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上海金畔生物科技有限公司是一家销售日本关东化学试剂的中国代理公司。
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Kapa是世界上著名的生物技术公司。总部位于美国波士顿, 公司的主要理念是运用分子和遗传学技术来打造新一代的生物科学和医学诊断产品。
Kapa公司目前主要是在“直接进化(directed evolution technology platform)”的技术平台上来筛选和生产高品质的生物酶。目前生物医药领域所使用的大部分生物酶都只是天然存在形式,即使有些酶经过基因工程改造,但是由于酶分子自身的结构和功能限制,要想得到真正满足科研工作人员需要的产品,却是一件费时费力的事情,而且常常达不到预期的要求。“直接进化”技术正是针对这一现实情况,运用遗传,基因工程,生物信息学等技术来在分子水平上设计真正满足不同实际要求的生物酶。通过创新,Kapa为广大的科研人员提供了一系列拥有多项技术的产品,不仅能够满足普通科研需要,同时为高通量,基因芯片等高新技术的普及创造了条件。 运用“直接进化”技术,Kapa目前已经开发出来了以下的高品质产品:
1. Kapa2G超强PCR (Kapa2G Robust PCR)。适用范围:可用于普通的PCR反应中;AT和GC碱基含量高的扩增;模板 中含有常见的PCR反应抑制物,例如,盐离子,尿素,SDS,乙醇,EDTA等;石蜡油包被样品;粪便样品;菌落PCR。
2. Kapa2G 快速PCR(Kapa2G Fast PCR)。高灵敏度,高特异性。延伸速度高达1秒/kb,(常规延伸速度是60s/kb),可扩增出长达5kb的目的片段,节省大约75%的反应时间。
3.实时荧光定量PCR (Kapa SYBR qPCR)。和其他公司的类似产品相比,Kapa SYBR qPCR改造了Taq DNA多聚酶,而不是对荧光染料进行化学改造,因此大大提高了信号强度以及反应的有效性。更重要的是,Kapa的系列产品可以适用于市场上现有的Real-time PCR仪器。
4.Kapa长片段DNA多聚酶 (Kapa LongRange)。Kapa长片段DNA多聚酶是由Taq DNA聚合酶和修饰过的archael(B型)高保真DNA聚合酶组成的双酶系统。后者含有校正功能。这种双酶系统是专门为长片段和敏感PCR扩增而设计的。一般而言,普通的Taq酶由于缺少校正功能,因此随着错误碱基的不断产生,使得扩增过早的终止,从而大大降低了扩增效率。这也是导致在扩增长片段或者模板浓度很低时,使用普通Taq酶常常失败的原因。另一方面,虽然具有校正能力的多聚酶拥有很高的正确率,但由于其3到5的外切酶活性,引物会被降解掉,从而也影响到扩增的灵敏度。Kapa长片段产品的原理是:在Taq DNA多聚酶中加入具有校正能力并且修饰过的多聚酶,可以使得不匹配的碱基被修正;同时,和只有校正功能的多聚酶相比,kapa的双酶系统中具有校正功能的酶所占的比例较少,因此可以相对延长扩增的循环数和时间,从而提高产量,同时得到高保真的PCR产物。虽然两种酶都有5到3的DNA聚合功能,但是只有Taq酶具有依赖于双链的5到3的聚合酶活性,而只有B型DNA聚合酶具有3到5的外切酶功能(也就是校正功能)。
5.Kapa高保真DNA多聚酶 (Kapa Fidelity)。是经过修饰的,耐热的高保真DNA多聚酶。既有5到3的多聚酶活性,又有3到5外切校正功能,因此能够扩增出优质的高保真片段。高保真:Kapa高保真DNA多聚酶的扩增出正确片段的几率是普通Taq酶的15倍,KOD/Pfx2倍;应用广泛:可以扩增出长至6kb的质粒或者lambda DNA,或者长至2kb的基因组DNA扩增;用量少:由于其高活性,和其它的高保真产品相比,每个反应的用量要少,从而为实验者节省资金;易于克隆:Kapa高保真DNA多聚酶扩增出钝头产物,非常易于克隆;快速:扩增速度是pfu的2-3倍。 另外,还有普通的KapaTaq DNA多聚酶,以及热启动酶,T4连接酶,快速连接试剂盒等产品。