Cystine Uptake Assay Kit

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Cystine Uptake Assay Kit

• 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
• 細胞内代謝

シスチン取り込み検出キット

• シスチン取り込み能力を簡便に検出できる
• プレートリーダーを用いて検出が可能

• 製品コード
  UP05　 Cystine Uptake Assay Kit

<使用回数の目安> 100 testsあたり、96-well plate 1枚

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マニュアル

Q

Cystine Analogはどのトランスポーターを介して取り込まれるのでしょうか？

A

Cystine Analogはシスチン・グルタミン酸トランスポーター(xCT)を介して細胞内へ取り込まれます。

Q

細胞種の実績を教えて下さい。

A

下記の細胞において使用実績があります。

由来	細胞名
ヒト神経膠芽腫由来細胞	A172
ヒト肺胞基底上皮腺癌細胞	A549
ヒト悪性黒色種	A375
ヒト結腸腺癌	HCT116
ヒト子宮頸癌由来細胞	HepG2
白血病細胞	HL60
ヒトサルコーマ細胞	HT1080
マウス胚性線維芽細胞	MEF
ヒト肺小細胞​癌	SBC-5
アストロサイト―マ	U-251 MG

 

 

 

Q

Cystine Analogは細胞内に取り込まれた後、分解・代謝されるのでしょうか？

A

Cystine Analogは安定な構造を有しているため、実験操作内において分解されることはございません。

Q

Cystine uptake solutionは保存可能でしょうか？

A

Cystine uptake solutionは保存できません。添加前に必要量のCystine uptake solutionを調製して下さい。

Q

シスチンを定量することはできますか？

A

本製品を用いてシスチンを定量することはできません。

Q

細胞内に取り込まれたCystine Analogを定量することはできますか？

A

細胞内に取り込まれたCystine Analogを定量することはできません。本製品は、シスチン取り込み能力を数値化するためのキットです。

Q

蛍光シグナルの変化が観察されない場合、どうすればいいですか？

A

CA Uptake solutionによる細胞の処理時間を延長して(30分～1時間程度) ご検討下さい。

Q

バックグラウンドが高い場合、どうすればいいですか？

A

細胞に取り込まれなかったCystine Analogがウェル内に残存している可能性があります。PBSによる洗浄を繰り返してください。

Q

シスチン不含無血清培地以外にCA Uptake solutionの調製に使用できるバッファーはありますか？

A

HeLa細胞においてHBSSや0.1%Glucoseを含むPBS(+)を使用して測定した実績がございます。

Q

蛍光強度を細胞数で補正する方法を教えてください。

A

核酸染色剤による補正が可能です。また、小社製品"Cell Count Normalization Kit (製品コード：C544)"を用いて細胞数をカウントし、補正することも可能です。

Q

蛍光測定用のマイクロプレートはどのようなものが使えますか？

A

使用実績のあるマイクロプレートは下記の通りです。

社名	製品名	Cat No.
ibidi	μPlate 96 well ibiTreat black S 15	ib89626
AGC techno glass	EZVIEW Glass Bottom Culture Plate LB 96well	5866-096
Thermo Fisher	96 Well Black/Clear Bottom Plate, TC Surface, Pack of 10	165305

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。