.0005% 以下
鉄(Fe): 0.0005% 以下
DNase: 不検出
RNase: 不検出
エンドトキシン: 試験適合
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
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生化学用緩衝剤 MES 分子生物学用 

関連製品

日本同仁化学生化学用緩衝剤 CHES 

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生化学用緩衝剤 CHES CHES

13 生化学用緩衝剤

CHES

生化学用緩衝剤 CHES 

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB07  CHES
  • CAS番号
    103-47-9
  • 化学名
    N-Cyclohexyl-2-aminoethanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C8H17NO3S=207.29
容 量 メーカー希望
小売価格
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和光純薬
25 g ¥4,600 342-04692
  • 生化学用緩衝剤 CHES 
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技術情報

溶解例

10.37 g/50 ml(水)

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は?

A

-Good’s Buffer特長-

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 CHES 

 

Q

CHESの調製方法を教えてください。

A

<試薬>
①0.1mol/l CHES 溶液
 CHES 20.729 gを純水300~400 ml に完全に溶解した後、
 純水で全容1000 ml とする。

②0.1 mol/l NaOH溶液
 NaOH 4 gを純水200~300 ml に溶解した後、
 純水で全容1000 ml とする。

<pH調製>
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 CHES 

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

*プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか?

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 CHES  生化学用緩衝剤 CHES 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定): 99.0% 以上
水溶状: 試験適合 0.025 以下(300 nm)
乾燥減量(110℃): 0.20% 以下
強熱残分(硫酸塩): 0.10% 以下
重金属(Pbとして): 0.0005% 以下
鉄(Fe): 0.0005% 以下
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
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生化学用緩衝剤 CHES 

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ストレスマーカー検出試薬 -Nucleostain- DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting- Nucleostain– DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting-

02 酸化ストレス関連試薬

Nucleostain– DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting-

ストレスマーカー検出試薬 -Nucleostain- DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting- 

  • 酸化ストレス関連試薬

ストレスマーカー検出試薬

  • 製品コード
    DK02  –Nucleostain– DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting-
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
20 samples ¥78,800 346-90143
キット内容
20 samples ・ARP-DNA Standard Solution
×(0, 2.5, 5.0, 10, 20, 40 AP sites/100,000 bp)  
・ARP Solution
・DNA Binding Solution
・Washing Buffer 
・HRP-Streptavidin
・TE Buffer
・Substrate Solution
・Filtration Tube
・96-well Microplate/U Bottom
各 250 μl × 1

250 μl × 1
10 ml × 1
× 1
25 μl × 1
40 ml × 1
10 ml × 1
20 tubes
× 1

  • ストレスマーカー検出試薬 -Nucleostain- DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting- 
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マニュアル

  • 取扱説明書 ストレスマーカー検出試薬 -Nucleostain- DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting-  日本語
    ストレスマーカー検出試薬 -Nucleostain- DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting- 
  • 取扱説明書 ストレスマーカー検出試薬 -Nucleostain- DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting-  English
    ストレスマーカー検出試薬 -Nucleostain- DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting- 
  • プロトコル ストレスマーカー検出試薬 -Nucleostain- DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting-  DNA の塩基損傷部位の数を測定したい
    ストレスマーカー検出試薬 -Nucleostain- DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting- 

技術情報

<キット以外に必要なもの>

・10 μL, 200 μL, 1 mLマイクロピペッター(可変式) ・200 μL 8連マイクロピペッター(可変式) ・インキュベーター(37℃)        ・マイクロプレートリーダー ・0.5 mL, 1.5 mL遠心チューブ ・遠心機 ・DNA精製キット※  ・ペーパータオル

※小社では、各種DNA精製キットを販売しております。
Get pureDNA Kit-Cell, Tissue(Code:GK03)
DNA精製に関するご質問は、カスタマーリレーション部までお問い合わせください。

