ExoIsolator Exosome Isolation Kit

08 ラベル化剤

ExoIsolator Exosome Isolation Kit

• ラベル化剤
• 細胞機能解析

エクソソーム精製キット

• テクニック不要の操作性
• 超遠心法と同等の回収実績
• フィルターホルダーは再使用可能

• 製品コード
  EX10　 ExoIsolator Exosome Isolation Kit

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マニュアル

Q

エクソソームがうまく回収できません。どのような原因が考えられますか。

A

以下の3つが原因として考えられますので、ご確認ください。

１．ろ過の際、減圧度が強すぎるとエクソソームの回収量が著しく減少いたします。推奨減圧度である-25 kPa またはそれよりも弱い減圧度でろ過を行ってください。
２．Isolation Filter には表裏があり、間違って表裏を逆転させてフィルターを使用するとエクソソームの回収率が低下します。Isolation Filer の表(光沢のある面)を上にしてご使用ください。詳細は取扱説明書および使用方法の動画をご覧ください。
３．Isolation Filter にトラップされたエクソソームを全て回収するためには、フィルター全体にPBSを万遍なくかけて回収する必要があります。こちらも、取扱説明書および使用方法の動画をご覧ください。

Q

回収したエクソソームは保存できますか。

A

4℃にて1ヶ月から半年間保存できます。長期間保存する場合は、-80℃で保管してください。ただし、凍結融解を極力避けるため、小分けし保存して下さい。

引用：吉岡　祐亮、落谷　孝広(2020)、エクソソーム実験ガイド　ISBN: 978-4-7581-2246-7

Q

血清含有培地で培養した細胞の培養上清からエクソソームを回収できますか。

A

血清含有培地の使用は推奨いたしません。細胞培養で使用される血清(FBS 等)にもエクソソームが含まれているため、血清を含む細胞培養上清から回収したエクソソームには血清由来のエクソソームも含有されてしまい、実験結果に影響を及ぼす可能性が考えられます。

Q

ExoIsolator でのエクソソームの回収率を教えてください。

A

サンプルによって回収率が変動する可能性がございます。
一例として、市販のウシ生乳由来エクソソームをExoIsolator で再精製して回収率を測定した実績を下記に示します。

タンパク質回収率 (%)	粒子回収率 (%)
34.6 (SD±3.9)	38.3 (SD±8.3)

※タンパク質量はBCA法、粒子数はナノ粒子トラッキング解析にて測定しています。

Q

培養上清からどのぐらいの量のエクソソームがとれますか。

A

細胞種により分泌されるエクソソーム量が異なりますので、回収できるエクソソーム量も細胞種や培養方法により異なります。一例として、HEK293S細胞(振盪培養にて培養)の培養上清 25 ml からのエクソソームを回収した実績をご紹介します。

回収タンパク質量 (μg)	回収粒子数 (particles)
11.2 (SD±2.09)	6.0E+09 (SD±1.0E+9)

※タンパク質量はBCA法、粒子数はナノ粒子トラッキング解析にて測定しました。

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