mESF 小鼠ES细胞培养基础培养基 / mESF 添加物


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
136-17805 mESF Basal Medium 500ml
299-73301 mESF Supplement Set(×100) 1set
199-16051 StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution 106units
195-16053 StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution 106units×10

mESF基础培养基/mESF添加物mESF 小鼠ES细胞培养基础培养基 / mESF 添加物

用于小鼠ES细胞培养的无血清培养基


  本产品是用于小鼠ES细胞培养的无血清培养基。只需在基础培养基中添加mESF添加物和LIF后即可进行小鼠ES细胞培养。使用时无需添加FBS或血清代替品,同时无需使用饲养层细胞。



◆产品

  ● mESF基础培养基(编号No. 136-17805)

  ● mESF添加物(编号No. 299-73301)

    mESF Supplement A 5ml×1
    mESF Supplement B 5ml×1(含有0.0078% 2-mercaptoethanol)


特点

  ● 无需FBS和血清代替品(无血清培养基)

  ● 无需饲养层细胞

  ● 低浓度LIF下也能维持未分化能力


使用方法

  ● 往mESF基础培养基全量加入各种mESF Supplement及LIF。

※注 直接将mESF从现在使用中的培养基移出时,成功移植细胞数量有可能性减少。因此,请播种比移植时更多的细胞。此外,若不擅长直接移植,请按照以下顺序进行驯化。

  ①播种细胞时,将使用中的培养基与mESF培养基以1:1的比例混合。

  ②在后面的移植阶段,将使用中的培养基与mESF培养基以1:3、 1:7的比例混合,依次增加mESF培养基的用量。

 

小鼠ES胞D3细胞系的培养

  使用本产品培养小鼠ES细胞D3细胞系传代至第5代,观察到细胞形态、细胞繁殖能力、未分化标记物。

细胞形态

  观察到具有小鼠ES细胞特有光泽的细胞集落



mESF 小鼠ES细胞培养基础培养基 / mESF 添加物


胞繁殖曲线

 

  使用本产品后的繁殖曲线如下图。

mESF 小鼠ES细胞培养基础培养基 / mESF 添加物

(培养基组成)
  mESF基础培养基 + 各mESF Supplement + 1,000units/ml StemSure® LIF

(细胞播种数)

  7,000cells/well 

(使用骨胶原蛋白涂层处理12孔板) 


观察到未分化标记物

  各种未分化标记物(Nanog, Sox2, Oct3/4, SSEA-1)呈阳性。

 

mESF 小鼠ES细胞培养基础培养基 / mESF 添加物


 度LIF下的小鼠ES胞D3细胞系培养

  在低浓度LIF下(250, 500units/ml)培养了小鼠ES细胞D3细胞系。


集落形态(ALP染色)胞繁殖曲线

  细胞形态及细胞繁殖曲线如下图。 


 mESF 小鼠ES细胞培养基础培养基 / mESF 添加物


(培养基组成)

  mESF基础培养基 + 各mESF Supplement + 250 or 500 or 1,000units/ml StemSure® LIF

(细胞播种数)

  7,000cells/well 

(使用骨胶原蛋白涂层处理12孔板) 



ALP染色阳性集落形成率

  任何LIF浓度下的集落ALP染色几乎都呈阳性。

mESF 小鼠ES细胞培养基础培养基 / mESF 添加物


 

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参考文献

  • Furue, M., et al.: In Vitro Cell Dev. Biol. Anim., 41, 19-28, (2005).

  • Hayashi,Y., et al.: Stem Cells, 25, 3005-3015, (2007).