参考文献

参考文献を表示する

参考文献

1) A. Sancar and G. B. Sancar, "DNA Repair Enzymes", Annu. Rev. Biochem., 1988, 57, 29.
2) T. Lindahl and B. Nyberg, "Rate of Depurination of Native Deoxyribonucleic Acid", Biochemistry, 1972, 11, 3610.
3) M. Liuzzi and M. Talpaert-Borle, "A New Approach to the Study of the Base-excision Repair Pathway Using Methoxyamine", J. Biol. Chem., 1985, 260, 5252.
4) M. Weinfeld, M. Liuzzi and M. C. Paterson, "Response of Phage T4 Polynucleotide Kinase Toward Dinucleotides Containing Apurinic Sites: Design of a 32P-postlabeling Assay for Apurinic Sites in DNA", Biochemistry, 1990, 29, 1737.
5) B. X. Chen, K. Kubo, H. Ide, B. F. Erlanger, S. S. Wallace and Y. W. Kow, "Properties of a Monoclonal Antibody for the Detection of Abasic Sites, a Common DNA Lesion", Mutat. Res., 1992, 273, 253.
6) J. A. Gralnick and D. M. Downs, "The YggX Protein of Salmonella enterica Is Involoved in Fe(II) Trafficking and Minimizes the DNA Damage Cause by Hydroxyl Radicals:Residue CYS-7 is Essential for YggX Function", J. Biol. Chem., 2003, 278, 20708.
7) J. W. Pippin, R. Durvasula, A. Petermann, K. Hiromura, W. G. Couser and S. J. Shankland, "DNA Damage is a Novel Response to Sublytic Complement C5b-9 Induced Injury in Podocytes", J. Clin. Invest., 2003, 111, 877.
8) S. Watanabe, T. Ichimura, N. Fujita, S. Tsuruzono, I. Ohki, M. Shirakawa, M. Kawasuji and M. Nakao, "Methylated DNA-binding Domain 1 and Methylpurine DNA Glycosylase Link Transcriptional Repression and DNA Repair in Chromatin", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2003, 100, 12859.
9) M. Endres, M. Ahmadi, I. Kruman, D. Biniszkiewicz, A. Meisel and K. Gertz, "Folate Deficiency Increases Postischemic Brain Injury", Stroke, 2005, 36, 321.
10) J.-M. Li, M. Mogi, K. Tsukuda, H. Tomochika, J. Iwanami, L.-J. Min, C. Nahmias, M. Iwai and M. Horiuchi, "Angiotensin II-Induced Neural Differentiation via Angiotensin II Type 2 (AT2) Receptor-MMS2 Cascade Involving Interaction between AT2 Receptor-Interacting Protein and Src Homology 2 Domain-Containing Protein-Tyrosine Phosphatase 1", Mol. Endocrinolo., 2007, 21(2):499.
11) D. R. McNeill and D. M. Wilson III, "A Dominant-Negative Form of the Major Human Abasic Endonuclease Enhances Cellular Sensitivity to Laboratory and Clinical DNA-Damaging Agents", Mol. Cancer Res., 2007, 5(1), 61.

よくある質問

Q

40 AP sites/100,000以上のstandard solutionを作成することは出来ますか?

A

このキットのstandard DNAは0~40AP site/100,000 です。
弊社では、50 AP sites/100,000までのARP-DNAを調製したことは
ありますが、それ以上はありません。

 理論的にはそれ以上のARP-DNAを調製することは可能ですが、
検量線の直線性がどこまで保持されるかは保証できません。
 高いレベルの塩基損傷を検出するには、サンプルDNAを同じ濃度の損傷の無いDNA
つまり、0AP site-DNAで測定レンジに希釈してアッセイを行い、
その後に実際のAP数を換算して求める方が良いと思います。

Q

DNA中の塩基損傷部位であるAP Siteは酸化ストレスの指標として使用されますが、 AP Siteの他に酸化ストレスマーカーとなるものはありますか?

A

酸化ストレスマーカーについてまとめた資料を作成しております。
カスタマーサポートの視点から、各酸化ストレスマーカーの特徴・測定サンプルの前処理方法などを記載しておりますので、ご参照ください。

下記URLよりダウンロード可能です。
 

「はじめての酸化ストレスマーカー測定プロトコル~カスタマーサポートの視点から~」

Q

DNAの純度が吸光度比で1.8以上を推奨されていますが、1.5程度でも測定出来ますか?

A

1.5では確認していませんので、保証は出来ません。
1.6~1.7のDNAでの測定では大きなバラツキは見られません。
推奨として1.8以上としております。

精製度が低いということは、タンパク質の混入が考えられます。
タンパク質はブロッキング作用を持ち、DNAがプレートに吸着するのを
防ぐ可能性がありますので、出来るだけ精度が高いものをご使用ください。

Q

抽出したDNAをARP化せずに保存することは可能でしょうか?

A

溶液状態での保存はAP siteが増えてくるので望ましくありません。(冷蔵・冷凍ともに)
ARP化せずに保存するのであれば、エタノール沈殿を行い、ペレット状にして冷凍保存してください。

 AP部位は確かに切断が起こりやすい部位です。

ただ、catalist freeの状態で保存されていれば3'側に切断があってもARPの検出には支障ありません。

むしろ抽出DNAは凍結状態以外の環境下で保存されていた場合、

自然に起こる脱塩基によって形成されたAP部位の方が重要な問題になります。

この場合、サンプルに同一条件下で保存されていた標準DNAが含まれる場合は

補正が可能になります。

 ARP修飾後のAP部位は安定ですので、抽出後の速やかなAPR処理をお勧めします。

Q

このキットを使用して何を測定することが出来るのでしょうか?

A

DNA中のAP siteの定量が出来ます。
AP siteとは[apurinic/apyrimidinic site]の略で、損傷したDNAに働く
塩基除去修復の過程で現れるものです。

DNAの損傷は複製時のDNA polymeraseのエラーに加えて、環境中の放射線や
紫外線またはアルキル化剤等の化学物質、生体内における活性酸素などの
代謝産物により起こります。

AP siteを測定することによりDNA損傷をみることが出来ます。

Q

このキットで測定できる検体数はどのくらいでしょうか?

A

20 samplesが20検体となります。
それぞれFiltration Tubeが20 samplesで20本入っています。
Filtration Tubeを一つのサンプルに1本使用しますので、このTubeの数が
測定できる検体数となります。

20 samplesも測定用のプレートは1枚です。

Q

96-wellマイクロプレートやフィルトレーションチューブ以外の溶液が余ったのですが、 廃棄方法を教えて下さい。

A

余った溶液は、以下の成分情報をご確認の上、ご所属の機関の廃棄ルールに従って廃棄して下さい。
<キットコンポーネント成分>

・ARP-DNA standard solution (水に希釈後廃棄、有害成分含まず)

・ARP solution (水に希釈後廃棄、有害成分含まず)

・DNA binding solution (水に希釈後廃棄、有害成分含まず)

・Washing buffer (水に希釈後廃棄、有害成分含まず)

・HRP-streptavidin (水に希釈後廃棄、有害成分含まず)

・TE buffer (水に可溶、EDTA・2NA 0.1%以下)

・Substrate solution (水に希釈後廃棄、有害成分含まず)

ストレスマーカー検出試薬 -Nucleostain- DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting-  ストレスマーカー検出試薬 -Nucleostain- DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting- 

取扱条件

取扱条件
1.保存方法:冷蔵
危険・有害
シンボルマーク
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日本同仁化学生化学用緩衝剤 0.5M EDTA 

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生化学用緩衝剤 0.5M EDTA 0.5M EDTA

03 分子生物学関連試薬

0.5M EDTA

  • 分子生物学関連試薬

生化学用緩衝剤

0.5 mol/l EDTA pH 8.0(±0.1, 25℃)

  • 製品コード
    MB01  0.5M EDTA
容 量 メーカー希望
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和光純薬
1 L ¥13,600 347-07481
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マニュアル

  • プロトコル 生化学用緩衝剤 0.5M EDTA  核酸を検出したい
    生化学用緩衝剤 0.5M EDTA 

参考文献

参考文献を表示する

1) J. Sambrook, E. F. Fritsch and T. Maniatis, "Molecular Cloning:A Laboratory Manual", 2nd ed ., Cold Spring Harbor LaboratoryNew York, 1989.

取扱条件

規格
性状: 本品は、無色液体である。
pH(25℃): 7.9~8.1
RNase: 不検出
DNase: 不検出
ファクター(滴定): 0.95~1.05
取扱条件
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生化学用緩衝剤 0.5M EDTA 

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日本同仁化学生化学用緩衝剤 EPPS 

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13 生化学用緩衝剤

EPPS

生化学用緩衝剤 EPPS 

  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤

  • 製品コード
    GB09  EPPS
  • CAS番号
    16052-06-5
  • 化学名
    3-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]propanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C9H20N2O4S=252.33
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
25 g ¥6,600 348-03192
  • 生化学用緩衝剤 EPPS 
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技術情報

溶解例

12.62 g/50 ml(水)

よくある質問

Q

Good’s Buffersの特長は?

A

– Good’s Buffer特長 –

1)水に良く溶け、濃厚な緩衝液が作成できる
2)生体膜を透過しにくい
3)酸解離平衡が濃度、温度、イオン組成の影響を受けにくい
4)金属イオンとの錯形成能が小さい
5)化学的に安定で、再結晶による高純度精製が可能
6)可視、紫外部に吸収を持たないために、目的成分の検出が容易

最適pH範囲がそれぞれ異なりますので、目的のpHのものをご使用ください。

生化学用緩衝剤 EPPS 

Q

EPPSの調製方法を教えてください。

A

<試薬>
①0.1 mol/l EPPS 溶液
 EPPS 25.233 gを純水300~400 mlに完全に溶解した後、
 純水で全容1000 mlとする。

②0.1 mol/l NaOH溶液
 NaOH 4 gを純水200~300 mlに溶解した後、
 純水で全容1000 mlとする。

<pH調製>
①液25 ml に②液をそれぞれ加えると下記のpH(20℃)が得られる。

生化学用緩衝剤 EPPS 

*希望の濃度やpHに調製する際はpHメーターを用いてください。
*緩衝液中にNaを入れたくない場合は、KOHなどをご使用下さい。

*プロトコル集にも「Good's buffer調整法」としてpdfファイルがございます。

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか?

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤 EPPS  生化学用緩衝剤 EPPS 

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定): 99.0% 以上
水溶状: 試験適合 0.040 以下(320 nm)
乾燥減量(110℃): 0.40% 以下
強熱残分(硫酸塩): 0.10% 以下
重金属(Pbとして): 0.0005% 以下
鉄(Fe): 0.0005% 以下
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
1.保存方法:冷蔵
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